气相残留溶剂的出峰顺序的一般规律

1、文件名残留溶剂测定法标准操作规程贝码：1/18讯:SOP-02-03-45/3起草：审核：批准：执行日期：日期：日期：日期：签字：变更记载：执行2010年版分发部门：质量部、中心化验室印制份数:中国药典。3目的：为残留溶剂测定建立一个标准操作规程，以确保正确操作。范围：所有需进行残留溶剂测定的实验操作。责任人：检验员。内容：1,仪器与用具1.1 气相色谱仪一台，带火焰离子化检测器。1.2 积分仪或色谱数据处理机。1.3 色谱柱1.3.1 毛细管柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互相使用。(1)非极性色谱柱固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。(2)极性色谱柱固定液为聚乙二醇(P

2、EG-20M)的毛细管柱。(3)中极性色谱柱固定液为(35%)二苯基-(65%)甲基聚硅氧烷、(50%)二苯基-(50%)二甲基聚硅氧烷、(35%)二苯基-(65%)二甲基聚硅氧烷、(14%)氟丙基苯基-(86%)二甲基聚硅氧烷、(6%)鼠丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛细管柱等。(4)弱极性色谱柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷、(5%)二苯基-(95%)二甲基硅氧烷共聚物的毛细管柱等。1.3.2 填充柱以直径为0.180.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适”的填料作为固定相。2,系统适用性试验(1)用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于

3、5000;填充柱的理论板数一般不低于1000.(2)色谱图中，待测物色谱峰与相邻色谱峰的分离度应大于1.5.（3）以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差（RSD）应不大于5%;若以外标法测定，所得待测峰面积的RSD应不大于10%。3.供试品溶液的制备顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.11g;通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚碉或其他适宜溶剂；根据供试品和待测溶剂的溶解度，选择适宜的溶剂且应不干扰待测溶剂的测定。根据各品种项下残留溶剂的限度规定配制供试品溶液，其浓度应满足系统定量测定的需要。溶液直接进样精密称取

4、供试品适量，用水或合适的有机溶剂使溶解；根据各品种项下残留溶剂的限度规定配制供试品溶液，其浓度应满足系统定量测定的需要。4对照品溶液的制备精密称取各品种项下规定检查的有机溶剂适量，采用与制备供试品溶液相同的方法和溶剂制备对照品溶液；如用水作溶剂，应先将待测有机溶剂溶解在50%二甲基亚碉或N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀释。若为限度检查，根据残留溶剂的限度规定确定对照品溶液的浓度；若为定量测定，为保证定量结果的准确性，应根据供试品中残留溶剂的实际残留量确定对照品溶液的浓度；通常对照品溶液色谱峰面积不宜超过供试品溶液中对应的残留溶剂色谱峰面积的2倍。必要时，应重新调整供试品溶液或对照品溶液

5、的浓度。5测定法第一法（毛细管柱顶空进样等温法）当需要检查有机溶剂的数量不多，且极性差异较小时，可采用此法。色谱条件柱温一般为40100C；常以氮气为载气,流速为每分钟1.02.0ml;以水为溶剂时顶空瓶平衡温度为7085C,顶空瓶平衡时间为3060分钟；进样口温度为200C；如采用火焰离子化检测器（FID）,温度为250C。测定法取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样不少于2次，测定待测峰的峰面积。对色谱图中未知有机溶剂的鉴别，可参考附表2进行初筛。第二法（毛细管柱顶空进样系统程序升温法）当需要检查的有机溶剂数量较多，且极性差异较大时，可采用此法。色谱条件柱温一般先在40c维持8分钟，再以每

6、分钟8c的升温速率升至120C,维持10分钟；以氮气为载气，流速为每分钟2.0ml;以水为溶剂时顶空瓶平衡温度为7085C,顶空瓶平衡时间为3060分钟；进样口温度为200C;如采用FID检测器，进样口温度为250C。具体到某个品种的残留溶剂检查时，可根据该品种项下残留溶剂的组成调整开2程序。测定法取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样不少于2次，测定待测峰的隼面积。对色谱图中未知有机溶剂的鉴别，可参考附表3进行初筛。第三法（溶液直接进样法）可采用填充柱，亦可采用适宜极性的毛细管柱。测定法取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样23次，测定待测峰的峰面积.计算法（1）限度检查除另有规定外，按各品

7、种项下规定的供试品溶液浓度测L以内标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积与内标峰面积之比不得大于;寸照品溶液的相应比值。以外标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积不得大于对照溶液的相应峰面积。（2）定量测定按内标法或外标法计算各残留溶剂的量。6附注除另有规定外，顶空条件的选择：应根据供试品中残留溶剂的沸点选择顶空平衡温度。对沸点较高的残留溶k通常选择较高的平衡温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试产生的挥发性热分解产物对测定的干扰。顶空平衡时间一般为3045分钟，以保证供试品溶液的气-液两相有足够的时间达到平衡。顶空平衡时间通常不宜过长，如超过60分钟，可能引起顶空瓶的密性变差

8、，导致定量准确性的降低。对照品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空条件。定量方法的验证当采用顶空进样时供试品与对照品处于不完全相同的基质中，故应考虑气液平衡过程中的基质效应（供试品溶液与对照品溶液组成差异对顶空气-液平衡的影响）。由于标准加入法可以消除供试品溶液基质与对照品溶液基质不同所致的基质效应的影响，故通常采用标准加入法验证定量方法的准确性；当标准加入法与其他定量方法的结果不一致时，应以标准加入法的结果为准。干扰峰的排除供试品中的未知杂质或其挥发性热降解物易对残留溶剂的测定产生干扰。干扰作用包括在测定的色谱系统中未知杂质或其挥发性热降解物与待测物的保留值相同（共出峰）；或热降解产物与待测物

9、的结构相同（如甲氧基热裂解产生甲醇）。当测定的残留溶剂超出限度，但未能确定供试品中是否有未知杂质或其挥发性热降解物对测定有干扰作用时，应通过试验排除干扰作用的存在。对第一类干扰作用，通常采用在另一种极性不同的色谱柱系统中对相同供试品再进行测定，比较不同色谱系统中测定结果的方法。如两者结果一致，则可以排除测定中有共出峰的干扰；如两者结果不一致，则表明测定中有共出峰的干扰。对第二类干扰作用，通常要通过测定已知不含该溶剂的对照样品来加以判断。含氮碱性化合物的测定普通气相色谱仪中的不锈钢管路、进样器的衬管等对有机胺等含氮碱性化合物具有较强的吸附作用，致使其检出灵敏度降低，应采用惰性的硅钢采莲或锲钢材料

10、管路；采用溶液直接进样法测定时，供试品溶液应不呈酸性，以免待测物与酸反应后不易汽化。通常采用弱极性的色谱柱或其填料预先经碱处理过的色谱柱分析含氮碱性化合物，如果采用胺分析专用柱进行分析，效果更好。对不宜采用气相色谱法测定的含氮碱性化合物，如N-甲基叱咯烷酮等，可采用其他方法如离子色谱法等测定。检测器的选择对含卤素元素的残留溶剂如三氯甲烷等，采用电子捕获检测器（ECD）,易得到高的灵敏度。由于不同的实验室在测定同一供试品时可能采用了不同的实验方法，当测定结果处于合格与不合格边缘时，以采用内标法或标准加入法为准。顶空平衡温度一般应低于溶解供试品所用溶剂的沸点10c以下，能满足检测灵敏度即可；对于沸

11、点过高的溶剂，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基叱咯烷酮等，用顶空进样测定的灵敏度不如直接进样，一般不宜用,空进2方式测定。利用保留值定性是气相色谱中最常用的定性方法。色谱系统中载气的流速、,气的温度和柱温等的变化都会使保留值改变、从而影响定性结果。校正相对保留时间（RART）只受柱温和固定相性质的影响，以此作为定性分析参数较可靠。应用中通常选用甲烷测定色谱系统的死体积（t。）：RART="-t0t,R-卜式中tR为组分的保留时间；tR为参比物的保留时间。附表1药品中常见的残留溶剂及限度溶剂名称限度/%溶剂名称限度/%第一类溶剂:第二类溶齐广（应该避免使用）（

12、应该限制使用）苯0.0002二氧六环0.038四氯化碳0.00042-乙氧基乙醇0.0161,2-二氯乙烷0.0005乙二醇0.0621,1-二氯乙烯0.0008甲酰胺0.0221,1,1-三氯乙烷0.15正己烷0.029第二类溶剂甲醇0.3（应该限制使用）2-甲氧基乙醇0.005乙月青0.041甲基丁基酮0.005氯苯0.036甲基环己烷0.118三氯甲烷0.006N-甲基叱咯烷酮0.053环己烷0.388硝基甲烷0.0051,2-二氯乙烯0.187叱噬0.02二氯甲烷0.06四氢嚷吩0.0161,2-一甲基乙酰0.01四氢化蔡0.01N,N-一甲基乙酰胺0.109四氢吠喃0.072N,N-

13、二甲基甲酰胺0.088甲苯0.0891,1,2-三氯乙烯0.008二甲苯0.217溶剂名称限度/%溶剂名称限度/%1千类栩（入GMP第三类溶剂（药GMP其他质量要求限制使用)其他质量要求限制使用I)醋酸0.5甲基异,基酮0.5丙酮0.5异醇0.5甲氧基苯0.5正戊烷0.5止醇0.5正戊醇0.505仲醇0.5止丙醇0.50.5乙酸酯0.5异丙醇叔,基甲基醴0.5乙酸丙醋0.5异丙基苯二甲基业碉0.50.5第四类溶棚尴比乙醇0.5理学资"乙酸乙酯0.51,1-二乙氧基丙烷乙醴0.51,1-一甲氧基甲烷甲酸乙酯0.52,2-二甲氧基丙烷甲酸0.5异辛烷正庚烷0.5异丙醒乙酸异丁醋0.5甲基

14、异丙基酮乙酸异丙酯0.5甲基四氢吠喃乙酸甲酯0.5石油油3-甲基-1-TW0.5三氯醋酸J酮0.5三氟醋酸通常含有60%间二甲苯、14%对二甲苯、9%邻二甲苯和17%乙苯。药品生产企业在使用时应提供该类溶剂在制剂中残留水平的合理性论证报告。附表2常见有机溶剂在等温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART柱温40C甲醇1.8280.126乙醇2.0900.268乙月青2.1790.315丙酮2.2760.368异丙醇2.3560.411正戊烷2.4870.481乙醴2.4890.482甲酸乙酯2.5220.501二甲氧基甲烷2.5840.5341,1-二氯乙烯2.

15、6090.547乙酸甲酯2.6350.561二氯甲烷2.6550.572硝基甲烷2.8070.654止丙醇2.9820.7481,2-二氯乙烯3.1090.817叔,基甲基醴3.2520.894J酮3.4491.000仲醇3.6661.117极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART柱温40C正戊烷1.6820.032正己烷1.7870.075乙醴1.8420.097异辛烷1.9260.131异丙醒1.9430.138叔,基甲基醴2.0050.163正庚烷2.0210.169环己烷2.1590.2251,1-二氯乙烯2.2090.245二甲氧基甲烷2.2430.259甲基环己烷2.4050.324

16、丙酮2.8760.515甲酸乙酯2.9670.551乙酸甲酯3.0000.5641,2-二氯乙烯3.3470.705四氢吠喃3.4030.727甲基四氢吠喃3.4810.758四氯化碳3.6350.821编码SOP-02-03-45/3贝码9/18非极性色谱溶剂名称Tr/minRART柱温40C正己烷3.8981.242异丙醒3.9081.247乙酸乙酯3.9131.250三氯甲烷3.9541.272四氢吠喃4.2641.439异醇4.2641.4401,2-二氯乙烷4.5171.5761,1,1-三氯乙烷4.8081.733甲基异丙基酮4.9761.8231,2-二甲氧基乙烷4.9851.8

17、28苯5.2811.988乙酸异丙酯5.3112.004止醇5.3402.019四氯化碳5.4702.089环己烷5.5832.150甲基四氢吠喃5.6762.201三氯乙烯6.7602.785二氧六环6.8232.819异辛烷6.9572.891正庚烷7.4343.148乙酸丙醋7.4783.172甲基环己烷8.6283.792甲基异,基酮8.7383.8513-甲基-1-丁醇8.8703.922叱噬9.2834.145甲苯11.1805.168正戊醇11.3825.276甲烷1.594非极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART柱温80C乙酸异丁醋3.6112.099甲基丁基酮3.8592.3

18、45乙酸酯4.2992.778氯苯5.2533.726甲氧基苯7.4365.890异丙基苯8.1486.589J酮2.5021.000甲烷1.493柱温120c四氢化蔡8.06729.609J酮1.6301.000甲烷1.405极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART柱温40C1,1,1-三氯乙烷3.6530.828乙酸乙酯3.8100.891乙酸异丙酯3.9800.960甲醇4.0620.993J酮4.0791.0001,2-二甲氧基乙烷4.6041.212甲基异丙基酮4.7161.257二氯甲烷4.7581.274异丙醇4.8221.300乙醇4.9751.362苯4.9771.362乙酸丙

19、醋6.0201.784三氯乙烯6.6432.035甲基异,基酮7.2022.261乙月青7.3682.328乙酸异丁醋7.4972.380三氯甲烷7.9852.577仲醇8.3902.740甲苯8.7462.884止丙醇9.2383.083二氧六环10.3353.2561,2-二氯乙烷10.8273.724乙酸酯11.0123.799甲基丁基酮11.4863.990甲烷1.602极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART柱温80C异醇3.5773.045止醇4.4604.334硝基甲烷4.8854.948异丙基苯5.2885.543叱噬5.6256.0353-甲基-1-丁醇5.9346.486氯苯

20、6.4397.223正戊醇7.3328.527J酮2.1761.000甲烷1.491柱温120c甲氧基苯3.8379.890四氢化蔡7.47224.484J酮1.6501.000甲烷1.404附表3常见有机溶剂在程序升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART甲醇1.8460.127乙醇2.1210.272乙月青2.2010.314丙酮2.3030.367异丙醇2.4010.419正戊烷2.5120.477乙醴2.5190.481甲酸乙酯2.5440.494二甲氧基甲烷2.6110.5291,1-二氯乙烯2.6230.535乙酸甲酯2.6650.558二氯甲烷2

21、.6740.562硝基甲烷2.8390.649止丙醇3.0510.7601,2-二氯乙烯3.1280.801叔,基甲基醴3.3020.892J酮3.5071.000仲醇3.7561.131正己烷3.9661.241异丙醒3.9711.244乙酸乙酯3.9811.249三氯甲烷4.0051.262附表3常见有机溶剂在程序升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART四氢吠喃4.3871.462异醇4.3971.4681,2-二氯乙烷4.61241.5811,1,1-三氯乙烷4.8431.702甲基异丙基酮5.0871.8301,2-二甲氧基乙烷5.0991.837苯

22、5.3801.984乙酸异丙酯5.3981.994止醇5.4021.996四氯化碳5.5012.048环己烷5.6492.126甲基四氢吠喃5.7392.173三氯乙烯6.8152.738异辛烷6.9282.798二氧六环6.9282.798正庚烷7.5633.131乙酸丙醋7.5833.142甲基环己烷8.5813.666甲基异,基酮8.8303.7973-甲基-1-丁醇8.9683.870叱噬9.1783.980甲苯10.2594.548附表3常见有机溶剂在程序升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART正戊醇10.4484.647乙酸异丁醋10.6384.

23、747甲基丁基酮11.0254.951乙酸酯12.1755.555氯苯13.1666.076甲氧基苯15.2707.181异丙基苯15.7247.420四氢化蔡22.40910.933甲烷1.604附表3常见有机溶剂在程序升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值极性色谱柱溶剂名称Tr/minRART正戊烷1.6910.033正己烷1.8070.076乙醴1.8560.094异辛烷1.9570.131异丙醒1.9660.135叔,基甲基醴2.0530.167正庚烷2.0630.171环己烷2.2170.2281,1-二氯乙烯2.2670.246二甲氧基甲烷2.3030.260甲基环己烷2.4880.328丙酮2.988