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文档简介
1、.第1节 基因工程的根本工具知识要点:DNA重组技术的所需要的三种根本工具自学探究:一. 限制性核酸内切酶“分子手术刀1.限制酶存在的位置及种类?常用的两种限制酶是什么?2.限制酶的作用及特点?3.限制酶怎样切割DNA才能形成粘性末端和平末端?二. DNA连接酶“分子缝合针1. DNA连接酶的作用?2.目前常用的两类DNA连接酶的种类及作用特点?3.区别DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA解旋酶、DNA酶?三.基因进入受体细胞的载体“分子运输车1.什么是质粒?2.天然的质粒能做载体吗?做载体的质粒必须具备哪些 特点?3.为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?4.常用的“分子运输车有哪些?疑难点拨:
2、1.理解限制性核酸内切酶:例1 以下关于限制性核酸内切酶的说法,错误的选项是 A限制性核酸内切酶广泛存在于动植物体内,微生物内很少分布B限制性核酸内切酶可以被用来切割DNA分子,获取目的基因C一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列D限制性核酸内切酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键2.理解DNA连接酶:例2 以下关于DNA连接酶的作用,表达正确的选项是 A既能将双链DNA片断互补的黏性末端之间连接起来,也能将双链DNA的黏性末端之间的氢键进展连接B将单个核苷酸加到某DNA片断末端,形成磷酸二脂键C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D将断开的两个DNA片断的骨架连接起来,重新形成
3、磷酸二酯键3.理解载体:例3 作为基因的运输工具载体,必须具备的条件之一及理由是 A.可以在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因 B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达 C.具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件 D.可以在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进展挑选稳固练习:1以下说法中正确的有 A限制性核酸内切酶主要是从真核生物中别离纯化出来的 B所有限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列均由6个核苷酸组成C不同的限制性核酸内切酶切割DNA的位点不同 D有的质粒是单链DNA2.下图示限制性核酸内切酶切割某DNA分子的过程,从图中可知,该限制性核酸内切酶能识别的碱基
4、序列及切点是 ACTTAAG,切点在C和T之间BCTTAAG,切点在G和A之间 CGAATTC,切点在G和A之间 DGAATTC,切点在C和T之间3.基因工程的操作过程中需要的工具酶有 A限制性核酸内切酶、DNA聚合酶B限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体 CDNA连接酶、DNA聚合酶 D限制性核酸内切酶、DNA连接酶4.特定的限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,这是应用了酶的 A高效性 B专一性 C多样性 D酶作用条件的温和性5.一个双链DNA经一种限制酶切割一次形成的黏性末端个数为 A1 B2 C0 D2或06.DNA连接酶的作用是A.连接两个黏性末端
5、之间的氢键 B连接两个黏性末端之间的磷酸二酯键 C连接任意两个DNA分子 DABC都对7质粒是基因工程常用的载体,它的特点是 能自主复制 不能复制 构造简单 单链DNA 环状DNA 含有标记基因 A B C D8以下不属于基因工程的常用载体的是 A核DNA B动物病毒 C噬菌体的衍生物 D植物病毒9关于限制酶和DNA连接酶的理解,正确的选项是 A其化学本质都是蛋白质 BDNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键 C. 在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶 D. 它们不能被反复使用10.以下是几种不同限制性内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。答复以下问题: 1以上DNA片段是由 种限制性核酸内切酶切割后产生的。2假设要把相应片段连接起来,应选用 填“DNA聚合酶或“DNA连接酶3找出能连接的对应片段并写出连接形成的DNA片段 。11.下图所示为一种限制性核酸内切酶切割DNA分子:1这种限制性核酸内切酶切点是 间形成 个黏性末端,其特点是 。2此限制性核酸内切酶的特点是 。3如是G碱基发生基因突变,可能发生的情况 。4这种工具酶主要存在于 中。5假设用该酶从苏云金芽孢杆菌中提取到了抗虫基因,要将该基因导入棉花细胞中获得抗虫棉,那么所需运输工具称为 ,最常用的是 ,其次还有 和 。答案:1G
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