免疫组化诊断

1、免疫组织化学免疫组织化学(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)温州市人民医院病理科温州市人民医院病理科 潘丹潘丹 临床病理诊断中常用的抗体简介临床病理诊断中常用的抗体简介 人体组织细胞分类人体组织细胞分类 上皮细胞：包括鳞状上皮，腺上皮，尿路上皮。上皮细胞：包括鳞状上皮，腺上皮，尿路上皮。 间叶组织：包括脂肪，肌肉，血管，纤维结缔组织，骨间叶组织：包括脂肪，肌肉，血管，纤维结缔组织，骨和软骨组织，间皮。和软骨组织，间皮。 神经组织：神经元，胶质细胞，神经纤维。神经组织：神经元，胶质细胞，神经纤维。 淋巴造血：淋巴细胞，粒细胞，浆细胞，单核细胞。

2、淋巴造血：淋巴细胞，粒细胞，浆细胞，单核细胞。 内分泌和神经内分泌组织：甲状腺，肾上腺，垂体，胰内分泌和神经内分泌组织：甲状腺，肾上腺，垂体，胰腺的内分泌腺，各器官的神经内分泌细胞等腺的内分泌腺，各器官的神经内分泌细胞等 其他：黑色素细胞，性腺其他：黑色素细胞，性腺常用上皮性标记物常用上皮性标记物 l细胞角蛋白（细胞角蛋白（cytokeratin,CKcytokeratin,CK）l上皮膜抗原（上皮膜抗原（epithelial membrane antigen, EMAepithelial membrane antigen, EMA）l癌胚抗原（癌胚抗原（carcinoembryonic an

3、tigen,CEAcarcinoembryonic antigen,CEA）l其他：其他：villinvillin，Moc-31Moc-31，MUCMUC（粘蛋白）系列等（粘蛋白）系列等CytokeratinCytokeratin（keratinkeratin或或CKCK） 上皮细胞的骨架形成蛋白（中间丝），上皮细胞的骨架形成蛋白（中间丝），维持上皮细胞的结构和功能维持上皮细胞的结构和功能 分为分为I I型（型（ CK9-20CK9-20 ）和）和II II型型(CK1-8),(CK1-8),酸性和碱性细胞角蛋白，编码基因分别酸性和碱性细胞角蛋白，编码基因分别位于位于17q21.217q21.

4、2和和12q13.1312q13.13，共，共5454个基个基因因 表达方式与组织类型和细胞分化程度有表达方式与组织类型和细胞分化程度有关，具有高度的特异性关，具有高度的特异性 蛋白具有不同的分子量和等电点蛋白具有不同的分子量和等电点 细胞中细胞中keratinkeratin常成对出现（酸性和碱常成对出现（酸性和碱性配对出现）性配对出现） 根据氨基酸序根据氨基酸序列，将列，将KeratinKeratin按按分子量和等电点分子量和等电点进行二维分类进行二维分类CKCK抗体抗体广谱的细胞角蛋白广谱的细胞角蛋白抗体抗体特殊的细胞角蛋白特殊的细胞角蛋白抗体抗体常用的常用的CKCK抗体抗体AE1/AE3

5、:AE1/AE3:（CK panCK pan）l最常用，胞浆呈细丝状阳性最常用，胞浆呈细丝状阳性l正常上皮细胞阳性表达。正常上皮细胞阳性表达。l在其他非上皮，如肌成纤维细胞、蛛网膜细胞、平滑肌在其他非上皮，如肌成纤维细胞、蛛网膜细胞、平滑肌细胞、小血管内皮细胞等常呈阳性表达细胞、小血管内皮细胞等常呈阳性表达常用的常用的CKCK抗体抗体CK7CK7和和CK20CK20：分子量为分子量为54KD,54KD,正常乳腺，肺，尿路上皮、卵巢、子宫正常乳腺，肺，尿路上皮、卵巢、子宫内膜阳性表达，胃肠道，肝细胞，前列腺阴性表达内膜阳性表达，胃肠道，肝细胞，前列腺阴性表达主要用于乳腺癌，肺腺癌与胃肠道癌的诊断

6、与鉴别诊断主要用于乳腺癌，肺腺癌与胃肠道癌的诊断与鉴别诊断胰腺癌，胆管癌，卵巢和子宫内膜腺癌，尿路上皮癌阳胰腺癌，胆管癌，卵巢和子宫内膜腺癌，尿路上皮癌阳性表达。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌阴性表达性表达。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌阴性表达与与CK20CK20和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。值。常用的常用的CKCK抗体抗体CK7CK7和和CK20CK20：分子量分子量46KD46KD，正常胃肠道，尿路上皮，正常胃肠道，尿路上皮，MerkelMerkel细胞阳性表细胞阳性表达，肝细胞，乳腺，肺阴性表达达，肝细胞，乳腺，肺阴性表达主要用于胃肠道

7、腺癌，卵巢粘液性癌，主要用于胃肠道腺癌，卵巢粘液性癌，MerkelMerkel细胞癌的诊断细胞癌的诊断鳞癌，甲状腺肿瘤，胸腺瘤阴性表达鳞癌，甲状腺肿瘤，胸腺瘤阴性表达胆道和胰管的腺癌，小肠类癌，前列腺和间皮阳性表达胆道和胰管的腺癌，小肠类癌，前列腺和间皮阳性表达与与CK7CK7和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。常用的常用的CKCK抗体抗体CK5/CK6CK5/CK6：l分子量为分子量为58KD58KD和和56KD56KD的角蛋白，存在于鳞状上皮、导管的角蛋白，存在于鳞状上皮、导管上皮的基底细胞、肌上皮细胞和间皮细胞，腺上皮不表上皮的基底细胞

8、、肌上皮细胞和间皮细胞，腺上皮不表达达l用于鳞癌和腺癌鉴别，间皮瘤和腺癌的鉴别用于鳞癌和腺癌鉴别，间皮瘤和腺癌的鉴别l导管上皮良恶性增生的鉴别导管上皮良恶性增生的鉴别34BE1234BE12（CKHCKH）: : 高分子量细胞角蛋白，前列腺基高分子量细胞角蛋白，前列腺基底细胞标记，用于前列腺癌的诊断。底细胞标记，用于前列腺癌的诊断。CK19:CK19: 40KD 40KD的角蛋白，在单层上皮和间皮中表达，在的角蛋白，在单层上皮和间皮中表达，在肝细胞不表达，与肝细胞不表达，与CK7CK7联合用于鉴别肝细胞癌和胆管细联合用于鉴别肝细胞癌和胆管细胞癌；甲状腺肿瘤中，甲状腺乳头状癌常弥漫强阳性胞癌；甲

9、状腺肿瘤中，甲状腺乳头状癌常弥漫强阳性表达，良性和其他癌很少表达或灶性阳性表达。表达，良性和其他癌很少表达或灶性阳性表达。CK14CK14：50KD50KD的角蛋白，在复层上皮表达，是鳞状上皮的角蛋白，在复层上皮表达，是鳞状上皮的主要标记物。的主要标记物。常用的常用的CKCK抗体抗体 间叶组织的标记物间叶组织的标记物 波形蛋白（波形蛋白（vimentinvimentin， VIMVIM） 肌组织标记物：肌组织标记物：DesminDesmin（结蛋白）（结蛋白）, , actinactin（肌动蛋（肌动蛋白）白）, myogenin, myogenin（肌浆蛋白），（肌浆蛋白），MyoD1Myo

10、D1（肌调节蛋白（肌调节蛋白）等）等 脉管标记：血管内内皮细胞的标记物：脉管标记：血管内内皮细胞的标记物：CD34,CD31,CD34,CD31,淋巴管淋巴管D2-40D2-40 组织细胞的标记物：组织细胞的标记物：CD68, CD163,CD68, CD163,等等 间皮细胞的标记物：间皮细胞的标记物：calretinincalretinin，WT-1WT-1、mesothelialmesothelial等等 用于鉴别软组织肿瘤的来源用于鉴别软组织肿瘤的来源淋巴造血系统的标记淋巴造血系统的标记 淋巴造血组织，尤其淋巴细胞在其发育和分化过淋巴造血组织，尤其淋巴细胞在其发育和分化过程中能形成许多

11、分化性抗原，应用这些分化性抗原程中能形成许多分化性抗原，应用这些分化性抗原的特异性单克隆抗体能区分出免疫表型不同的细胞的特异性单克隆抗体能区分出免疫表型不同的细胞系，而且还能区分出同一细胞系的不同亚型和不同系，而且还能区分出同一细胞系的不同亚型和不同分化阶段的细胞群，因此可以利用此特性来诊断和分化阶段的细胞群，因此可以利用此特性来诊断和分类恶性淋巴瘤和白血病。分类恶性淋巴瘤和白血病。淋巴造血系统的标记淋巴造血系统的标记 白细胞共同抗原（白细胞共同抗原（leucocyte common leucocyte common antigen,LCA,CD45antigen,LCA,CD45） 免疫球蛋

12、白免疫球蛋白(immunoglobulin Ig)(immunoglobulin Ig) 全全B B细胞标记物细胞标记物:CD20, CD79a, PAX5, Bob1:CD20, CD79a, PAX5, Bob1等等 全全T T细胞标记物：细胞标记物：CD3CD3胞膜胞膜, CD43, CD5, CD7,CD2, CD43, CD5, CD7,CD2等等 T T淋巴细胞亚群标记物：淋巴细胞亚群标记物：CD4,CD8CD4,CD8 粒细胞和单核粒细胞和单核巨噬细胞相关标记物巨噬细胞相关标记物:MPO, CD34,CD68:MPO, CD34,CD68等等 浆细胞标记：浆细胞标记：CD38CD

13、38，CD138CD138 其他：其他：CD30,TDT,CD15CD30,TDT,CD15，CD56CD56，ALKALK，MUM1MUM1神经组织标记物神经组织标记物 胶质纤维酸性蛋白胶质纤维酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein (glial fibrillary acidic protein GFAP) GFAP) S-lOO S-lOO蛋白蛋白(S100 Protein) (S100 Protein) 神经元特异性烯醇酶神经元特异性烯醇酶 (Neuron Specific Enolase(Neuron Specific Enolase，NSE)NS

14、E) 髓磷脂碱性蛋白髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein(myelin basic protein，MBP)MBP)神经内分泌系统标记物神经内分泌系统标记物 lNSE(Neuron Specific Enolase,NSE(Neuron Specific Enolase,神经元特异性烯醇酶神经元特异性烯醇酶) )lCgA(chromogranin A CgA(chromogranin A 嗜铬颗粒蛋白嗜铬颗粒蛋白A)A)lSyn(synaptophysin Syn(synaptophysin 突触囊泡蛋白突触囊泡蛋白) )lCD56CD56器官或组织特异性抗原标记物器官或组

15、织特异性抗原标记物 l前列腺标记物：前列腺标记物： PSAPSA， PSAPPSAP，PSMAPSMA，P504sP504sl甲状腺标记物：甲状腺标记物：TGTG，CTCT，TTF-1TTF-1l甲状旁腺：甲状旁腺：PTHPTHl黑色素细胞标记物：黑色素细胞标记物：MB45MB45，S100S100，MelanAMelanAl肺腺癌的标记物：肺腺癌的标记物：TTF-1TTF-1，SP-ASP-A和和B B， Napsin ANapsin Al肝细胞癌标记物：肝细胞癌标记物：Hep-1Hep-1l乳腺：乳腺： MammaglobioMammaglobio，GCDFP15GCDFP15l结肠：结肠

16、： CDX2CDX2，B-cateninB-cateninl宫颈癌：宫颈癌：P16P16病原体的标记病原体的标记 EBVEBV HPVHPV HBsAg HBsAg 和和HBCAgHBCAg与肿瘤预后相关的标记物lKi67Ki67：核阳性，与肿瘤增殖相关，细胞周期中除：核阳性，与肿瘤增殖相关，细胞周期中除G0G0期细期细胞外，其余细胞均表达。肿瘤阳性细胞数越高，预后越胞外，其余细胞均表达。肿瘤阳性细胞数越高，预后越差。差。lP53P53：核阳性，肿瘤抑制基因，突变型：核阳性，肿瘤抑制基因，突变型P53P53蛋白稳定表达蛋白稳定表达，P53P53蛋白阳性表明肿瘤预后差。蛋白阳性表明肿瘤预后差。l

17、nm23nm23：胞浆阳性，抗转移基因，其表达降低与肿瘤的高：胞浆阳性，抗转移基因，其表达降低与肿瘤的高转移能力，复发相关。转移能力，复发相关。与肿瘤多药耐药相关的标记物Her-2Her-2ERCC1ERCC1PRM1PRM1BRCA1BRCA1作用机制作用机制抗凋亡，参与调抗凋亡，参与调节节P13K/AKP13K/AK途径和途径和MAPKMAPK激活途径激活途径过表达使停滞在过表达使停滞在G2/MG2/M期的损伤期的损伤DNADNA迅速恢复迅速恢复DNADNA修复的限速修复的限速酶，吉西他滨的酶，吉西他滨的结合位点结合位点高表达使细胞修高表达使细胞修复能力增强复能力增强阳性部位阳性部位胞膜胞

18、膜胞核胞核胞浆胞浆胞浆胞浆/ /核核判断标准判断标准 + +耐药药物耐药药物环磷酰胺环磷酰胺三苯氧胺三苯氧胺氨甲喋呤氨甲喋呤顺氯氨铂顺氯氨铂吉西他滨吉西他滨/ /顺铂顺铂顺铂顺铂与肿瘤多药耐药相关的标记物MDR1MDR1GSTGSTTSTSMDM2MDM2作用机制作用机制药泵作用药泵作用解毒作用解毒作用解毒作用解毒作用转化作用转化作用阳性部位阳性部位胞膜和浆胞膜和浆胞浆胞浆胞浆胞浆胞浆胞浆判断标准判断标准 + +10%10%耐药药物耐药药物恩环类恩环类紫衫类紫衫类长春花碱（新碱）长春花碱（新碱）顺铂顺铂恩环类恩环类氮芥氮芥环磷酰胺环磷酰胺5-FU5-FU多药耐药多药耐药与肿瘤靶向药物有关的免疫

19、标记物作用靶点作用靶点肿瘤类型肿瘤类型Tratugumab(Tratugumab(赫赛汀）赫赛汀）HER2HER2乳腺癌和胃癌乳腺癌和胃癌CetuximabCetuximab（艾比妥）（艾比妥）EGFREGFR结肠癌，肺腺癌结肠癌，肺腺癌BevacizumabBevacizumab（阿瓦斯汀）（阿瓦斯汀）VEGFVEGF转移性大肠癌，肾癌转移性大肠癌，肾癌LmatinibLmatinib（格列卫）（格列卫）C-KitC-Kit胃肠道间质瘤，慢粒胃肠道间质瘤，慢粒RituximabRituximab（美罗华）（美罗华）CD20CD20淋巴瘤淋巴瘤免疫组织化学在外科病理诊断中的应用免疫组织化学在外

20、科病理诊断中的应用免疫组织化学在外科病理诊断中的应用免疫组织化学在外科病理诊断中的应用 恶性肿瘤恶性肿瘤 组织的起源组织的起源? ? 良性还是恶性良性还是恶性? ? 肿瘤是原位还是侵袭性肿瘤是原位还是侵袭性? ? 肿瘤分类肿瘤分类? ? 癌的预后（包括分期）癌的预后（包括分期） 决定治疗的靶向决定治疗的靶向 其它方面其它方面 . .未分化恶性肿瘤的性质未分化恶性肿瘤的性质? ? 最佳首选的抗体组合方案：最佳首选的抗体组合方案：CK-panCK-pan（如（如MNF-116MNF-116），或鸡尾酒调制的），或鸡尾酒调制的CKCK抗体抗体 （上皮性肿瘤）（上皮性肿瘤）LCALCA（淋巴瘤）（淋巴

21、瘤）S100S100蛋白（恶性黑色素瘤，虽然一些癌会阳性蛋白（恶性黑色素瘤，虽然一些癌会阳性表达）表达）恶性肿瘤的性质恶性肿瘤的性质LCALCACytokeratinCytokeratinS100S100淋巴瘤淋巴瘤+ +* *- - -癌癌- -+ +-/+-/+恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤- - -+ +肉瘤肉瘤- - -（有时（有时 + +）-/+-/+ 一些淋巴瘤一些淋巴瘤 LCA LCA 阴性表达阴性表达, , 尤其是间变性大细胞性淋巴瘤尤其是间变性大细胞性淋巴瘤和淋巴母细胞性淋巴瘤和淋巴母细胞性淋巴瘤 儿童小圆细胞肿瘤的性质儿童小圆细胞肿瘤的性质 淋巴瘤淋巴瘤/ /白血病白血病: :

22、LCA+, CD99+/LCA+, CD99+/ 横纹肌肉瘤横纹肌肉瘤: : Desmin+, MyoD1+, myogenin+Desmin+, MyoD1+, myogenin+ EwingEwing肉瘤肉瘤/ /PNET: CD99+, Syn PNET: CD99+, Syn /+/+、s-100+s-100+ 神经母细胞瘤神经母细胞瘤: : CD99CD99, Syn+,CGA+, Syn+,CGA+、 NF+NF+ 促结缔组织生成性小细胞肿瘤促结缔组织生成性小细胞肿瘤: : CK +, Desmin+, CK +, Desmin+, WT1+WT1+癌可能的起源癌可能的起源 较常见

23、的临床情况：较常见的临床情况：淋巴结或其它部位不明起源的转移癌淋巴结或其它部位不明起源的转移癌卵巢腺癌，怀疑为胃肠道癌转移卵巢腺癌，怀疑为胃肠道癌转移膀胱腺癌，怀疑为侵犯膀胱腺癌，怀疑为侵犯/ /转移的前列腺癌或结肠癌转移的前列腺癌或结肠癌有结肠癌病史的患者肺部有一孤立性结节：结肠癌有结肠癌病史的患者肺部有一孤立性结节：结肠癌转移还是新的肺原发性肿瘤？转移还是新的肺原发性肿瘤？不明起源癌的免疫组织化学应用不明起源癌的免疫组织化学应用器官特异性标记物 甲状腺：Thyroglobulin（在100% 滤泡和乳头状癌+）TTF-1 Calcitonin（在90% 髓样癌+） 前列腺: PSA 女性生

24、殖道：CA125（黏液型常常阴性；间皮瘤和有时肺、乳腺及胰胆管腺癌会表达阳性）不明起源癌的免疫组织化学应用不明起源癌的免疫组织化学应用器官特异性标记物 肺：TTF-1（80% 腺癌阳性） 乳腺：Mmaglobin/GCDFP-15（50% 病例阳性；但涎腺和汗腺也会阳性） 肝：HEP-1（90%阳性） 肠：CDX-2 （100%一致性强阳性） 膀胱：Uroplakin（50%阳性）应用特殊的应用特殊的CKCK抗体：抗体：不明起源的腺癌不明起源的腺癌CK7 和 CK20 都是非器官特异性标记物，但对腺癌的起源判断十分有用 CK 7CK 7CK20CK20CK7+ CK20+CK7+ CK20+-

25、 - 女性生殖道黏液腺癌女性生殖道黏液腺癌- - 一些胃癌一些胃癌- -胰腺癌胰腺癌- -胆管癌胆管癌CK7+ CK20 CK7+ CK20 - - 各种腺癌各种腺癌- - 肺癌肺癌- - 乳腺癌乳腺癌- - 女性生殖道癌女性生殖道癌CK7 CK7 CK20+ CK20+- - 胃肠腺癌胃肠腺癌CK7 CK7 CK20 CK20 - - 前列腺癌前列腺癌- - 肾细胞癌肾细胞癌- - 肝细胞癌肝细胞癌 举例：举例：CK7CK7和和CK20CK20联合应用：联合应用： 3535岁女性，左颈淋巴结肿大，活检提示为转移性腺癌岁女性，左颈淋巴结肿大，活检提示为转移性腺癌，CTCT扫描未发现原发灶，免疫

26、组化标记显示肿瘤细胞扫描未发现原发灶，免疫组化标记显示肿瘤细胞表达表达CK7CK7（- -），），CK20(+)CK20(+)，CDX2CDX2（+ +），提示结直肠），提示结直肠来源，肠镜检查在横结肠发现来源，肠镜检查在横结肠发现12mm12mm的病灶，活检证的病灶，活检证实为腺癌。实为腺癌。不明起源的鳞癌或鳞样癌中的不明起源的鳞癌或鳞样癌中的免疫组织化学应用免疫组织化学应用 因为不同部位的鳞状细胞或鳞状细胞癌并不显示其独特的免疫表型，鉴别较困难 CD5：阳性支持胸腺起源 CK20：阳性提示为膀胱的移行细胞癌不明起源的小细胞癌中不明起源的小细胞癌中免疫组织化学的应用免疫组织化学的应用 CK2

27、0：Merkels 细胞癌阳性表达 TTF-1：90% 肺小细胞癌阳性表达，但在肺外的小细胞癌也会阳性（40%）卵巢腺癌：原发还是肠起源卵巢腺癌：原发还是肠起源? ?卵巢起源卵巢起源肠起源肠起源CK7CK7+ +CK20CK20 ( (但常会黏液腺癌阳性但常会黏液腺癌阳性表达表达) )+ +CDX-2CDX-2 ( (但黏液型可以阳性但黏液型可以阳性) )+ +膀胱活检腺癌：膀胱活检腺癌： 原发，前列腺还是结直肠起源原发，前列腺还是结直肠起源? ?膀胱腺癌膀胱腺癌前列腺癌前列腺癌结直肠腺癌结直肠腺癌CK7CK7+ (65-80%)+ (65-80%)CK20CK20+ (50-85%)+ (5

28、0-85%)+ +PSAPSA+ +CDX-2CDX-2+ (80%)+ (80%)+ +-catenin (-catenin (细胞核细胞核) )+ +肺腺癌：原发还是结直肠起源肺腺癌：原发还是结直肠起源? ?肺起源肺起源结直肠起源结直肠起源CK7CK7+ +CK20CK20+ +TTF-1TTF-1+ +CDX-2CDX-2+ +肿瘤良恶性鉴别肿瘤良恶性鉴别 在以下一些情况形态学诊断困难：在活检组织中挤压变形的细胞是癌细胞还是正常的淋巴细胞?黏膜活检中藏有癌细胞吗?增殖的细胞是良性增生还是恶性肿瘤?人为挤压的活检标本人为挤压的活检标本 有些活检（如支气管活检）显示人为挤压或烧灼（小细胞癌常

29、见）：不能确认失常的细胞是否为癌细胞 若 CK 阳性的非正常上皮细胞存在于一定的部位（如间质）或以某种组织结构（如浸润性条索）存在则可诊断为癌 不需再次活检就可作出诊断鼻咽部活检：有没有癌鼻咽部活检：有没有癌? ? 对部分鼻咽癌（NPC）病例诊断较难，因为肿瘤细胞被大量的淋巴细胞和浆细胞所掩盖（淋巴上皮癌样） CK-pan 染色: 仔细观察异常的阳性表现，如在完整的黏膜组织中有不规则的岛状、带状或单个分散的阳性细胞（正常仅表面及隐窝上皮细胞CK+）胃活检：是弥漫型癌胃活检：是弥漫型癌? ? 胃活检可能有不易察觉的弥漫性癌；对印戒细胞癌和黏液细胞癌的鉴别可能困难 CK-pan染色：存在于固有膜中

30、异常部位（正常没有CK+的细胞）和以异常结构（单个或索状细胞）存在的肿瘤细胞可被来辩认出来浆膜腔积液或活检：异常细胞浆膜腔积液或活检：异常细胞是癌细胞还是反应性间皮细胞是癌细胞还是反应性间皮细胞? ? 浆膜腔积液或活检中的一些异常细胞很难确定是癌细浆膜腔积液或活检中的一些异常细胞很难确定是癌细胞还是反应性间皮细胞胞还是反应性间皮细胞 免疫组织化学的应用：免疫组织化学的应用：BerEP4 BerEP4 或或 MOC-31MOC-31：阳性倾向为癌：阳性倾向为癌TTF-1TTF-1：肺癌表达阳性：肺癌表达阳性CalretininCalretinin：阳性倾向为间皮细胞：阳性倾向为间皮细胞反应性淋巴

31、组织增生还是淋巴瘤反应性淋巴组织增生还是淋巴瘤? ? 诊断一个淋巴瘤须符合以下条件：诊断一个淋巴瘤须符合以下条件：异常免疫结构异常免疫结构侵袭性侵袭性/ /破坏性的依据破坏性的依据异常的免疫表型异常的免疫表型正常免疫结构正常免疫结构 （反应性淋巴组织：淋巴结或结外）（反应性淋巴组织：淋巴结或结外）B B 淋巴细胞淋巴细胞( (CD20+) CD20+) 形成的结节形成的结节T T 淋巴细胞淋巴细胞( (CD3+)CD3+)；仅孤立的小群细胞或仅孤立的小群细胞或小群小群 CD20+CD20+细胞细胞表明表明 B B 细胞淋巴瘤的异常免疫结构细胞淋巴瘤的异常免疫结构B B 淋巴细胞滤泡淋巴细胞滤泡

32、 （CD20+CD20+）弥漫成片弥漫成片CD20+ CD20+ 的的B B淋巴细胞淋巴细胞* *异常免疫表型不适用于异常免疫表型不适用于T T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤, ,因为反应性病变会有成片因为反应性病变会有成片的的T T淋巴细胞淋巴细胞乳腺：导管增生或导管原位癌乳腺：导管增生或导管原位癌? ? 导管增生与DCIS很难鉴别-这对病人的治疗非常关键 在芯针穿刺中更加困难 免疫组化方法：高分子量 CK（如 34E12）在良性病变强阳性表达，但在 DCIS 通常阴性ER 在良性病变中通常呈局灶性阳性表达，而在低度DCIS 呈弥漫强阳性表达，提示为克隆（肿瘤）性过程CK5/6、CK14原位癌或浸润性

33、癌原位癌或浸润性癌? ? 在腺管周围有基底或肌上皮细胞的器官，此问题已能够解决，如乳腺、前列腺、涎腺 在原位病变中，仍然有完整的基底或肌上皮细胞围绕，虽然有时拉长或稀疏了，而浸润性病变周围缺乏这些细胞乳腺的原位癌或浸润性癌乳腺的原位癌或浸润性癌? ? Actin、calponin 或 p63能清晰地显示乳腺肌上皮细胞硬化性腺病与小管癌的鉴别小叶癌化的导管内癌/硬化性腺病还是真正的浸润性癌?前列腺原位癌还是浸润性癌前列腺原位癌还是浸润性癌? ? 34E12、CK14或 p63能清晰地显示基底细胞PIN还是前列腺浸润性癌? 拥挤或看上去不寻常的腺泡病灶：良性（如硬化性腺病或腺病）还是前列腺癌淋巴瘤

34、的分类淋巴瘤的分类 由于现代淋巴瘤分类需要免疫组织化学支持，因此应该应用免疫组化染色标记 B B祖细胞祖细胞前前B B细胞细胞未成熟的未成熟的B B细胞细胞成熟的成熟的B B细胞细胞激活的激活的 B B 细胞细胞浆细胞浆细胞前体细胞前体细胞; ; 非抗原依赖型非抗原依赖型初始初始 B B细胞细胞; ; 非抗原依赖型非抗原依赖型生发中心和标志生发中心和标志; ; 抗原依赖型抗原依赖型TdTTdTCD20, CD22CD20, CD22CD19, PAX5CD19, PAX5CD79aCD79aCD10CD10Bcl-6Bcl-6CD138CD138细胞浆细胞浆 CD22CD22淋巴瘤分类淋巴瘤分

35、类CD20 CD20 和和 CD3 CD3 组合组合CD20+CD20+B B细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤; ;必要时增加必要时增加其它标记物染色其它标记物染色CD3+CD3+T T或或NKNK细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤; ;如需要可增加如需要可增加其它标记物染色其它标记物染色（如（如CD56, CD30CD56, CD30）CD20-CD20- CD3- CD3-非淋巴造血系统肿瘤非淋巴造血系统肿瘤? ?浆细胞瘤浆细胞瘤? ?浆母细胞性淋巴瘤浆母细胞性淋巴瘤? ?T T 细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤? ?淋巴母细胞性淋巴瘤淋巴母细胞性淋巴瘤? ?内分泌肿瘤的分类内分泌肿瘤的分类 检测激素产物胰岛细胞瘤：分泌胰岛素

36、的肿瘤很少为恶性，而分泌胃泌素或胰高血糖素的肿瘤常为恶性垂体腺瘤：高泌乳素血症是由泌乳素瘤（肿瘤细胞prolactin +）还是由于泌乳素抑制因子紊乱刺激泌乳素分泌的另一类肿瘤软组织肿瘤的分类软组织肿瘤的分类 标记物是有限的纤维组织细胞瘤没有可靠的标记物S100：神经鞘膜肿瘤 (良性：弥漫；恶性：片状或甚至阴性)EMA：神经束膜瘤, 滑膜肉瘤Actin，desmin：肌和肌纤维母细胞肿瘤Cytokeratin：滑膜肉瘤、上皮样肉瘤、横纹肌样瘤软组织肿瘤的分类软组织肿瘤的分类CD31：血管肿瘤CD34：血管肿瘤、孤立性纤维性肿瘤、隆突性皮肤纤维肉瘤、血管周细胞瘤、梭形细胞脂肪瘤、上皮样肉瘤CD9

37、9：Ewings肉瘤/PNETHMB45：血管周上皮样细胞肿瘤重要的特异性标记物，如血管平滑肌脂肪瘤、淋巴管肌瘤病、糖瘤肝脏肿瘤的分类肝脏肿瘤的分类 是肝细胞肝癌（HCC）还是上皮样血管平滑肌脂肪瘤HCC最好的标记物是HEP-1（阳性 90%）HMB-45标记上皮样血管平滑肌脂肪瘤性腺肿瘤的分类性腺肿瘤的分类 支持性索肿瘤诊断的几种标记物：InhibinCD99 Melan-A/MART-1 生殖细胞肿瘤标记物：PLAPc-kit/CD117胸膜起源的恶性肿瘤分类胸膜起源的恶性肿瘤分类 鉴别间皮瘤与腺癌非常困难 支持间皮瘤诊断的标记Calretinin高分子量CK（如CK5/6）WT1 支持腺

38、癌诊断的标记BerEP4（尽管在间皮瘤中偶尔也有阳性表达）MOC-31TTF-1（肺源性腺癌）肿瘤的预后判断：预后因子肿瘤的预后判断：预后因子 激素受体，如 ER/PR+ 在乳腺癌中提示良好预后 增殖标记物（Ki67）是某些类型肿瘤的预后因子 癌基因及抑癌基因产物，c-erbB2, Rb, p16, p21, p27, ALK1肿瘤的预后判断：预后因子肿瘤的预后判断：预后因子 在某些淋巴瘤中，免疫组化标记可以提供预后信息高Ki67表达与套细胞淋巴瘤的不良预后有关间变性大细胞淋巴瘤：ALK+者预后好于ALK-者原发性系统性原发性系统性 ALCLALCL的总体生存率的总体生存率(Falini et

39、 al, 1999)(Falini et al, 1999)0510年ALCL, ALK+100%50%ALCL, ALK-肿瘤预后因素：病变范围肿瘤预后因素：病变范围 由于有些肿瘤呈弥漫性生长方式而且细胞较小（与间由于有些肿瘤呈弥漫性生长方式而且细胞较小（与间质细胞相似），因此很难确定其病变范围，如弥漫性胃癌质细胞相似），因此很难确定其病变范围，如弥漫性胃癌、乳腺小叶癌。、乳腺小叶癌。CK-panCK-pan能够显示所有肿瘤细胞能够显示所有肿瘤细胞肿瘤预后因素：病变范围肿瘤预后因素：病变范围 在肿瘤切除标本中，由于切缘烧灼后的出现的假象，很难判断切缘挤压的细胞是肿瘤细胞还是炎症细胞，标记CK

40、-pan可以解决这一问题肿瘤预后因素：隐匿性转移的分期肿瘤预后因素：隐匿性转移的分期 淋巴结和骨髓微转移通常提示预后差 对形态学上阴性的前哨淋巴结，应常规应用免疫染色：乳腺癌使用 CK黑色素瘤使用 S100 或 HMB45 前哨淋巴结阳性提示应进行淋巴结清扫确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 针对肿瘤细胞已知畸变或特异性的生物学特征的靶向治疗方法日益增多 靶向治疗费用常常较高，所以判断肿瘤是否会对治疗有反应是非常重要的 需要明确是否有相关靶分子的表达 免疫染色的可靠性和可重复性至关重要（阳性/阴性和染色强度）确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 乳腺癌：激素受体（ER, PR）激素（如 Tamoxi

41、fen）用于乳腺癌治疗已有相当长的时间了ER/PR阳性表达的肿瘤比阴性更敏感确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 抗-CD20（Rituximab）：愈来愈多地用于 B 细胞淋巴瘤和结节性淋巴细胞为主型Hodgkins淋巴瘤的治疗只有表达 CD20有反应治疗后，残余或复发的肿瘤会出现 CD20 失表达（抗-CD20 不再有效）确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 抗c-erbB2（Herceptin, Trastuzumab）已在表达、尤其是强阳性表达c-erbB2 的乳腺癌病人有效。确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 STI-571（Gleevec, Imatinib），是酪胺酸激酶受体抑制剂，对胃肠

42、间质瘤治疗有效显然在进行治疗前须确证c-kit/CD117的阳性表达肿瘤学家常要求病理学家对各种肉瘤进行 c-kit 染色，希望对阳性病例进行 STI-571 治疗决定治疗靶分子决定治疗靶分子 抗表皮生长因子受体（anti-EGFR, Gefitinib）：应用在肺癌、头颈部癌及一些其它类型的癌的治疗EGFR 正常表达在上皮细胞，通常在癌组织中强阳性表达证实诊断证实诊断 有时根据形态学特征已确定或几乎确定诊断，但因为病变罕见或必需免疫组织化学证实时，要做一些有针对性、有限的免疫组化染色。证实诊断证实诊断 某些病变的诊断可得以证实:Rosai-Dorfman 疾病（S100 蛋白）郎格罕氏细胞组织细胞增生症（S100 蛋白, CD1a）胃肠道间质瘤（c-kit/CD117）类癌（Syn/CgA）感染, 如 CMV, 疱疹, 肺孢子囊虫, 弓形虫病例1 女，36岁