版中国药典纯化水微生物限度检测方法验证方案

1、上海XXXX有限公司纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Pagel of 12方案编号VP-AV-QC-012-01生效日期设施/设备编号N/A设施/设备类型N/A所属部门/车间/功能间 名称及编号QC方案类型方法验证1. 审批起草人签名：姓名部门/职务签名日期起草人XXXQC专员审核人签名：姓名部门/职务签名日期审核人XXXQC主管审核人XXXQA主管批准人签名：姓名部门/职务签名日期批准人XXX质量总监批准人XXX副总经理上海XXXX有限公司纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 2 of 12方案编号VP-AV-QC-012-01生效日期2. 目录1. 审批12. 目录23. 目的

2、34. 范围35. 职责36. 执行程序 47. 描述48. 方法验证 48.1. 人员培训48.2. 文件确认58.3. 仪器确认58.4. 供试品确认 68.5. 培养基及缓冲液确认 68.6. 菌种确认78.7. 培养基78.8. 菌种：枯草芽抱杆菌、铜绿假单胞菌。 78.9. 供试品制备88.10. 试验结果98.11. 验证结果分析与评价 109. 偏差处理1010. 变更控制 1011. 附件日志 1112. 再验证 1113. 参考书目 11修订历史12上海XXXX有限公司纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 3 of 12方案编号生效日期3. 目的纯化水微生物限度检查采

3、用薄膜过滤法，验证该方法适用于纯化水中需氧菌总数的测定。4. 范围本验证方案适用于上海 XXXX有限公司QC实验室，对纯化水微生物限度检查方法（薄膜过滤 法）适用性的验证。5. 职责5.1. 验证小组组成:表5-1小组组成小组成员姓名部门/职务签名日期组长QC主管组员QC专员组员QC专员组员QA专员组员现场QA5.2. 验证小组组长负责5.2.1. 组织起草或审核验证方案及变更申请；5.2.2. 对验证小组成员进行培训；5.2.3. 验证方案的组织实施；5.2.4. 对验证过程中的记录审核，保证其真实性、可靠性和完整性；5.2.5. 组织验证报告的起草、汇总并参与对其进行审核及验证周期的拟定。

4、5.3. QA参与人员负责5.3.1. 审核验证方案、报告及报告中出现的偏差、变更；5.3.2. 参与验证方案的实施及评价;纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 4 of 12方案编号生效日期5.3.3.对验证方案及报告进行编号并纳入验证文件系统且归档。5.4.QC参与人员负责5.4.1.起草验证方案；5.4.2.已经批准的验证方案的具体实施；5.4.3.收集测试数据，应评估数据并对测试数据做出评论；5.4.4.参与偏差调查、变更申请等；5.4.5.起草验证报告。6. 执行程序6.1. 一旦方案被批准和发布，组长对本验证小组人员进行本方案的培训；6.2. 所有用于测试的仪器/仪表都必须

5、经过校验/验证后才能用于测试；6.3. 验证小组负责核查所有完成的测试结果和附件的完整性；6.4. 测试完成后，由组长及相关部门做出确认结论。7. 描述取三个不同批号的纯化水用薄膜过滤法检测微生物限度，通过比较试验菌的恢复生长结果评价整个检验方法的准确性、有效性，通过计算回收率来判断检查方法是否有影响，通过验证来确认薄膜过滤法适合于纯化水需氧菌总数的测定。三次试验中，稀释剂对照回收率应在50%200%范围内，试验组回收率也应在50%200%范围内。进行微生物限度检查方法（薄膜过滤法）验证时，所有的平皿和稀释剂都应该严格灭菌消毒、灭菌，确保对试验结果没有影响。8. 方法验证8.1. 人员培训表8

6、.1-1人员培训情况确认纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 5 of 12方案编号生效日期页 码Page 5 of 12纯化水微生物限度检测方法验证方案方案编号生效日期序 号参与人员是否已培训1是口否口2是口否口3是口否口结论（在下面相应的方框中打）合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期82 文件确认表8.2-1文件确认序 号文件名称文件编号是否已批准生效1工艺用水微生物限度检查操作规程IOP-QC-015-01是口 否口2菌落的计数与结果报告操作规程IOP-QC-007-01是口 否口3培养基灵敏度测试规程IOP-QC-O14-O1是口 否口4微生物限度检查操作规程IOP-QC

7、-010-01是口 否口5微生物限度/无菌检测方法验证规程SOP-QC-O23-O1是口 否口6微生物实验室培养基、溶液及试剂管理规程SOP-QC-O22-O1是口 否口7确认与验证管理规程SOP-QA-OO3-O1是口 否口8确认与验证文件的编号及格式管理规程SOP-QA-OO4-O1是口 否口9确认或验证报告书写管理规程SOP-QA-OO9-O1是口 否口10偏差管理规程SOP-QA-O16-O1是口 否口11变更控制规程SOP-QA-017-01是口 否口结论（在下面相应的方框中打 “”） 合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期83仪器确认纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page

8、 6 of 12方案编号生效日期页 码Page 6 of 12纯化水微生物限度检测方法验证方案方案编号生效日期表8.3-1测试仪器确认设备名称型号/规格设备编号制造商有效期至咼压蒸汽火菌锅密理博三联滤架密理博真空隔膜泵恒温培养箱移液枪生物安全柜结论（在下面相应的方框中打）合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期84供试品确认表8.4-1供试品确认名称日期取样人制水间出水口制水间回水口确认人/日期QA审核人/日期8.5.培养基及缓冲液确认表8.5-1培养基及缓冲液确认名称批号有效期至备注纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 7 of 12方案编号生效日期页 码Page 7 of 12纯

9、化水微生物限度检测方法验证方案方案编号生效日期表8.5-1培养基及缓冲液确认名称批号有效期至备注R2A琼脂培养基pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液0.9%无菌氯化钠溶液结论（在下面相应的方框中打）合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期86 菌种确认表8.6-1菌种确认名称来源代数有效期枯草芽孢杆菌（Bs）铜绿假单胞菌（Pa）结论（在下面相应的方框中打“V：）合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期Q -7代弄苴8.7. 培养基8.7.1. 培养基：按IOP-QC-014 培养基灵敏度测试规程检查。8.8. 菌种：枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌。8.8.1. 菌液制备：取枯草芽孢杆菌、铜绿假

10、单胞菌冻存管0.1ml接种至10mlTSB培养基，3035 C培养 1824h。纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 8 of 12方案编号生效日期8.8.2. 菌液计数：取枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌液0.1ml接种至TSA培养基，用涂布棒快速地将其均匀涂布，3035 C培养4872h计数。8.8.3. 菌落计数结果8.8.3.1.菌种名称稀释度菌落数（cfu）平均值（cfu）8.832菌种名称稀释度菌落数（cfu）平均值（cfu）8.9. 供试品制备8.9.1. 试验组：取纯化水 1ml注入滤器，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml冲洗，分别在冲洗液中加入上述 2种菌液各1

11、ml，过滤、各平行制备 2个平皿。8.9.2. 供试品对照组：取纯化水1ml注入滤器，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml冲洗，过滤、测定供试品本底菌数，各平行制备2个平皿。8.9.3. 稀释剂对照组：取100mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液注入滤器，加入上述2种菌液各纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 9 of 12方案编号生效日期1ml，测定其菌数，各平行制备2个平皿。8.10.试验结果8.10.1.试验组的菌数回收率（%）=（试验组的平均菌落一供试品对照组的平均菌落数）/菌液组的平均菌落数X100%。8.10.2.稀释剂对照组的回收率（%）=（稀释剂对照组的平均

12、菌落 /菌液组的平均菌落数）X100%。8.10.3.菌种名称批号菌落数（cfu）试验 组回 收率稀释剂 对照组 回收率试 验 组均 值菌 液 组均 值供试 品对 昭组八、1_L均 值稀释 剂对 昭组 八、均 值结论（在下面相应的方框中扌打 “”）合格口不合格口确认人/日期QA审核人/日期8.104菌种名称批号菌落数（cfu）试验 组回 收率稀释剂 对照组 回收率试 验 组均 值菌 液 组均 值供试 品对 昭组八、均 值稀释 剂对 昭组 八、均 值结论（在下面相应的方框中打“V：）合格口不合格口纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 10 of 12方案编号生效日期确认人/日期QA审核人

13、/日期8.11.验证结果分析与评价8.11.1. 以上验证结果表明，纯化水 采用上述方法进行需氧菌总数的测定。9. 偏差处理偏差处理：严格按照IOP-QC-015 工艺用水微生物限度检查操作规程操作，如方案执行过程中有偏差产生，根据SOP-QA-016 偏差管理规程进行处理；并按要求填写偏差列表（表9-1）表9-1偏差列表偏差编号偏差描述偏差分类（般或关键）确认人/日期QA审核人/日期10. 变更控制方案执行过程中如需要变更控制，应按照SOP-QA-017变更控制规程的流程进行处理，并按要求填写变更控制列表（表 10-1 ）和变更申请控制记录（SOP-QA-017-A ）。表10-1变更控制列表变更编号变更描述变更类型 （主要或次要）纯化水微生物限度检测方法验证方案页码Page 11 of 12方案编号生效日期页 码Page 11 of 12纯化水微生物限度检测方法验证方案方案编号生效日期确认人/日期QA审核人/日期11. 附件日志在附件日志中列明所有附件，每个附件都要有自己唯一的附件号，并在“描述”栏标明每一个 附件