教学辽宁省黑山县第一高级中学高二生物选修一土壤中分解尿素的细菌的分离与计数-ppt课件

1、专题专题2 2 微生物的培育与运用微生物的培育与运用 研讨培育基对微生物的选择作用，进展微研讨培育基对微生物的选择作用，进展微生物数量的测定。生物数量的测定。 土壤中能分解尿素的细菌土壤中能分解尿素的细菌1从土壤中分别出可以分解尿素的细菌从土壤中分别出可以分解尿素的细菌2统计每克土壤样品中终究含有多少这统计每克土壤样品中终究含有多少这 样的细菌样的细菌一挑选菌株一挑选菌株原理：原理：素，请分析该培育基能否对素，请分析该培育基能否对微生物有选择作用？假设有，微生物有选择作用？假设有，是如何进展选择的？是如何进展选择的？有选择作用，常用方法：稀释涂布平板法、显微镜直接计数法，常用方法：稀释涂布平板

2、法、显微镜直接计数法， 还可以用过滤膜法还可以用过滤膜法经过统计平板上的经过统计平板上的菌落数，就能推菌落数，就能推测出样品中大约含有测出样品中大约含有多少活菌。多少活菌。为了保证结果的准确，普通选择菌落数在为了保证结果的准确，普通选择菌落数在3030030300的平板进的平板进展计数，假设设置的反复组中结果相差太远，意味着操作有展计数，假设设置的反复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。误，需重新实验。 计算公式：每克样品中的菌落数=某一稀释度下平板上生长的平均菌落数涂布平板所用稀释液体积稀释倍数设置反复组，目的是加强实验的压服力与准确性。将待测样设置反复组，目的是加强实验的压服力与

3、准确性。将待测样品经一系列品经一系列1010倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1ml0.1ml接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布在整个平板外表，放在适宜的温度下培育计数菌落数。为是布在整个平板外表，放在适宜的温度下培育计数菌落数。为是结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加到三个或三个以上的结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加到三个或三个以上的平板上，经涂布培育，计算出菌落平均数平板上，经涂布培育，计算出菌落平均数2、显微镜直接计数法1原理：此法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微

4、镜下计算一定容积的样品中微生物数量。2方法：用计数板计数。计数板是特制的载玻片，其上有特定的面积为1mm2，高为0.1mm的计数室，一个计数室又被分成25个或16个中格，每个中格再被分成16个或25个小格，每个计数室都由400个小格组成。3操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计数45个中格中的细菌数，并求出每个小格所含的细菌数，再按计数公式求出每毫升样品中所含的细菌数。4计算公式每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数X400X10000X稀释倍数5缺陷：不能区分死菌与活菌。3过滤膜法以测定饮用水中大肠杆菌的数目为例。将知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培育液基上培育。在

5、该培育基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色。可以根据培育基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。 1. 1.想一想，如何从平板上的菌落数推测出想一想，如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？每克样品中的菌落数？答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计最好能统计3 3个平板，计算出平板菌落数的平个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进展计算。均值，然后按课本旁栏的公式进展计算。A A同窗的结果与其他同窗不同，能够同窗的结果与其他同窗不同，能够的解释有两种。的解释有两种。一是由于土样不同；一是由于土样不同；二是由于培育基污染或操作失误

6、。二是由于培育基污染或操作失误。 三设置对照三设置对照终究是哪个缘由，可以经过实验来证明。终究是哪个缘由，可以经过实验来证明。另一种方案：另一种方案：将将A A同窗配制的培育基在不加土样的情况同窗配制的培育基在不加土样的情况下进展培育，作为空白对照，以证明培育基能下进展培育，作为空白对照，以证明培育基能否遭到污染。经过这个事例可以看出，实验结否遭到污染。经过这个事例可以看出，实验结果要有压服力，对照的设置是必不可少的。果要有压服力，对照的设置是必不可少的。实验方案有两种实验方案有两种一种方案：一种方案：可以由其他同窗用与可以由其他同窗用与A A同窗一样的土样同窗一样的土样进展实验，假设结果与进展实验，假设结果与A A同窗一致，那么证同窗一致，那么证明明A A无误；假设结果不同，那么证明无误；假设结果不同，那么证明A A同窗存同窗存在操作失误或培育基的配制有问题。在操作失误或培育基的配制有问题。四、实验案例四、实验案例 实验的详细操作步骤如下实验的详细操作步骤如下: : 1. 1.土壤取样土壤取样 从肥沃、潮湿的土壤中取样。先铲