细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

1、细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白月东10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用INNaOH（1ml）调整pH至7.0,再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白月东20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。3、SO%养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100

2、ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白月东12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到60C,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。5、2XY培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白月东16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果

3、需要用INNaOH(1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白月东20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。二、常用抗生素氨芳青霉素(ampicillin)(100mg/ml)10mlo分装成小份于-20C贮存。常以溶解1g氨芳青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于

4、生长培养基。竣芳青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g竣芳青霉素二钠盐于足量白水中，最后定容至10mlo分装成小份于-20C贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20C贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨芳青霉素-一起添加于生长培养基。卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解0.1g卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加

5、于生长培养基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解0.25g氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10mlo分装成小份于-20C贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10mlo分装成小份于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。蔡咤酮酸(nalidixicacid)(5mg/ml)溶解0.05g蔡咤酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10mlo分装成小份于-20C贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基

6、。四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解0.1g四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。小技巧：如配制10mg/ml卡那霉素，先在盐水瓶或血清瓶加入10ml双蒸水，高压，冷却后加入0.1g卡那霉素，混匀，滤膜过滤到试管中，再以1ml/管分装到EP管中待用。抗生素储存液工作浓度（mg/ml）保存条件严紧型质粒（ug/ml）松驰型质粒（ug/ml）氨苇青霉素50（溶于水）-202060竣苇青霉素50（溶于水）-20C2060氯霉素34（溶于乙醇）-20C25170卡那霉素10（溶于水）-20C1050链霉素10（溶于水）-20C1050四环素5（溶于甲醇）-201050抗生素储存液工作浓度（mg/ml）保存条件严紧型质粒（ug/ml）松驰型质粒（ug/ml）昂事霉素50（溶于水）-20C2060竣节青霉素50（溶于水）-20C2060氯霉素34（溶于乙醇）-20C25170卡那霉素10（溶于水）-20C1050链霉素10（溶于水）-20C1050四环素5（溶于甲醇）-20C1050利福平配法：浓度：50mg/ml配制量：50ml配制方法：1 .称取2.5g利福平置于50ml塑料离心管中。2