药物分析计算课件

1、（2 2）剩余滴定法）剩余滴定法 %mFVVTs ）（百分含量百分含量V V滴定时，供试品消耗滴定液的体积（滴定时，供试品消耗滴定液的体积（mlml） V V0 0滴定时，空白消耗滴定液的体积（滴定时，空白消耗滴定液的体积（mlml）F F浓度校正因子浓度校正因子 mms s供试品的质量供试品的质量 标准实测ccF 例例1 1、非那西丁含量测定：精密称取本品非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g0.3630g加稀盐酸回流加稀盐酸回流1 1小时后，放冷，用小时后，放冷，用亚硝酸钠液（亚硝酸钠液（0.1010mol/L0.1010mol/L）滴定，用去）滴定，用去20.00m120.00m1

2、。每。每1ml1ml亚硝酸钠液（亚硝酸钠液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于相当于17.92mg17.92mg的的C C1010H H1313OO2 2NN。计算非那。计算非那西丁的含量。西丁的含量。 %72.99%10010003630. 01 . 01010. 000.2092.17%非那西丁例例1 1计算如下：计算如下：%mTVFs 百分含量百分含量例例2 2、精密称取青霉素钾供试品精密称取青霉素钾供试品0.4021g0.4021g，按药典规定用剩余碱量法测定含量。先加按药典规定用剩余碱量法测定含量。先加入氢氧化钠液入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00ml(0.1mol/L

3、)25.00ml，回滴，回滴时消时消0.1015mol/l0.1015mol/l的盐酸液的盐酸液14.20ml14.20ml，空白，空白试验消耗试验消耗0.1015mol/l0.1015mol/l的盐酸液的盐酸液24.68ml24.68ml。求供试品的含量，每求供试品的含量，每1ml1ml盐酸液盐酸液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于相当于37.25mg37.25mg的青霉素钾。的青霉素钾。 %54.98%10010004021. 01 . 01015. 020.1468.2425.37%）（青霉素钾例例2 2计算如下：计算如下：%mFVVTs ）（百分含量百分含量2 2、紫外分光

4、光度法、紫外分光光度法（1 1）吸）吸收 系 数收 系 数法法 ：100)g/ml()g/100ml(1%1cm1%1cm%1cm1lEAclEAcclEACc 100= C%mDEAs%cm 百分含量百分含量D D 稀释倍数稀释倍数mms s供试品的质量供试品的质量 （2 2）对照法）对照法 %mDAAcs 对对供供对对百分含量百分含量对对供供对对供供对对供供对对供供对对供供对对供供AAccccAAlcElcEAA %1cm1%1cm1例例3 3、对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约本品约40mg40mg，精密称定，置，精密称定，置250ml250ml量瓶中

5、，量瓶中，加加0.4%0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液50ml50ml溶解后，加水溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取至刻度，摇匀，精密量取5ml5ml，置，置100ml100ml量量瓶中，加瓶中，加0.4%0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10m110m1，加水，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm257nm的波长处测定吸收度，按的波长处测定吸收度，按C C8 8H H9 9NONO2 2的吸收的吸收系数系数( )( )为为715715计算，即得。若样品称样计算，即得。若样品称样量为量为m (g)m (g)，测得的吸收度为，测得的吸收度为A A，则含量百，则

6、含量百分率的计算式为分率的计算式为1%1cmE A. B. C. D. E.%10015250715Am%10015250715mA%10012505100715mA%1001715mA%10012505100715Am2505C（g/ml）100假设样品中乙酰氨基酚的量为假设样品中乙酰氨基酚的量为（g g）C2501005D 2501005稀释倍数稀释倍数D定容体积的乘积定容体积的乘积取样体积的乘积取样体积的乘积例例4 4：利血平的含量测定：利血平的含量测定：对照品溶液的制备对照品溶液的制备 精密称取利血平对照品精密称取利血平对照品20mg20mg，置，置100ml100ml量瓶中，加氯仿量

7、瓶中，加氯仿4ml4ml使溶解，使溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5m15m1，置置50ml50ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。即得。供试品溶液的制备供试品溶液的制备 精密称取本品精密称取本品0.0205g0.0205g，照对照品溶液照对照品溶液同法制备同法制备。 测定法测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液精密量取对照品溶液与供试品溶液各各5ml5ml，分别置，分别置10ml10ml量瓶中，各加硫酸滴定液量瓶中，各加硫酸滴定液（0.25mol/L0.25mol/L）1.0ml1.0ml与新制的与新

8、制的0.3%0.3%亚硝酸钠溶亚硝酸钠溶液液1.0ml1.0ml，摇匀，置，摇匀，置5555水浴中加热水浴中加热3030分钟，冷分钟，冷却后，各加新制的却后，各加新制的5%5%氨基磺酸铵溶液氨基磺酸铵溶液0.5ml0.5ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；另取对照品溶用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；另取对照品溶液与供试品溶液各液与供试品溶液各5ml5ml，除不加，除不加0.3%0.3%亚硝酸钠亚硝酸钠溶液外，分别用同一方法处理后作为各自相应溶液外，分别用同一方法处理后作为各自相应的空白，照分光光度法，在的空白，照分光光度法，在3903902nm2nm的波长处的波长处分别测定吸收度，供试品溶液的吸收度

9、为分别测定吸收度，供试品溶液的吸收度为0.6040.604，对照品溶液的吸收度为对照品溶液的吸收度为0.5940.594，计算利血平的百，计算利血平的百分含量。分含量。%20.99%10010000205. 0594. 0604. 020%利血平例例4计算如下：计算如下：%mDAAcs 对对供供对对百分含量百分含量C供供= C对对A供供A对对当供试品和对照品是用相同的方法当供试品和对照品是用相同的方法制备时：制备时：m供供= m对对A供供A对对已知：已知：（稀释倍数相同稀释倍数相同）3 3、高效液相色谱法、高效液相色谱法 HPLCHPLC进行含量测定的方法有：外进行含量测定的方法有：外标法，内

10、标法，面积归一化法等，其标法，内标法，面积归一化法等，其中外标法最为常用。中外标法最为常用。 在此处先简单的介绍一下外标法在此处先简单的介绍一下外标法的计算方法，其他和外标法有关的内的计算方法，其他和外标法有关的内容放在第十四章学习。容放在第十四章学习。用用外标法外标法测定供试品中某个化学成测定供试品中某个化学成分的含量，其计算公式如下：分的含量，其计算公式如下：C供供：供试品浓度：供试品浓度 C对：对：对照品浓度对照品浓度A供供：供试品峰面积：供试品峰面积 A对：对：对照品峰面积对照品峰面积C供供= C对对A供供A对对百分百分含量含量C供供 Dms100%例例5 5、盐酸四环素（原料药）含量

11、测定盐酸四环素（原料药）含量测定色谱条件和系统适用性试验色谱条件和系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L0.1mol/L草酸铵溶液草酸铵溶液- -二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺- -0.2mol/L0.2mol/L磷酸氢二铵溶液（磷酸氢二铵溶液（6868：2727：5 5），），用氨试液调节用氨试液调节pHpH至至8.38.3为流动相；流速为每为流动相；流速为每分钟分钟1ml1ml；柱温；柱温3535；检查波长为；检查波长为280nm280nm。称取盐酸四环素、称取盐酸四环素、4-4-差向四环素、差向脱水差向四环素、差向脱水四环素、盐酸金

12、霉素及脱水四环素各四环素、盐酸金霉素及脱水四环素各适量适量（ 约（ 约 8 m g8 m g ） ， 置） ， 置 5 0 m l5 0 m l 量 瓶 中 ， 加量 瓶 中 ， 加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，取摇匀，取2020l l注入液相色谱仪，记录注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱图，4-4-差向四环素、差向脱水四环差向四环素、差向脱水四环素、盐酸四环素、盐酸金霉素及脱水四素、盐酸四环素、盐酸金霉素及脱水四环素的分离度均符合要求环素的分离度均符合要求( (组分流出顺序组分流出顺序依次为依次为4-4-差向四环素、差向脱水四

13、环素、差向四环素、差向脱水四环素、盐酸四环素、盐酸金霉素、脱水四环素盐酸四环素、盐酸金霉素、脱水四环素) )。测定法测定法 精密称定本品精密称定本品30.1mg30.1mg，置，置50ml50ml量瓶中，量瓶中，加加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取摇匀，精密量取2020l l注入液相色谱仪，记注入液相色谱仪，记录色谱图录色谱图, ,得到峰面积为得到峰面积为5320253202的盐酸四环的盐酸四环素吸收峰；另取盐酸四环素对照品素吸收峰；另取盐酸四环素对照品30.6mg30.6mg，同法测定同法测定，得到峰面积为，得到峰面积

14、为5465654656的盐酸四环的盐酸四环素吸收峰。按外标法以峰面积计算出供试品素吸收峰。按外标法以峰面积计算出供试品中盐酸四环素的含量。中盐酸四环素的含量。（按干燥品计算，含盐酸四环素不得少于（按干燥品计算，含盐酸四环素不得少于95.095.0）C对对A供供A对对 Dms百分百分含量含量 10030.6 532025465630.1百分百分含量含量 100 98.96C供供= C对对A供供A对对当供试品和对照品是用相同的方法当供试品和对照品是用相同的方法制备时：制备时：m供供= m对对A供供A对对已知：已知：（即稀释倍数相同）（即稀释倍数相同）四、片剂含量测定结果的计算四、片剂含量测定结果的

15、计算 %100/%100%片）标示量（）平均片重（）供试品重（）测得量（标示量每片含量标示量gggg1 1、 容量分析法容量分析法 （1 1）直接滴定法）直接滴定法 %100%标示量平均片重标示量smTVF（2 2）剩余滴定法）剩余滴定法 %100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT2 2、紫外分光光度法、紫外分光光度法（1 1）吸收系数法）吸收系数法 %100标示量标示量DA100100%11 标示量标示量平均片重平均片重scmmDEA（2 2）对照法）对照法 标示量标示量%100% 标示量标示量平均片重平均片重对对供供对对smAAcD例例6 6、取司可巴比妥钠胶囊（标示量为每颗取司可巴

16、比妥钠胶囊（标示量为每颗0.1g0.1g）2020粒，除去胶囊后测得内容物总重为粒，除去胶囊后测得内容物总重为3.0780g3.0780g，称取，称取0.1536g0.1536g，按药典规定用溴量，按药典规定用溴量法测定。加入溴液（法测定。加入溴液（0.1 mol/L0.1 mol/L） 25ml25ml，剩，剩余的溴液用硫代硫酸钠液（余的溴液用硫代硫酸钠液（0.1025mol/L0.1025mol/L）滴）滴定到终点时，用去定到终点时，用去17.94ml17.94ml。空白试验用去硫。空白试验用去硫代硫酸钠液代硫酸钠液25.00ml25.00ml。按每。按每1ml1ml硫代硫酸钠液硫代硫酸钠

17、液（0.1mol/L0.1mol/L）相当）相当13.01mg13.01mg的司可巴比妥钠，的司可巴比妥钠，计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。 %33.94%1001 . 0200780. 310001536. 01 . 01025. 094.1700.2501.13%）（标示量%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT计算如下：计算如下：例例7 7：精密称取复方黄连素片粉末精密称取复方黄连素片粉末4.7306g4.7306g，置，置索氏提取器中，用盐酸索氏提取器中，用盐酸- -甲醇（甲醇（1 1：100100）液提取）液提取至无色，移入至无色，移入

18、100ml100ml容量瓶中，加乙醇至刻度，容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。照柱层析法，精密量取摇匀。照柱层析法，精密量取10m110m1置氧化铝层置氧化铝层析柱上，用析柱上，用30ml30ml乙醇洗脱。收集洗脱液，置乙醇洗脱。收集洗脱液，置50ml50ml量瓶中加乙醇至刻度，摇匀。精密量取量瓶中加乙醇至刻度，摇匀。精密量取5 5 m1 m1 ，置，置10m110m1量瓶中加水至刻度，摇匀，照分光量瓶中加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在光度法，在430nm430nm波长处，以波长处，以5050乙醇为空白，乙醇为空白，分别测定盐酸小檗碱分别测定盐酸小檗碱50mg/100ml50mg/100ml（用

19、（用5050乙醇乙醇为溶剂制备）和样品液的吸收度，分别为为溶剂制备）和样品液的吸收度，分别为0.5360.536和和0.5650.565。计算百分含量。计算百分含量。%03.10%10010010007306. 41000565. 0536. 050%盐酸小檗碱例例7计算如下：计算如下：%Dcms AA对对供供对对百分含量百分含量3、高效液相色谱法、高效液相色谱法标示标示量百量百分含分含量量100C对对A供供A对对 Dms标示量标示量 平均平均 片重片重例例8 8、 盐酸四环素片含量测定盐酸四环素片含量测定2005chP2005chP 取本品取本品1010片，精密称定重片，精密称定重10.33

20、45g10.3345g，研，研细，精密称取细，精密称取1.0235g1.0235g，置，置200ml200ml量瓶中，加量瓶中，加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液滤过，精密量取续滤液2020l l注入液相色谱仪，注入液相色谱仪，记录色谱图（色谱条件与原料药含测相同）记录色谱图（色谱条件与原料药含测相同）, ,得到峰面积为得到峰面积为6446064460的盐酸四环素吸收峰；另的盐酸四环素吸收峰；另取盐酸四环素对照品取盐酸四环素对照品0.1269g0.1269g，同法测定同法测定，得，得到峰面积为到峰面积为62

21、84062840的盐酸四环素吸收峰。按外的盐酸四环素吸收峰。按外标法以峰面积计算出供试品中盐酸四环素占标法以峰面积计算出供试品中盐酸四环素占标示量的的百分量。规格：每片含盐酸四环标示量的的百分量。规格：每片含盐酸四环素素 0.125g0.125g。0.1269 64460628401.02350.125 1.03345标示标示量的量的百分百分量量100标示标示量百量百分含分含量量100C对对A供供A对对 Dms标示量标示量 平均平均 片重片重96.60 例例1 1、精密称取克霉唑精密称取克霉唑0.3015g0.3015g，加冰醋，加冰醋酸溶解后加结晶紫指示液酸溶解后加结晶紫指示液1 1滴，用高

22、氯酸滴，用高氯酸滴定液（滴定液（0.1010mol/L0.1010mol/L）滴定，用去）滴定，用去8 . 6 8 m 18 . 6 8 m 1 。 每。 每 1 m l1 m l 高 氯 酸 滴 定 液高 氯 酸 滴 定 液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于34.48mg34.48mg的的C C1212H H1717ClNClN2 2。计算克霉唑的含量。计算克霉唑的含量。 含量测定结果计算的应用：含量测定结果计算的应用：%26.100%10010003015. 01 . 01010. 068. 848.34%克霉唑例例1 1计算如下：计算如下：%mTVFs 百分含量百分含量例

23、例2 2、精密称取青霉素钾供试品精密称取青霉素钾供试品0.3108g0.3108g，按药典规定用剩余碱量法测定含量。先加按药典规定用剩余碱量法测定含量。先加入氢氧化钠液入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00ml(0.1mol/L)25.00ml，回滴时，回滴时消消0.1002mol/l0.1002mol/l的盐酸液的盐酸液13.80ml13.80ml，空白试，空白试验消耗盐酸液验消耗盐酸液22.08ml22.08ml。求供试品的含量，。求供试品的含量，每每1ml1ml盐酸液盐酸液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于相当于37.25mg37.25mg的的青霉素钾。青霉素钾。 %44

24、.99%10010003108. 01 . 01002. 080.1308.2225.37%）（青霉素钾例例2 2计算如下：计算如下：%mFVVTs ）（百分含量百分含量例例3 3、取司可巴比妥钠胶囊（标示量为每颗取司可巴比妥钠胶囊（标示量为每颗0.1g0.1g）2020粒，除去胶囊后测得内容物总重为粒，除去胶囊后测得内容物总重为3.0780g3.0780g，称取，称取0.1536g0.1536g，按药典规定用溴量，按药典规定用溴量法测定。加入溴液（法测定。加入溴液（0.1 mol/L0.1 mol/L） 25ml25ml，剩，剩余的溴液用硫代硫酸钠液（余的溴液用硫代硫酸钠液（0.1025mo

25、l/L0.1025mol/L）滴）滴定到终点时，用去定到终点时，用去17.94ml17.94ml。空白试验用去硫。空白试验用去硫代硫酸钠液代硫酸钠液25.00ml25.00ml。按每。按每1ml1ml硫代硫酸钠液硫代硫酸钠液（0.1mol/L0.1mol/L）相当）相当13.01mg13.01mg的司可巴比妥钠，的司可巴比妥钠，计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。 %33.94%1001 . 0200780. 310001536. 01 . 01025. 094.1700.2501.13%）（标示量%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT计算如下：计

26、算如下：例例4 4、维生素维生素C C注射液（规格注射液（规格2ml2ml：0.1g0.1g）的）的含量测定：精密量取本品含量测定：精密量取本品2ml2ml，加水，加水15ml15ml与与丙酮丙酮2ml2ml，摇匀，放置，摇匀，放置5 5分钟，加稀醋酸分钟，加稀醋酸4ml4ml与 淀 粉 指 示 液与 淀 粉 指 示 液 1 m l1 m l ， 用 碘 滴 定 液， 用 碘 滴 定 液（0.1003mol/L0.1003mol/L）滴定，至溶液显兰色并持）滴定，至溶液显兰色并持续续3030秒钟不褪，消耗秒钟不褪，消耗10.56ml10.56ml。每。每1ml1ml碘滴定碘滴定液（液（0.1m

27、ol/L0.1mol/L）相当于）相当于8.806mg8.806mg的的C C6 6H H8 8OO6 6。计算维生素计算维生素C C注射液的标示量注射液的标示量%。%27.93%100100021 . 021 . 01003. 056.10806. 8%标示量计算如下：计算如下：%100%标示标示量cVTVFs例例5 5、精密称取对乙酰氨基酚精密称取对乙酰氨基酚15.56mg15.56mg，置置100ml100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液20ml20ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取量取5ml5ml，置，置100ml100

28、ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%0.4%氢氧氢氧化钠溶液化钠溶液10m110m1，加水至刻度，摇匀，照，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在分光光度法，在257nm257nm的波长处测得吸的波长处测得吸收度收度0.5540.554，按，按C C8 8H H9 9NONO2 2的吸收系数的吸收系数( )( )为为715715计算，即得。计算，即得。1%1cmE%mDEAs%cm 百分含量百分含量%15.56/10001007150.554 乙酰氨基酚乙酰氨基酚%5 5 99.59%例例6 6：精密称取复方黄连素片粉末精密称取复方黄连素片粉末4.7306g4.7306g，置，置索氏提取器中，用盐酸索

29、氏提取器中，用盐酸- -甲醇（甲醇（1 1：100100）液提取）液提取至无色，移入至无色，移入100ml100ml容量瓶中，加乙醇至刻度，容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。照柱层析法，精密量取摇匀。照柱层析法，精密量取10m110m1置氧化铝层置氧化铝层析柱上，用析柱上，用30ml30ml乙醇洗脱。收集洗脱液，置乙醇洗脱。收集洗脱液，置50ml50ml量瓶中加乙醇至刻度，摇匀。精密量取量瓶中加乙醇至刻度，摇匀。精密量取5 5 m1 m1 ，置，置10m110m1量瓶中加水至刻度，摇匀，照分光量瓶中加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在光度法，在430nm430nm波长处，以波长处，以5050乙醇为空

30、白，乙醇为空白，分别测定盐酸小檗碱分别测定盐酸小檗碱50mg/100ml50mg/100ml（用（用5050乙醇乙醇为溶剂制备）和样品液的吸收度，分别为为溶剂制备）和样品液的吸收度，分别为0.5360.536和和0.5650.565。计算百分含量。计算百分含量。%03.10%10010010007306. 41000565. 0536. 050%盐酸小檗碱例例4计算如下：计算如下：%Dcms AA对对供供对对百分含量百分含量例例7 7中国药典（中国药典（20052005年版）规定维生年版）规定维生素素B B1212注射液规格为注射液规格为0.1mg0.1mgm1m1，含量测，含量测定如下：精密

31、量取本品定如下：精密量取本品7.5m17.5m1，置，置25ml25ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，置置lcmlcm石英池中，以蒸馏水为空白，在石英池中，以蒸馏水为空白，在3613611nm1nm波长处吸收度为波长处吸收度为0.5930.593，按，按 为为207207计算维生素计算维生素B B1212按标示量计按标示量计算的百分含量算的百分含量。1%1cmE计算如下：计算如下：%5 .95%100101 . 05 . 725100207593. 0%3标示量%100100%11标示标示量cnlEAcmD例例8 8、用异烟肼比色法测定复方己酸孕酮注射用异

32、烟肼比色法测定复方己酸孕酮注射液的含量。当己酸孕酮对照品的浓度为液的含量。当己酸孕酮对照品的浓度为5050 g/mlg/ml，按中国药典规定显色后在，按中国药典规定显色后在380nm380nm波长处测得吸收度为波长处测得吸收度为0.1600.160。取标示量为。取标示量为250mg/ml(250mg/ml(己酸孕酮己酸孕酮) )的供试品的供试品2ml2ml配成配成100ml100ml溶液，再稀释溶液，再稀释100100倍后，按对照品显色倍后，按对照品显色法同样显色，测得吸收度为法同样显色，测得吸收度为0.1540.154。求供试品。求供试品中己酸孕酮的含量为标示量的多少？中己酸孕酮的含量为标示

33、量的多少？ %25.96%10010002501002100160. 0154. 050%标示量%100%标示对供对标示量cnAAcD例例9 9、盐酸四环素（原料药）含量测定盐酸四环素（原料药）含量测定色谱条件和系统适用性试验色谱条件和系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L0.1mol/L草酸铵溶液草酸铵溶液- -二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺- -0.2mol/L0.2mol/L磷酸氢二铵溶液（磷酸氢二铵溶液（6868：2727：5 5），），用氨试液调节用氨试液调节pHpH至至8.38.3为流动相；流速为每为流动相；流速为每分钟分钟1

34、ml1ml；柱温；柱温3535；检查波长为；检查波长为280nm280nm。称取盐酸四环素、称取盐酸四环素、4-4-差向四环素、差向脱水差向四环素、差向脱水四环素、盐酸金霉素及脱水四环素各四环素、盐酸金霉素及脱水四环素各适量适量（ 约（ 约 8 m g8 m g ） ， 置） ， 置 5 0 m l5 0 m l 量 瓶 中 ， 加量 瓶 中 ， 加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，取摇匀，取2020l l注入液相色谱仪，记录注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱图，4-4-差向四环素、差向脱水四环差向四环素、差向脱水四环素、盐酸四环素

35、、盐酸金霉素及脱水四素、盐酸四环素、盐酸金霉素及脱水四环素的分离度均符合要求环素的分离度均符合要求( (组分流出顺序组分流出顺序依次为依次为4-4-差向四环素、差向脱水四环素、差向四环素、差向脱水四环素、盐酸四环素、盐酸金霉素、脱水四环素盐酸四环素、盐酸金霉素、脱水四环素) )。测定法测定法 精密称定本品精密称定本品30.1mg30.1mg，置，置50ml50ml量瓶中，量瓶中，加加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，盐酸溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取摇匀，精密量取2020l l注入液相色谱仪，记注入液相色谱仪，记录色谱图录色谱图, ,得到峰面积为得到峰面积

36、为5320253202的盐酸四环的盐酸四环素吸收峰；另取盐酸四环素对照品素吸收峰；另取盐酸四环素对照品30.6mg30.6mg，同法测定同法测定，得到峰面积为，得到峰面积为5465654656的盐酸四环的盐酸四环素吸收峰。按外标法以峰面积计算出供试品素吸收峰。按外标法以峰面积计算出供试品中盐酸四环素的含量。中盐酸四环素的含量。（按干燥品计算，含盐酸四环素不得少于（按干燥品计算，含盐酸四环素不得少于95.095.0）C对对A供供A对对 Dms百分百分含量含量 10030.6 532025465630.1百分百分含量含量 100 98.96C供供= C对对A供供A对对当供试品和对照品是用相同的方法

37、当供试品和对照品是用相同的方法制备时：制备时：m供供= m对对A供供A对对已知：已知：（即稀释倍数相同）（即稀释倍数相同）例例1010、 盐酸四环素片含量测定盐酸四环素片含量测定2005chP2005chP 取本品取本品1010片，精密称定重片，精密称定重10.3345g10.3345g，研，研细，精密称取细，精密称取1.0235g1.0235g，置，置200ml200ml量瓶中，加量瓶中，加0.01mol/L0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液滤过，精密量取续滤液2020l l注入液相色谱仪，注入液相色谱仪，记录色谱图（色谱条件与原料药含测相同）