不同金属离子对酶活性的影响_第1页
不同金属离子对酶活性的影响_第2页
不同金属离子对酶活性的影响_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、金属离子对酶活性的影响实验目的：1、了解金属离子对酶活性的影响；2、掌握不同金属离子对酶活性作用结果的测量方法实验原理：酸性磷酸酯酶广泛分布于动物和植物中，植物的种子、霉菌、肝脏和人体的前列腺中。它对生物体核苷酸、磷蛋白和磷脂的代谢，骨的生成和磷酸的利用，都起着重要作用。磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基。磷酸酶的作用与激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶，可以利用能量分子，如ATP,将磷酸基团加到对应底物分子上。本实验选用绿豆芽作材料，从中提取酸性磷酸酯酶。以人工合成的对硝基苯磷酸酯（NPP作底物，水解产生对硝基苯酚和

2、磷酸。在碱性溶液中，对硝基酚盐离子在405nm处光吸收强烈，而底物没有这种特性。凡是能提高酶活性的物质统称为酶的激活剂。无机离子和一些金属离子对酶有激活作用，可以作为酶的激活剂。其中钾离子是酸性磷酸酯酶的一种激活剂，它在酶与底物之间起了桥梁作用，形成了酶金属离子底物三元复合物，从而更有利于底物与酶的活性中心部位的结合。而氯离子和钠离子对酸性磷酸酯酶的活性没有什么影响.一些重金属离子如铜离子，对酶活性具有抑制作用。实验用品：1、仪器：恒温水浴箱、试管架、试管、分光光度计、比色皿、吸头、滴管、移液枪、移液管2、试剂：LNPP100ml、LNaOH250ml、酸性磷酸酯酶、的柠檬酸缓冲液1000ml

3、、2mmol/LFeSO4、2mmol/LCuSO4、MnCl22mmol/L、MgSO42mmol/L、KCl2mmol/LEDTA、实验步骤：FeSOCuSOMnClMgSO空白调零4424EDTAKCl对照01234567NPP(ml)11111111酶液(ml)11111111金属离子(ml)11111111NaOH（mI)33333333注：反应均在37度水浴箱中进行，0号管先加入后保温15分钟，然后加入NaOH3m，混匀后再加酶液1ml，在波长405nm处观察0D值，以0号管调零实验结果FeSOCuSOMnCIMgSO空白调零4424EDTAKCl对照试管号01234567OD（abs）0由实验数据得到的图标如下:实验作业：以各金属离子为横坐标，A405纵坐标，绘制不同金属离子与酶活力曲线，观察金属离子与酶活力的关系，分析哪些是酶活性激活剂，哪些是酶活性抑制剂。5CIO0系列1nosno5SH0医V03ZOUW不同的金属离子结果分析：通过实验组与对照组的0D值对比可知，保证在适宜的温度、pH等外界条件下，再加入1ml2mmol/L浓度的各种金属离子溶液，对酸性磷酸酯酶的活力均有激活作用。它们对酸性磷酸酯酶激活作用的

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论