梅毒实验室诊断技术

1、实验实验(三三)通过对梅毒实验室检测方法的通过对梅毒实验室检测方法的学习，了解和掌握某些传染病学习，了解和掌握某些传染病的的快速筛查快速筛查方法在流行病学调方法在流行病学调查中应用的重要作用。查中应用的重要作用。 根据根据中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法及及中华人民共和国传染病防治法实施办法中华人民共和国传染病防治法实施办法特制定特制定梅毒诊断标准及处理原则梅毒诊断标准及处理原则 GB 15974GB 1597419951995此试验是此试验是VDRLVDRL试验的一种改良方法。试验的一种改良方法。优点是优点是试剂及对照血清已标准化，费试剂及对照血清已标准化，费用低。此法操

2、作简单，用低。此法操作简单，肉眼即可读出肉眼即可读出结果。结果。螺旋体体内的心磷脂、卵磷脂及胆固醇具有螺旋体体内的心磷脂、卵磷脂及胆固醇具有抗原性抗原性，可诱发机体可诱发机体产生产生（心磷脂或卵磷脂）（心磷脂或卵磷脂）反应素反应素，该反，该反应素可与从动物中提取的心磷脂应素可与从动物中提取的心磷脂（VDRLVDRL）抗原抗原在体在体外发生抗原抗体反应。外发生抗原抗体反应。将将VDRLVDRL抗原抗原吸附于活性炭颗粒表面，当遇到梅毒血吸附于活性炭颗粒表面，当遇到梅毒血清抗体清抗体(IgG(IgG、IgMIgM) )时，在物理的摇动、碰撞下，微时，在物理的摇动、碰撞下，微粒便相互粘附而形成肉眼可见

3、的黑色凝集颗粒，其粒便相互粘附而形成肉眼可见的黑色凝集颗粒，其结果便是阳性（结果便是阳性（+ +）。）。本试验适用于本试验适用于一期一期梅毒梅毒( (阳性率阳性率7575 8585) )及及二期二期梅毒梅毒( (阳性率阳性率100100) )诊断。也诊断。也适用于适用于疗效观察疗效观察，判定复发及再感染的监，判定复发及再感染的监测，由于操作简便，出结果快，亦适用于测，由于操作简便，出结果快，亦适用于普查、婚检、产前检查及其它健康检查等。普查、婚检、产前检查及其它健康检查等。1 1、试剂盒：梅毒快速血浆反应素诊断试剂、试剂盒：梅毒快速血浆反应素诊断试剂 上海科华生物技术有限公司上海科华生物技术有

4、限公司2 2、0.850.85生理盐水；生理盐水；3 3、采集静脉血、采集静脉血2.0ml,2.0ml,分离血清或分离血清或 血浆备用；血浆备用；4 4、加样器（、加样器（100ul)100ul)、吸头（、吸头（100ul) 100ul) 。1.A1.A行除第行除第1 1孔外，所有孔中均加入孔外，所有孔中均加入50l50l生理盐水；生理盐水；2.2.在第在第1 1孔、第孔、第2 2孔中分别加入孔中分别加入50l50l待检样本；待检样本；3.3.用加样器在第用加样器在第2 2孔混合后，吸出孔混合后，吸出50l50l至第至第3 3孔内，孔内，再混匀，依次作倍比稀释至第再混匀，依次作倍比稀释至第6

5、6孔，混匀后弃去孔，混匀后弃去50l50l；4.4.第第7 7孔用作阳性对照，加入孔用作阳性对照，加入50l50l阳性血清；阳性血清；5.5.在板中每一孔加入在板中每一孔加入50l50l的甲苯胺红抗原悬液，的甲苯胺红抗原悬液， 注意如从高浓度至低浓度加入，应更换吸头；注意如从高浓度至低浓度加入，应更换吸头；6.6.按每分钟按每分钟100100转摇动转摇动8-108-10分钟，置室温，肉眼可分钟，置室温，肉眼可 观察结果观察结果 。 孔孔 号号 1 2 3 4 5 6 7 81 2 3 4 5 6 7 8 稀释倍数稀释倍数 原倍原倍 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:2 1:4 1

6、:8 1:16 1:32 阳性阳性K K 阴性阴性K K生理盐水生理盐水(ul(ul) ) - - 50.0 50.0 50.050.0 50.0 50.0 50.0 50.0 - - 50.0 50.0 - -样样 品品(ul(ul) ) 50.050.0 50.050.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0弃弃50.0 -50.0 - - -阳性血清阳性血清(ul(ul) - - - - - - ) - - - - - - 50.050.0 - -阴性血清阴性血清(ul(ul) - - - - - - - ) - - - - - - - 50.0

7、50.0抗原悬液抗原悬液(ul(ul) ) 50.0 50.0 50.0 50.050.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0按每分钟按每分钟100100转速度，摇动卡片转速度，摇动卡片8-108-10分钟，置室温，肉眼观察结果分钟，置室温，肉眼观察结果. . 以出现凝集颗粒判为阳性，以出现凝集颗粒判为阳性，当凝集达到当凝集达到100%100%时可判时可判+，当凝集达到，当凝集达到75%75%时可判时可判+,+,当凝集达到当凝集达到50%50%时可判时可判+,+,当凝集达当凝集达到到25%25%时可判时可判+,+,当凝集

8、当凝集25%25%或无凝集现象或无凝集现象时可判时可判或或- -。活动性梅毒抗体滴度在活动性梅毒抗体滴度在1:81:8以上才有诊以上才有诊断意义。断意义。本试验在本试验在23-2923-29环境下进行。环境下进行。TRUSTTRUST试剂使用前应充分摇匀。试剂使用前应充分摇匀。此方法主要用于梅毒的筛选和治疗效此方法主要用于梅毒的筛选和治疗效果的观察，初诊病人抗体滴度如果果的观察，初诊病人抗体滴度如果1:81:8时应同时作特异性抗体试验证实或考虑时应同时作特异性抗体试验证实或考虑其它疾病。其它疾病。 作为治疗效果观察时，恢复期病人第一年内作为治疗效果观察时，恢复期病人第一年内每三个月复查一次，以后每半年复查一次观每三个月复查一次，