2019-2020学年人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数作业

1、课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课堂对点训练-1KETANGDUIDUANXUNLUAN题型一选择培养基的作用及配制方法1 .从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括（）A,根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基B,根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增减不同的特殊营养物质C,根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素D,根据微生物耐热性的不同，利用高温、高压消灭不需要的杂菌答案D解析利用高温、高压消灭不需要的杂菌的同时也会将需要筛选的微生物杀死，因此不能通过该方法得到目的微生物，D错误。2 .某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R,

2、比较理想的方法是采用（）A.天然培养基8 .稀释涂布平板法C.利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D.用显微镜直接观察、寻找，再培养答案C解析在培养过程中可以通过选择该微生物能生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖，C正确。9 .可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）A.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂10在以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹田试剂D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩月尿试剂答案A解析分解尿素的细菌与其他细菌的重要区别是分解尿素的细菌能以尿素为氮源

3、， 该细菌合成的月尿酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，我们可以准确地鉴定出该种细菌能够分解尿素。题型二菌落数目的统计方法4 .下列不属于菌种计数方法的是（）A.平板划线法B.稀释涂布平板法C.镜检法D.滤膜法答案A解析平板划线法可用于菌种的纯化和分离，不能用于计数，A错误；稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌数目，镜检法也是测定微生物数量的常用方法，B、C正确；滤膜法常用于检测水样中大肠杆菌数目，通常是将已知体积的水样过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目，计算

4、出水样中大肠杆菌数量，D正确。5 .下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是（）A.采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数在30300间且差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果答案C解析当两个或多个细胞连在一起时， 平板上观察到的只是一个菌落， 因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；一般选择菌落数在30300的平板进行计数，密度过大会不好计数，影响结果的准确性，C

5、错误；涂布三个平板，作为重复组，若三个平板统计的菌落数在30300间且相差不大，取其平均值作为统计结果能增强实验的说服力与准确性，D正确。题型三细菌分离与计数的实验设计6.下列关于测定土壤中微生物的数量，正确的叙述是（）A,一般选用103107倍的稀释液分别涂布B.测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释C.测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释D.当第一次测量某种细菌的数量， 可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养答案B解析由于土壤中各类微生物的数量不同， 在进行分离与计数时， 就需要按照不同的稀释度分别进行涂布，A错误；测定放线菌的数量，一般选用103

6、、104、105倍的稀释液进行平板培养，B正确；测定真菌的数量，一般选用102、103、104倍稀释，C错误；当第一次测量某种细菌的数量，可将稀释的范围放宽点，将103107倍的稀释液分别涂布到平板上培养，D错误。7 .在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基， 乙组实验用氮源除含尿素外还含硝酸盐的培养基， 其他成分都相同， 在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于（）A.空白对照B.自身对照C.相互对照D.条件对照答案D解析本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。8 .关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实

7、验中，下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的一组是（）土壤取样称取土壤稀释土壤溶液涂布平板微生物的培养A.B.C.D.答案D解析土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验需进行无菌操作， 其中土壤取样是在室外进行， 微生物的培养是在恒温箱中进行， 其余过程都需要在酒精灯火焰旁进行，D正确。9.在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是（）从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解氨的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌A.B.C.D.答案A解析从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数， 统计的是每克

8、土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌株数=（C/V）XM”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL） ,M代表稀释倍数，正确。10.下列属于菌落特征的是（）菌落的形状菌落的大小菌落的多少隆起程度颜色有无荚膜A.B.C.D.答案B解析菌落特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等，有无荚膜是单个细菌细胞的特征，不是菌落的特征。11 .在做“分离能分解尿素的细菌”的实验时，A同学从对应稀释倍数为106倍的培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学在同样的稀释倍数下的培养基中只筛选出大约50个菌落。A同学的结果产生的原因可能有

9、（）土样不同培养基被污染操作失误没有设置对照A.B.C.D.答案A解析A同学比其他同学所得的实验结果的数据大许多，可能是由于选取的土样不同、培养基灭菌不彻底或操作过程中培养基被污染，也可能是操作失误造成的，如所配制的培养基中混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。12.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（）A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C.可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D.用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌答案D解析将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，以便于统计样品中活菌的数目，A正确；为避免偶然误

10、差对实验结果的影响，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，B正确；生物实验要遵循对照原则，故要将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，排除非测试因素对实验结果的影响，可使结论更有说服力，C正确；在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂可筛选出分解尿素的细菌，D错误。13 .图表所示配方的培养基可筛选某种细菌， 该细菌可以在该培养基上生长、 形成菌落。请回答下列问题：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO47H2O0.2g葡锢糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸储水定谷至1000mL(1)该培养基可筛选的细菌是,理由是(2)如果从土壤中获取的样本含该

11、细菌的数量较少，则需要对样本中的细菌进行扩大培养，(M能”或“不能”)用表格中的培养基，因为(3)如果对该细菌进行计数，则将得到的细菌用法接种，为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入帆齐1J)。(4)另一种接种细菌的方法是,该方法操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是答案(1)尿素分解菌培养基中尿素是唯一的氮源(2)不能扩大培养应该用液体培养基，表格配方中含琼脂，是固体培养基(3)稀释涂布平板酚红指示剂(4)平板划线法杀死残留在接种环上的细菌解析(1)根据表格分析，培养基中尿素是唯一的氮源，说明该培养基筛选的细菌是尿素分解菌。(2)图表所示培养基中含有琼脂，说明是固体培养基

12、，不能用于菌种的扩大培养，扩大培养应该用液体培养基。(3)微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中后者可以用于菌种的计数；以尿素为唯一氮源且含酚红指示剂的培养基可以选择和鉴别尿素分解菌。(4)利用平板划线法接种时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是杀死残留在接种环上的细菌。14.下图是从土壤中筛选产月尿酶细菌的过程。(1)图中选择培养基应以为唯一氮源；鉴别培养基还需添加作指示剂,产月尿酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成色。(2)在5个细菌培养基平板上， 均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、

13、462、178和191。该过程采取的接种方法是.每克土壤样品中的细菌数量为乂108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较0(3)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是,需要消毒的是。(填序号)培养细菌用的培养基与培养皿玻棒、试管、锥形瓶和吸管实验操作者的双手实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉。答案(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75少(3)(4)灭菌解析（1）月尿酶能够催化尿素分解为氨，故图中选择培养基应以尿素为唯氮源，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂。由于尿素被月尿酶分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，从而使酚红指示剂变红。（2）用于统计细菌菌落数的常

14、用方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30J300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每克该土壤样品中的菌落数为（156+178+191）-3R.1X105=1.75X108（个）。由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，止匕外，稀释涂布平板法统计的是活菌数，而血细胞计数板统计的是细菌总数，所以用此计数方法测得的细菌数较少。（3）在实验中，培养细菌用的培养基与培养皿和玻棒、试管、锥形瓶、吸管需要灭菌，实验操作者的双手需要消毒。（4）为了防止污染环境， 实验结束后， 使用过的培养基应该进行灭菌

15、处理后才能倒掉。课后提能训练-KEH5JTlNENGXUNLIA 忖|15对表层土壤中自生固氮菌的分离采取的原理（方法）是（）A.依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源B.依据不同微生物生长繁殖所需pH不同C.依据不同微生物生长繁殖所需温度条件不同D.依据不同微生物代谢类型不同答案A解析在无氮培养基上只有固氮菌能正常生长繁殖，可根据此特点来分离自生固氮菌，A正确。16在光亮处用同一种培养液分别培养单细胞绿藻和单细胞酵母菌， 其结果如图所示 （甲为绿藻，乙为酵母菌）。造成这种现象的原因是（）寸 RA.培养液中缺少无机盐B.培养液中氧气含量太高C.培养液中有机成分少D.培养液中不含二氧化碳答案C解析酵

16、母菌为异养型生物，需直接摄取有机物，而绿藻是植物，可以进行光合作用合成有机物，所以在培养液中酵母菌最终被淘汰说明培养液中有机成分少，C正确。17如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（）D制瞽红疑*和选择培养/选、纯化外和幽价解第点豌屋甜液基中好星分解尿案如酉”的鉴定刖第A.在配制步骤、所用的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌B.步骤纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落C.步骤采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白陈培养基中加入尿素D.步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力答案C解析在配制步骤、的培养基时，应先调pH

17、值后再高压蒸汽灭菌，A正确；步骤纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落，B正确；要筛选出能高效分解尿素细菌，所用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白陈中都含有含氮有机物，因此步骤所用的培养基中不能含有牛肉膏和蛋白陈，C错误；步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。18用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（）A,涂布了1个平板，统计的菌落数是230B,涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260,取平均值238C.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256,取平

18、均值163D,涂布了3个平板，统计的菌落数分别是212、240和250,取平均值234答案D解析在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，A、B错误；C项虽然涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与其他的相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地用3个平板的计数值来求平均值，C错误。19为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（）A.未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白陈培养基B.未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白陈培养基C.接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白陈培养基D.接种了的培

19、养基，未接种的牛肉膏蛋白陈培养基答案B解析若要判断培养基是否被杂菌污染， 可将未接种的培养基放在恒温箱中培养， 一段时间后若有菌落产生，说明培养基被污染，若无菌落产生，说明培养基没有被污染。要判断选择培养基是否起到了选择作用，接种了的选择培养基是实验组，将等量的稀释相同倍数的菌液接种到牛肉膏蛋白陈培养基上，作为对照组，在相同的条件下进行培养，观察比较对照组和实验组中的菌落数，在牛肉膏蛋白陈培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，综上所述，B正确，A、C、D错误。6,下列有关微生物分离、培养和计数的叙述，正确的是（）A.分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养B.测定土壤

20、中细菌数量时，一般选用103107倍的稀释液C.测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数D.统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落答案D解析分离土壤中微生物时，需要对培养基灭菌，但不能对土壤样品进行灭菌，A错误；由于土壤中各类微生物的数量不同，在进行分离和计数时，就需要按照不同的稀释度分别进行涂布，测定土壤中细菌的数量一般选择104、105、106倍的稀释液，B错误；测定土壤样品中的细菌数目常用稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，C错误；统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，D正确。7.下图为“土壤中分解尿素的细菌的

21、分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）A.3号试管的稀释倍数为103倍B.4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7X109个D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高答案C解析3号试管中的菌落稀释倍数为104倍，A错误；4号试管中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号试管的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号试管的10倍，B错误；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）-34.1X106=1.7X109个，C正确；稀释涂布平板得到的菌落可

22、能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。8.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A.用蒸储水配制牛肉膏蛋白陈培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B,取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置，37。叵温培养2448小时D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数答案D解析用蒸储水配制牛肉膏蛋白陈培养基时，需要先灭菌再倒平板，A正确;测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，体积为0.1mL,为了

23、保证实验的准确性，需进行对照，同时保证无关变量相同且适宜，因此需乔匕QdErb曲善01rnL儿旧卬1一乃卞的一*J3I。3十样匐mlI3尤戈卡取等体积的无菌水，分别涂布于各组平板上，B正确；实验组和对照组需要在37C恒温箱培养一段时间，再观察计数，C正确；对照组无菌说明培养基灭菌成功且操作过程中没有杂菌污染，那么在菌落计数时应选择菌落数在30300间的实验组平板进行计数，D错误。9 .人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有月尿酶，可降解尿素。下图是某同学从土壤中筛选出降解尿素菌株的实验流程。请回答有关问题：配制土壤溶液|系列稀释|涂布平板与培工I菌落计

24、数（1）用以为唯一氮源的培养基筛选能分泌月尿酶的细菌。从功能上讲，该培养基属于培养基。分离培养细菌时必须进行操作。（2）采用法时需要将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养、菌落计数。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在旁进行操作。稀释处理的目的是接种后的培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，平板倒置培养的目的主要是（3）在培养基中加入酚红指示剂，右培养基中存在分泌月尿酶的细菌，其菌落周围会出现，这是由于尿素被分解产生，遇培养基中所加酚红指示剂产生的颜色变化所致。变色区域越大，表明该菌株降解尿素的能力（4）分离细菌时使用固体平面培养基的原因是答案（1）尿素选择无菌（2）稀释涂布平板酒精灯火焰得到单

25、菌落，避免土壤溶液中菌体浓度过高防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染（3）红色环带氨（或NH3）越强（4）固体培养基上细菌分裂产生的子代个体不易分散，从而形成菌落解析（1）欲筛选出能降解尿素的菌株，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能降解尿素的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基。分离培养细菌时必须进行无菌操作。（2）常用稀释涂布平板法接种培养、菌落计数，稀释菌液的过程中每一步都要在酒精灯火焰旁进行，以避免周围微生物的污染。为了得到单菌落，需将土壤溶液进行一系列的梯度稀释，从而使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，进而能在培养基表面形成单个菌落，便于纯化分离菌种。平板倒置培养的目的主

26、要是防止培养过程中皿盖上的冷凝水滴落在培养基表面，造成杂菌污染。(3)细菌合成的月尿酶将尿素分解成氨，遇酚红指示剂变红。降解尿素能力越强的菌株，菌落周围形成的红色环带越大。(4)液体培养基中难以得到成形的菌落，而固体培养基上可以形成肉眼可见的菌落。10 .在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)0为透明K 带菌落飞有透明5#带由落询除侬剂的士用.工制占上堆后用葬而匚箱2次故挂以后划线曲“培养基融出渔连练划税是反匕次则缎

27、末端肝蜡皓年(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是(3)在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在固体培养基上形成的菌落中， 无透明带菌落利用的氮源主要是,有透明带菌落利用的氮源主要是,据此可筛选出目的菌。(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：接种的一培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物质乙，能生长A+B能生长不添加营养物质甲、乙就能生长突变株A不能在一般培养基上生长的原因是突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是0答案(1)稀释(2)以该除草剂为唯一氮源的固体培养基(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源氮气该除草剂(5)突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶突