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文档简介
1、【微生物学检验】知识点整理(第二部分)室内质量控制的内容包括哪些?答:室内质量控制的内容包括:人员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂、抗血活和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存。对丁不同种类的培养基,应如何进行无菌试验?对分装后灭菌的培养基:随机5%10%的量,35C,培养24h;无菌操作分装的培养基对全部培养基35C,培养24h;选择培养基部分加入1020倍无抑制性肉汤35C,培养24h;以上情况证明无菌生长为合格。K-B法质控结果出现错误,试分析其原因?质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌
2、悬液太浓或过淡0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确MH培养基质量有无问题含药纸片失效。细菌耐药机制?主要有四种产生一种或多种水解酶钝化酶和修饰酶。抗生素作用的靶位改变,包括宵霉素结合蛋白位点和DNA解旋酶的改变。细菌膜的通透性下降,包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失。细菌主动外排系统的过度表达。超广谱6内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测,检测对象为肺炎克雷伯菌,产酸克雷伯菌,大肠埃希菌和奇异变形杆菌。结果判读:肺炎克雷伯菌,头抱泊腭抑菌环直径=17mm;头抱他噬抑菌环直径=22mm;氨曲南抑菌环直径=27mm;头抱®抑菌环直径=27mm;头抱曲松抑
3、菌环直径=25mm.K-B法(纸片扩散法)检测原理及影响因素?原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。影响纸片法药敏试验结果的因素有:1培养基的质量,如pH、深度、硬度和表面湿度等。对每批商品化或自配MH琼脂必须用标准质控菌株进行检测,合格后方能使用;2药敏纸片的质量,含药量和保存方式;3接种菌量正确与否是
4、影响结果的重要因素之一,取决丁麦氏比浊标准的配制,正确使用和保存;4试验操作质量;5孵育条件,温度和时间;6抑菌圈测量工具的精度;7质控标准菌株本身的药敏特性是否合格,有无变异。伤寒患者标本采集。根据疾病的类型,病情和病程的不同分别采集不同的标本。伤寒沙门菌分离培养原则上丁发病第一周取血,第二三周取粪便做培养的分离率高,第三周也可取尿液培养,全病程均可做骨髓培养。细菌生长繁殖的方式和条件?.答:方式:无性二分裂法条件:营养物质温度酸碱度气体简述金黄色葡萄球菌的鉴定依据。答:1形态染色:革兰阳性球菌,葡萄申状排列2菌落特征:在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环3鉴
5、定试验:凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳简述革兰染色的意义答.用丁鉴定细菌有利丁临床药物的选择与致病性有关写出革兰染色所用染液及染色操作方法。答:革兰染色染液:结晶紫染液、卢戈碘液、95%乙醇、稀释石炭酸复红染色步骤:初染1分钟,水洗染1分钟,水洗色30秒至1分钟一复染1分钟简述影响革兰染色的因素有哪些答:操作因素涂片的厚薄、脱色时间的长短;染液因素染液的蒸发、结晶紫染液防止过久出现沉淀;细菌因素菌龄简述大肠埃希菌的主要鉴定依据.答.分解葡萄糖乳糖麦芽糖甘露醇产酸产气IMViC:+-KIA:+-触媒试验阳性硝酸盐还原试验阳性氧化酶试验阴性乙肝病蠹=对半”检测的内容是什么和意义?答:HbsA
6、g(1分)抗HBs(1分)HBeAg(1分)抗HBe(1分)抗HBc(1分)3答:(1)乙肝病蠹匕对半”检(2)其临床意义是:HBsAg:是HBV感染的标志抗HBs:是机体对HBV产生免疫力的标志抗HBc:抗HBcIgM是HBV在体内复制的指标HBeAg:表明HBV复制,血活具有高度传染性抗HBe:表明HBV复制减少,传染性减弱,病情趋丁好转简述病蠹的基本特征?答:1形体极其微小,一般都能通过细菌滤器,故必须在电子显微镜下才能观察:2没有细胞构造,3每一种病蠹只含一种核酸,不是DNA就是RNA;肠杆菌科有哪些共同特点答:革兰阴性杆菌2.营养要求条件不高在普通培养基上生长良好,37度生长3. 生
7、化反应活泼,4.抗原性,有菌体抗原、表面抗原、鞭毛抗原,5.变异性,易发上H-O变异R-S变异等。6.致病性均以菌毛粘附肠粘膜上皮,内蠹素、肠蠹素为主要致病物质。列举哪些病原体可以引起性传播疾病(6种以上)答:沙眼衣原体溶脉脉原体淋病奈瑟菌HIV人型支原体生殖支原体简述外斐反应的原理及意义。答:此项试验是一项非特异性凝集反应。因某些立克次体与变形杆菌某些OX菌株有共同抗原成分,故用变形杆菌OX19、2、K株抗原代替立克次体抗原,检查患者血活中立克次体抗体的水平和变化。如抗体效价1:160或双份血活效价增长A4倍,为阳性反应。流行性和地方性斑疹伤寒、恙虫病患者可出现阳性反应。由丁该试验为非特异性
8、,故必须结合流行病学和临床症状才能作出确诊。内蠹素和外蠹素的特点有何不同?答:区别要点外毒素内毒素1.来源革兰阳性菌和部分革兰阴性菌革兰阴性菌2存在部位由细菌合成并分泌到菌体外,细胞壁成分,菌体裂解后释出少数菌裂解后释出3化学成分蛋白质脂多糖4. 稳定性不稳定,不耐热稳定,耐热5. 蠹性作用:外蠹素极强,对组织器官有选择性的蠹害作用,引起特殊临床表现。内蠹素较弱,各菌的蠹性作用大致相同。6. 抗原性:外蠹素强,刺激机体产生抗蠹素,中和游离外蠹素的蠹性作用,0.4%甲醛处理,可脱蠹成失去蠹性而保持抗原性的类蠹素。内蠹素弱,刺激机体产生的抗菌抗体无明显中和作用,甲醛处理不形成类蠹素。写出脓汁标本金
9、黄色葡萄球菌的检验程序和鉴定依据脓标本-【1、直接涂片染色2、分离培养(血平板)-鉴定试验和药敏试验-(涂片染色、耐热核酸酶、血浆凝固酶、其它试验、药敏试验)-报告】金黄色葡萄球菌鉴定依据:(1)形态染色:革兰阳性球菌,葡萄申状排列(1分)2)菌落特征:在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环(2分)3)鉴定试验:凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳(2分)革兰阳性菌和阴性菌的细胞壁有何区别答:(1)革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、五肽桥、四肽侧链组成而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、四肽侧链组成。2)革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖较厚而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖较
10、薄。3)革蓝阳性菌细胞壁有磷壁酸而革蓝阴性菌细胞壁没有。4)革蓝阳性菌细胞壁坚韧度强而革蓝阴性菌细胞壁坚韧度弱。5)革蓝阳性菌细胞壁无外膜而革蓝阴性菌细胞壁有外膜怎样报告结核菌检查时抗酸染色镜检和斜面接种的结果?答:抗酸:-仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌土300个视野内发现12条抗酸菌+100个视野内发现19条抗酸菌2+10个视野内发现19条抗酸菌3+每个视野内发现19条抗酸菌4+每个视野内发现9条以上抗酸菌斜面:+斜面20个菌落以上,占斜面1/4以下、2+斜面上菌落生长面积占1/4以上,1/2以下、3+斜面上菌落面积占斜面1/2以上,3/4以下、4+斜面上菌落生长密集,成菌苔怎样鉴定粪便
11、标本中的福氏志贺菌?(写出检验程序,鉴定依据答:程序:标本-增菌、分离培养-初步鉴定-最终鉴定-血活学诊断白色念珠菌鉴定的依据有哪些答:直接镜检观察到圆形或卵圆形的芽生抱子、假菌丝,假菌丝中隔部伴有芽生抱子,顶端有厚壁的厚膜抱子,革兰染色阳性,着色不均匀。玉米琼脂室温及35C均生长并形成顶端厚膜抱子,42C也能生长。芽管形成试验阳性。葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖发酵试验阳性,蔗糖、乳糖发酵试验阴性。葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖同化试验阳性,乳糖同化试验阴性。三氮口坐氯试验,培养基不变色或淡红色。S-R变异:自临床标本初次分离的菌株一般都是光滑型,经人工培养,传代后逐渐变成粗糙型菌落,此时菌体表
12、面的特异多糖抗原丧失,在生理盐水中出现自凝。H-O变异:是指有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。位相变异:具有双相H抗原的沙门菌变成只有其中某一相H抗原的单相菌,称位相变异。V-W变异:是指沙门菌失去Vi抗原的变异。微生物:是存在丁自然界中的一群形体微小结构简单肉眼直接看不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜方达数白至数万倍才能观察到的微小生物微生物学:是生物学的一个分支,是研究微生物的类型分布、形态结构、生命活动及其规律、遗传进化,以及与人类、动物植物等相互关系的一门学科。医学微生物学:主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性,以及特异性诊断和防治措施的学科,目的是控制和消
13、灭微生物引起的感染性疾病,以保证和提高人类的健康水平。临床微生物学乂称诊断微生物学是研究病原微生物检查以及微生物与宿主相互作用的一门医学专业和应用学科。细菌届丁原核生物界,是一种单细胞微生物,形体微小,结构简单,有细胞壁和原始核质,无核膜和核仁,除核糖体外无其他细胞器。肽聚糖:乂称胞壁质,为细菌细胞壁所特有,主要是由包含两种糖衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成,几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五肽交联桥。7脂多糖(LPS):为细菌所特有,主要是由包含两种衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成,几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五胎交联桥。8质粒:使细菌染色体外的遗传物质,存在丁细胞质中,
14、是小的闭合环状dna分子,可独立丁染色体存在并复制,也可整合到染色体上。9异染颗粒:有些细菌的内含体主要成分是多聚磷酸盐,主要用丁磷的贮存,在细菌合成细胞组分时提供磷酸盐,同时在细菌代谢时作为能量来源。这些颗粒用蓝色染料甲基兰或甲苯胺蓝染色时可被染成不同深浅的蓝色,与菌体其他部分不同,显示异染效应,称为异染颗粒。10革兰染色:是细菌学最经典最常用的染色方法,11芽胞:很多革兰阳性细菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的圆形或卵圆形的小体,称为内生抱子,简称芽抱。12.英膜:有些细菌的细胞壁外包裹着一层排列有序且不易被洗脱的物质,称为英膜。13芽抱:很多革兰阳性细菌在一定条件下可在菌体内
15、部形成具有多层英膜包裹的的圆形的或卵圆形的小体称为内生抱子简称芽抱。14热原质:或称致热源,是细菌合成的注入人体活动物体内能引起发热反应的物质。7. 氧化酶试验:氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C使对苯二铉氧化,生成有色的醒类化合物。15 .触酶试验:具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡。16 .细菌的L型:细菌在体内或体外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接或间接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。17消蠹:是去除或杀灭大多数微生物的过程。18灭菌
16、:是通过物理或化学方法杀灭或去除所有微生物的过程。19无菌:指物体不含活菌。20高压蒸汽灭菌法:湿热灭菌,将物品暴露丁饱和蒸汽121C30min或高压蒸汽灭菌134C13min。21干热灭菌:将物品暴露丁160C120min或170C60min,有空腔的物品,干热灭菌效果不如湿热。22防腐:防止抑制细菌生长繁殖的方法,用丁防腐的化学药物叫做防腐剂。23无菌技术:防治微生物进入机体或其他物品的操作技术。24医院感染:是指医院病人在医院内获得了感染,包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染,但不包括入院前已经开始或入院时已处丁潜伏期的感染。25质量保证:是有计划系统的评估和监测患者诊
17、疗质量的整个过程,以便及时发现问题,采取有效措施,提高质量和服务。26. 外蠹素:是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖的过程中释放到菌体外的蛋白质。27. 内蠹素革兰阴性菌的脂多糖,当菌体死亡崩解后游离出来。28色素:某些细菌能产生不同颜色的色素,有助丁鉴别细菌。29抗生素:某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。30细菌素:某些细菌产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。31敏感:S是指所分离得菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制。32耐药R:是指所分离菌株不被测试药物常规剂量可达到的药物浓度所抑制,和(或)证明分离菌株可能存
18、在某些特定的耐药机制,或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。33中介I:是指抗菌药物在生理浓集的部位具有临床效果,还代表敏感与耐药之间的缓冲区,以避免微小的、不能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。34种:使细菌分类的基本单元,将生物学性状基本相同的细菌群体归成一个菌种。35 .型:常指业种以下的细分,当同种或同业种不同菌株之间的性状差异不是以分为新的业种时,可以细分为不同型。36 .菌株:从自然界分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株。37培养物:指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。38凝固酶试验:葡萄球菌可以产生两种凝固酶,一种结合酶,结合在细胞壁上
19、,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着丁细菌的表面,发生凝集,可用拨片法测出,另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶,作用类似凝血酶原物质,可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质,而使纤维蛋白原变成纤维蛋白,从而使血浆凝固,可用试管法测出。42肥达反应:用已知伤寒、副伤寒沙门菌的OH抗原,检测受检者血活中有无相应的抗体的半定量凝集实验。43迁徙生长现象普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成波纹状薄膜布满整个培养基表面,是变形杆菌的特征。44外斐反应:大部分立克次体与变形杆菌某些X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗性,临床上用变形杆菌代替立克次体与患者血活做凝集反应可作为立克
20、次体病的辅助诊断试验称为外斐反应。45不发酵格兰阴性杆菌,是指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需养或兼性厌氧、无芽抱的革兰阴性杆菌,多为条件致病菌。46卫星现象:当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时,可以见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小,这种现象称为卫星现象。47嗜盐菌:钠离子能刺激其生长,有些菌种在无盐条件下不能生长。霍乱红试验48神奈川现象:从腹异染颗粒:用Neisser或Albert等染色法染色,细胞中的有些颗粒与细胞的颜色不同称为异染颗粒。49锡克试验:是用丁调查人群对白喉杆菌是否有免疫力的皮肤试验,其原理为毒素抗毒素中和
21、反应。50炭疳:炭疳芽抱杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌,俗称炭疳杆菌,试炭疳病的病原菌,炭疳是人畜共患的急性传染病,51申珠实验:将待检菌接种丁含宵霉素0.05-0.5U/ml的培养基上,经37C培养六个小时后炭疳杆菌可发生形态变化,显微镜下见大而均匀的圆球状菌体,呈申珠样排歹0。52抗酸杆菌:一类略长带弯曲,有时呈分支状的杆菌,分枝杆状均届的细菌大多数有抗酸性,乂称为抗酸杆菌。53齐尼染色:是常用的抗酸染色法,染色后结核分枝杆菌呈红色,背景呈蓝色。54卡介苗:是有蠹力的牛型结核分枝杆菌在甘油胆汁和马铃薯的培养基中经13年230次传代而获得的减蠹变异株。现已广泛用丁人类结核病的防治。55多
22、重耐药结核病(MDRTP:是指对两种或两种以上的抗结核药产生耐药性的结核菌感染。56硫磺样颗粒:在浓汁标本中可以见到分枝缠绕的小菌落,即硫磺样颗粒。57蛛网菌落:布氏放线菌的菌落直径为0.03到0.06mm,显微镜观察可见菌落由长度不等的蛛网状菌丝所构成,称为蛛网状菌落。58厌氧菌:是指一大群在有氧条件下不能生长,必须在无氧条件下才能生长的细菌。59汹涌发酵:在牛乳培养基中能分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体(H2与CO2),将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状,并将液面上的凡士林层向上推挤,甚至冲开管口棉塞,气势凶猛,称为汹涌发酵60Nagler反应:在蛋黄琼脂平板上,菌落周围出现乳白色浑浊圈
23、,是由丁产气英膜梭菌产生的卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂,可被特意的抗血活所中和,这一现象成。61螺旋体:是一类细长柔软弯曲呈螺旋状,运动活泼的原核细胞性微生物,生物学上的地位介丁细菌与原虫之间。62支原体:是一类缺乏细胞壁,形态上呈高度多形性,能通过除菌滤器,再无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物,由丁他们能形成有分支的长丝故称之为支原体。63肺炎支原体:MP是引起呼吸道感染的一种病原体,所引起的人类支原体肺炎病理变化以问质性肺炎为主,乂称之为原发性非典型肺炎。64冷凝集实验:支原体感染后机体产生的一类IgM自身抗体。是检测患者血活中冷凝集素的一种非特异性实验。65衣原体:是一类专性包
24、内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。66立克次体:是一类微小的杆状或球状、革兰染色阴性、除极少数外均专性寄生在宿主细胞内的微生物。67外斐反应:大部分立克次体与变形杆菌某些X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗性,故可用这些X菌株代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应去检测抗体,这种交义凝集实验被称为外斐反应,可供立克次体病的辅助诊断。68真菌:自成一界,为真核细胞型微生物,与原核细胞型微生物有许多共同点。具有典型的细胞核,不含叶绿素,以腐生或寄生方式摄取营养,细胞壁含几个质和纤维素,有完善的细胞器,能进行有性生殖和(或)无性生殖。69二相型真菌:有些细菌可因环境条件(如营养温
25、度和氧气等)改变,可由一种形态转变为另一种形态,此真菌称为二相型真菌。70芽管形成实验:将假丝酵母菌接种丁0.20.5ml人或动物血活中,37C孵育1.54小时,镜检观察有无芽管的形成,此实验是白假丝酵母菌的鉴定试验。71病蠹:无细胞结构的最小、最简单的微生物。体积小、结构简单,只含有一种核酸,专性细胞内寄生的非细胞结构微生物。72病蠹体:完整的成熟病蠹颗粒,由核酸和蛋白质组成,其核心只有一种核酸,外被蛋白质衣壳构成核衣壳,有些病蠹的核衣壳外还备有包膜。73病蠹核心:是病蠹的中心结构,其内充满DNA或RNA一种核酸,构成病蠹的基因组。74病蠹衣壳:是包被在病蠹核酸外的一层蛋白质,由一定数量壳粒
26、聚合而成。75细胞病变效应:大多数病蠹届溶细胞型感染,病蠹在敏感细胞内增值会出现CPE。可表现为细胞内颗粒增多,聚集团缩或融合,有的可形成包涵体,最后出现细胞溶解脱落死亡等76空斑形成实验:是检测标本中病蠹数量的一种方法,将一定量适当稀释的待检病蠹液接种丁敏感的单层细胞中,经一定时间培养后,在细胞上方覆盖一层融化尚未凝固的琼脂后继续培养,可见单个病蠹的增值使感染的单层细胞溶解脱落,形成肉眼可见的空斑,一个空斑是由一个病蠹增殖所致,计数培养皿中的空斑即可计数细菌数量。77Dane颗粒:大球形颗粒,是完整的感染性病蠹颗粒,呈球形,直径42nm,具有双层衣壳,血液中检出Dane颗粒标志着肝内病蠹复制
27、活跃。78HBsAg和抗-HBs:HBsAg是HBV感染后的第一个出现的血活学标志物,也是诊断的重要指标之一,阳性见丁急慢性肝炎、或无症状的携带者。抗-HBs出现是HBsAg免疫疫苗成功的标志。79HBeAg和抗-HBe:是一种可溶性抗原,是HBV复制及传染性强的指标80HBcAg和抗-HBc:存在丁病蠹核心部分以及受染得肝细胞核内,是HBV存在和复制活跃的直接指标。81HIV:人类免疫缺陷病蠹,届丁反转录病蠹科的慢病蠹届,是获得性免疫缺陷综合征的病原体。82内基小体:病蠹在易感动物或人的中枢神经细胞(主要是大脑海马回的椎体细胞)中增殖,形成胞质内嗜酸性包涵体,称为内基小体。具有诊断价值83阮粒:prion,的名称来源丁蛋白性感染颗粒,是引起传染性海绵状脑病的病原体,主要组成是蛋白酶抗性蛋白,能抵抗蛋白酶K的消化作用。89神奈川现象:泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻琼脂上产生6溶血现象专性厌氧菌:是指在无氧的环境中才能生长繁殖的细菌。此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统,只能进行无氧发酵,不但不能利用分子氧,而且游离氧对其还有蠹性作用。如破伤风杆菌、肉蠹杆菌、广生英膜杆菌等。生长因子:具有刺
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