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文档简介
1、别是提取某种特定的蛋白质比提取DNA 难度大的原因之一;蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,DNA 和蛋白质技术(A 卷)(满分 100 分,60 分钟完成)一、单选题(60 分,每题 3 分)1 下列实验材料、试剂等,不必放入冰箱的是()A.层析光合色素后的滤纸 B.长期保存得到的菌种C.用于粗提取 DNA 的酒精 D. 保存 PCF 所需的 Taq 酶【答案】A【解析】A.层析光合色素后的滤纸不必放入冰箱, A 符合题意;B.长期保存得到的菌种需要放在低温条件下保持,B 不符合题意;C.用于粗提取 DNA 的酒精是冷却的,C 不符合题意;D保存 PCR 所需的 Taq 酶,酶的保存需要
2、低温条件,D 不符合题意。故选 Ao2 下图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质,在凝胶中的行进过程的是()* ABCI)【答案】B【解析】相对分子质量大的蛋白质不容易进入擬胶内部的通道,路程短,移动的速度快,A 错误;相对 分子质量小的蛋白质容易进入礙胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量犬的蛋白质不容易 进入礙胶内 SB的通道路程矩,移动的速度快,B 正確相对分子质量犬的蛋曰贡不容易进入凄胶内部的通 道,C 错误孑相对分子质量大的蛋白质不容易进入凜胶內部的通道且其路程短,移动的速度乩 D 错误。3 .从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA 难度大,其原因不是()A.蛋白质对温度、
3、盐浓度、pH 等条件更敏感,更易失活B. 蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法C. 提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D. 提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步【答案】D2【解析】蛋白质对温度、盐浓度、pH 等条件更敏感,更易失活,而 DNA 分子相对来讲比较稳定,这些区使得蛋白质的提取没有统一的方法,而且还需要依据蛋白质的特性摸索提取的程序,这些也是提取蛋白质的难度较大的原因;提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步,这是提取蛋白质的步骤,不是提取蛋白质难度大的原因,D 项符合题意。4.在 PCRT增
4、 DNA 勺实验中,预计一分子 DNA 经过 30次循环后,应该得到 230个 DNA 分子,但是结果只 有约 210个 DNA 分子,那么不是出现该现象的原因是( )A. Taq 酶的活力不够,或活性受到抑制B. 系统设计欠妥C. 循环次数不够D. 引物不能与亲链结合【答案】D【解析】PCR扩增没有得到应有的DNA分子数, 有可能是T如酶活性不够或活性受抑制, 可能形成的DNA少故A正确。系统设计欠妥会导致达不到预期的结果,故B正确。循环次数不够会出现子代D血分子数 少故C正确。弓I物与亲链不能结合的情况下不会甑子代,而不杲少,故D错误5.将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为 0.
5、14mol/LNaCI 溶液、物质的量浓度为 2mol/LNaCI 溶液、体积分数为 95%勺酒精溶液中,然后用放有纱布的漏斗过滤,分别得到滤液P、Q R 以及存留在纱布上的黏稠物 p、q、r,其中由于含 DNA 少可以丢弃的是()A. P、Q RB. p、q、rC. P、q、RD. p、Q r【答案】C【解析】将粗提取的 DNA 丝状物加入物质的量浓度为0. 14mol/LNaCl 溶液中,DNA 析出,过滤后存在于纱布上(p),杂质存在于滤液中(P);加入物质的量浓度为 2mol/LNaCl 溶液中,DNA 溶解,过滤后存在于滤液 中(Q,杂质存在于纱布上(q);加入体积分数为 95%勺酒
6、精溶液中,DNA 析出,过滤后存在于纱布上(r), 杂质存在于滤液中(R),C 正确。6 下表是关于 DNA 粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述,不正确的是()试剂操作作用3A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合使细胞吸水胀破C蒸馏水加入到溶解有 DNA 的高浓度 NaCI析出 DNA 丝状物中D冷却的酒精加入到过滤后 DNA 的 NaCI 中产生特定的颜色反应【答案】D【解析】柠檬酸钠溶液是血液抗凝剂,可防止血液凝固,A 正确;将蒸馏水与鸡血细胞混合,可使细胞吸水膨胀而破裂,B 正确;将蒸馏水加入到溶解有DNA 的高浓度 NaCI 中,可降低 NaCI 浓
7、度,有利于析出DNA 丝状物,C 正确;冷却的酒精加入到过滤后DNA 的 NaCI 中,有利于 DNA 与蛋白质近一步分离, DNA 遇二苯胺会被染成蓝色,D 错误。7 .下列对“ DNA 的粗提取与鉴定”实验原理的叙述,正确的是()A.利用 DNA 能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将DNA 与蛋白质分离B.利用 85C的高温能使蛋白质变性,却对DNA 没有影响的特性,将 DNA 与蛋白质分离C.利用 DNA 在 0. 14molL1NaCI 溶液中溶解度最大的特点,可将DNA 与杂质分离D.在 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA 与蛋白质分离【答案】D【解析
8、】刹闻 D 脳不能濬于酒精濬液而某些蛋白质能濬于滔精林利用体积分数为 95%的酒精可将 DMA 与蛋白质分銘 A 错误孑高温对蛋日彌 D 曲都有影响,只是 DMA 对高温的耐受性强于蛋白质行错误 利用 D 皿在 0.中溶解度最小的特点可将 DNA 与杂履分副 C 错误$利用酶的专一性蛋白酶只能将蛋白质分解而不能分解 DNL 在 D 血滤浹中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将 与蛋白质分离D 正确。8. PCR 是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术,下列有关 PCR 过程的叙述,不正确的是()A.变性过程中破坏的是 DNA 分子内碱基对之间的氢键4B 复性过程中引物与 DNA 莫板链的结合
9、依靠碱基互补配对原则完成C. 延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP 四种核糖核苷酸D. PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高【答案】C【解析】变性过程是打开 DNA 双链之间的氢键,A 正确。复性过程是引物与 DNA 模板根据碱基互补配对 而形成氢键,B 正确。延伸过程需要的是 Taq 酶,ATP 和四种脱氧核糖核苷酸,C 错误。PCR 与细胞内 DNA 复制相比需要的酶的温度高,D 正确。9 下列关于 PCR 反应体系中所加物质作用的描述,错误的是(A.热稳定的 DNA 聚合酶用于合成 DNA 子链B.引物使 Taq 酶能从引物的 5,端延伸 DNA 链C.四种游离脱氧
10、核苷酸用于合成子链的原料D.目标 DNA 母链用于合成 DNA 复制的模板【答案】B【解析】PCR 反应依系中,熱稳定的 D 砒聚合酶用于合成 D 血子链,引物是与 NA 模板链的特定 DNA 序列 配对结合 j 四种游离脱氧核昔釀用于合成子链的原料,目标 D 虺母旌用于合成 D 虺复制的模板,所叹错误 的选项是肌10. 有资料显示,在非洲,镰刀型细胞贫血症基因的携带者更能适应当地的环境。有人认为这种人的血 红蛋白可能与正常人或镰刀型细胞贫血症病人的有一定差异。为证实这种猜想,需对携带者的血红蛋白进行检测,而检测前需要分离得到这种血红蛋白。试想分离提纯镰刀型细胞贫血症携带者(Aa)的血红蛋白时
11、,用不到的药品或仪器是()A.琼脂糖B磷酸缓冲液 C离心机 D二苯胺【答案】D【解析】二苯胺是鉴定、检测DNA 的化学试剂,与分离提纯血红蛋白无关,所以不需要该药品,选Do11. 对“ DNA 的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是()A.利用 DNA 能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液,可将DNA与蛋白质分离B.在用花菜作实验材料时,研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜C.在 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可提高DNA 屯度5D.利用 DNA 在 0. 14mol/LNaCI 溶液中溶解度最大的特点,可将DNA 与杂质分离【答案】C【解析】由于 DNA 不溶于酒精,而其它杂质如蛋白
12、质可以溶于酒精,因此利用体积分数为95%勺冷酒精溶液将 DNA 和蛋白质分离,A 错误;提取分离 DNA 寸,加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜,B 错误;利用酶的专一性,蛋白酶只能将蛋白质分解,而不能分解DNA 因此在 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将 DNA 与蛋白质分离,从而提高DNA 屯度,C 正确;DNA 在在不同浓度 NaCI 溶液中溶解度不同,在0. 14moI/LNaCI 溶液中溶解度最小, D 错误。12. 用凝胶色谱法分离蛋白质时,分子量大的蛋白质()A 路程较长,移动速度较慢B 路程较长,移动速度较快C 路程较短,移动速度较慢D 路程较短,移动速度较快【答案
13、】D【解析】当不同相对分子质量的蛋白质通过凝胶柱时,分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道, 路程长移动的速度慢,而分子量大的蛋白质分子不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,最 先洗脱出来,故选 Do13.下列说法错误的是()A. 无双缩脲试剂,用配制斐林试剂的材料等也能检测蛋白质B. 无鸡血细胞,用香蕉、洗涤剂、食盐等也能提取DNAC. 无过氧化氢酶,用淀粉酶等也能做pH 影响酶活性的实验D. 无紫色洋葱表皮细胞,用根毛细胞等也能做质壁分离实验【答案】C【解析】无欢缩眠试剂,用配制斐林试剂的材料经稀释可得到双缩腮试剂能检测蛋白质4 正确;无 霜血细胞,用香隹、洗涤剂、倉盐等也能提
14、取 DNA, B 正确$由于酶具有专一性,无过氧化氮酶”则不能 用淀粉酶代替过氧化氢酶俶 pH 影响酶活性的实验,C 错误,无紫色洋葱表皮细胞,用根毛细胞等也能做质 壁分离实验D 正确。14.在 DNA 的粗提取和鉴定实验中,有两次DNA 的沉淀析出,其依据的原理是()1DNA 在 NaCI 溶液质量浓度为 0. 14 mol/L 时溶解度最低2DNA 在冷却的体积分数为 95%勺酒精溶液中能沉淀析出6A.两次都是B .两次都是C.第一次是,第二次是D .第一次是,第二次是【答案】C【解析】在实验步骤 3 中,利用的是原理,因为在这种浓度的NaCI 溶液中,DNA 的溶解度最低,而蛋白质的溶解
15、度增加,所以通过过滤能将DNA 分离开,以除去蛋白质。在步骤 7 中,利用的是原理,即冷酒精能使 DNA 和蛋白质沉淀。因为这时已基本上无蛋白质。如果在步骤3 中就使用冷酒精,DNA 和蛋白质都能被酒精所沉淀,就无法将DNA 和蛋白质分离开。所以 DNA 的两次析出所依据的原理不同,且不能前后颠倒。C 正确。15. 在利用鸡血进行“ DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是()A.用蒸馏水将 NaCI 溶液浓度调至 0. 14 mol/L,滤去析出物B. 调节 NaCI 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在 2 mol/L NaCI 溶液中,加入二苯胺试剂即
16、呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同【答案】B【解析 1DIM 的粗提取实脸原理是 0.14 間 1/L中 DMA 濬解度最低,DNA 不溶于 95%的冷酒精等.用蒸馆水将伽 d/LHl 溶液浓度调制 S 伽门仏析出的是 D 叽丢弃的是滤港小错误;DHA 在不同浓度 的 UaCl 濬液中DNA?解度不同DIM 在 2rol/LNaCl 中濬解度最大,在 0. 14mal/LNaCl 濬滋中濬解度 最小酶具有专一性,木瓜蛋白酶可臥水解 DM 中的蛋日质类杂质,B 正确:DNA 丝状物溶解在 2mol/LNaCl 濬液中:抑入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色,C 错误;植物细
17、胞有细胞壁保护着,所以_用菜花做实 验材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂D 错误*16.在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是( )A. 根据各种大分子的理化性质的差异B. 根据各种大分子的理化性质的共性C. 根据各种大分子在细胞内的功能D. 根据各种大分子的结构和在细胞内的位置【答案】A【解析】在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是根据各种大分子的理化性质的差异,A 正确。17. 下列说法正确的是()32A. 用 P 标记 T2噬菌体侵染未标记的大肠杆菌,离心后上清液放射性很高7B. 利用 DNA 与其他有机物等在物理和化学性质方面的差异可提取DNAC. 若光学显微镜下观察到的视野过于明
18、亮,可使用凹面镜改善观察效果D. 甘蔗茎含有较多的蔗糖且近于白色,因此可以用于进行还原糖的鉴定【答案】B【解析】试题分析:用 P 标记的是噬菌体的 DNA 噬菌体侵入到大肠杆菌中离心后会在沉淀物种放射性 高,故 A 错误。利用 DNA 与其它有机物在理化性质方面的不同可以提取较为纯净的DNA 故 B 正确。如果光线显微镜视野过亮应用平面镜将光线调暗,故C 错误。甘蔗主要含蔗糖,蔗糖属于非还原糖,故D 错误。18. 下列关于“ DNA 的粗提取与鉴定实验叙述,错误的是( )A.酵母菌和菜花均可作为提取DNA 的材料B.DNA 既溶于 2 mol / L NaCI溶液也溶于蒸馏水C. 向鸡血细胞液
19、中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物D. DNA 溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝8【答案】C【解析】理论上只要含有 DNA 勺生物组织均可作为该实验的材料,因此酵母和菜花均可作为提取DNA 勺材料,A 正确;DNA 既可溶于 2 mol/L NaCI 溶液也溶于蒸馏水,B 正确;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可 使破裂细胞,释放 DNA 但不会观察到玻棒上有白色絮状物,C 错误;DNA 溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,D 正确。19 以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是()A. 红细胞洗涤过程中要加人 5 倍体积的蒸馏水,重复洗涤 3 次B. 将血红蛋白溶液放
20、在质量分数为0.9%的 NaC1 溶液中透析 12 小时C. 凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在D. 蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢【答案】C【解析】低渗谱港中细胞会吸水涨破,所臥红细胞的洗涤过程应该用生理盐水洗涤,不能用超留水洗 A 错误孑将血红蛋白濬浹通过透析进行粗分离时应该选用磷酸缓冲液,B 错误 j 装填色谱柱时,邂胶填在色 谱柱内要均匀,不能有气泡存在,因为气泡会影响蛋白质洗脱的次怡 C 正确;蛋白质通过凝胶时,相对分 子质量较大的移动速度快,D 错误。20如图为“ DNA 粗提取和鉴定实验的相关操作,这些操作目的正确的是(A. 是洗涤红细胞,去除血细胞表面的杂
21、质B. 是溶解 DNA 去除不溶于酒精的杂质C. 溶解 DNA 去除不溶于 2moI/LNaCI 溶液的杂质D. 稀释 NaCI 溶液,去除不溶于低浓度 NaCI 溶液的杂质【答案】C【解析】操作是向鸡血细胞液中力认蒸馆水,使血细胞吸水涨破,同时用玻璃棒按拌加速细胞的破裂, A 项错误*由于观不能溶于酒精,而蛋白质等其它杂质能谱于酒精,因此操作去除溶于酒精的杂质,提 纯 D 隔 B 项错误;由于 D 皿在 2IH01/L MaCl 溶液中濬解度最大,所以能除去在高浓度盐濬液中不能濬解的 杂质,C 项正确,稀释啦 1 濬海 由于在低浓度的盐溶液中 DNA 的溶解度较低,因此利用低浓度的盐濬 液使
22、DNA析出,去除溶于低浓度 NaCI 溶液的杂质,D 项错误。NJ.CI榕洼色DXA的9、非选择题(40 分,每格 2 分)21.( 12 分,每格 1 分)近十年来,PCR 技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用 DNA 半保留复制,在试管中进行DNA 的人工复制(如图),在很短的时间内,将 DNA 扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。DNA 品品 单链单链 DNA W 聚核昔酸引物游离核甘敲连接聚核昔酸引物游离核甘敲连接 两个完整的双两个完整的双 模板模板 与与 DNA 单链单链形形 到到 DNA 隼隼罹罹上上 链链 DM
23、A分分子子 成配对结构成配对结构(1) PCR 技术能把某一 DNA 片段进行扩增,依据的原理是: _。(2) 加热使 DNA 双链打开,这一步是打开 _ 键,称为_,在细胞中是在 _的作用下使此键断裂。(3) 当温度降低时,引物与模板 _端结合,在 DNA 聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成 2 个 DNA 分子,此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是_,遵循的原则(4)PCR 技术的必要条件,除了模板、原料、 ATP 酶以外,至少还需要三个条件即:液体环境、适宜的_ 和_。(5) PCF 一般要经历三十多次循环,每次循环可分为 _ 、_ 、_三个步骤。【答案】(1)DNA 分子具有双
24、螺旋结构和 DNA 分子中碱基的互补配对(2)氢 解旋 解旋酶(3)3既是原料,又能提供能量碱基互补配对原则(4)温度酸碱度(5)变性、复性和延伸【解析】(1) PCR 技术又称聚合酶链式反应, 是一项在生物体外复制特定 DNA 分子的核酸合成技术。PCR技术能把某一 DNA 片段进行扩增,依据的原理是:DNA 分子具有双螺旋结构和 DNA 分子中碱基的互补配对。2)抑热使 D 醮双链打幵,这一步是打幵氢键,称为解旋;在细胞中是在解施酶的作用下使此键断裂。(3)当温度降低时,引物与模板:T 端结合在聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成 2 个 血分子,此过程中加入的四种脱氧核苜三磷酸既是原
25、卸又能提供能竇遵循的原则是碱基互补配对原则。4)PCR 技术的必要条件,除了模板、原料、ATF.酶以外,至少还需要三个条件即;潘体环境、适宜 的温度和酸碱度 O(5) PCF 一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、复性和延伸三个步骤。1022.(12 分,每格 1 分)随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成,人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质进行研究时,首先要获得纯度较高的蛋白质。下图是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离流 程图”:请回答下列有关问题:(1 )样品处理中红细胞的洗涤要用 _ 反
26、复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH7. 0 的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是 _ 。(2) 血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是 _ ,若要尽快达到理想的透析效果,可以(写出一种方法)。(3) 血红蛋白的纯化是通过 _法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。(4 )电泳利用了待分离样品中各种分子的 _等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。誌患者(5) 一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如上图所示。由图可知携带者有_种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是【答案】(1 )生理盐水渗透(作用)原理(当外界
27、溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)(2 )除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)凝胶色谱(4)带电性质以及分子大小、形状(5) 2携带者具有一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质负极莎正常人负极负极莎卿者11【解析】 样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心。向红细胞悬港中力认一定量的低 浓度PH=7, 0 的缓冲液并充分損拌,可以破碎红细胞,破辞细胞的原理是渗逶原理(当外界濬液浓度低于 动物细胞內液浓度时,细胞吸水涨破儿(2)血红蛋日粗分离阶段,逶析的目的是除去小分子杂质。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、 形状等的差异, 而产生
28、不同的迁移 速度,实现各种分子的分离*(4)由如图 2 可知携带者有 2 种血红蛋白,因为携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以 控制合成两种不同的蛋白质。23.(16 分,每格 2 分)某生物兴趣小组在学习了DNA 的粗提取与鉴定实验后,尝试开展RNA 的粗提取与鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:【实验课题】酵母 RNA 的提取和鉴定【实验目的】1.从酵母中提取 RNA 2.鉴定 RNA【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA 的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNADNA 很少,菌体易收集,RNA 易分离。RNA 不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或 高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放 RNA RNA 水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCI3试剂加 热直到沸腾 1 分钟,会呈现墨绿色。【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0. 2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCI3试剂等。【实验步骤】1称 6 克干酵母2加 0.
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