第八章磺胺类和喹诺酮类药物的分析ppt课件

1、第八章第八章 磺胺类和喹诺酮类药物的分析磺胺类和喹诺酮类药物的分析第一节第一节 磺胺类药物的分析磺胺类药物的分析对氨基苯磺酰胺衍生物对氨基苯磺酰胺衍生物RHNSO2NHR41N1取代物：母体结构中磺酰取代物：母体结构中磺酰氨基上的一个氢原子被其它基团氨基上的一个氢原子被其它基团取代后的衍生物。取代后的衍生物。N4取代物：母体结构中对位取代物：母体结构中对位氨基上的一个氢原子被其他基团氨基上的一个氢原子被其他基团取代后的衍生物。取代后的衍生物。N1、N4取代物：母体结构中取代物：母体结构中N1和和N 4上各有一个氢原子被取上各有一个氢原子被取代的衍生物。代的衍生物。一、常用药物的化学结构及理化性

2、质一、常用药物的化学结构及理化性质SNH2NOOHNNSNH2NOOHNNCH3H3COSNH2NOOHONCH3CH3NOCH3SNH2NOOH磺磺胺胺甲甲噁噁唑唑磺磺胺胺异异噁噁唑唑磺磺胺胺嘧嘧啶啶磺磺胺胺多多辛辛常用药物化学结构常用药物化学结构 两性化合物：ArNH2显弱碱性；磺酰胺基N1上的H较活泼，即具有一定的酸性。因此可溶于酸性或碱性溶液中。 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺胺类药物的鉴别。可发生重氮化-偶合反应：产生有色沉淀性性 质质与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有色的希夫碱。色的希夫碱。 N1上

3、的芳杂环取代基具有碱性，可上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂反应：生成沉淀。与有机碱沉淀剂反应：生成沉淀。乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后即乙酰化），在显微镜下观察，后即乙酰化），在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴别反都具有特殊的结晶形状，可做鉴别反应。应。性性 质质二、磺胺类药物的鉴别二、磺胺类药物的鉴别1 1化学鉴别法化学鉴别法（1 1铜盐反应铜盐反应可初步区别结构类似的磺胺药可初步区别结构类似的磺胺药表8-1 磺胺类药物与铜盐的反应药物名称药物名称加入硫酸铜试液后的现象加入硫酸铜试液后的现象磺胺甲噁唑磺胺甲噁唑磺胺异噁唑磺胺异噁唑磺胺嘧啶磺

4、胺嘧啶磺胺多辛磺胺多辛生成草绿色沉淀生成草绿色沉淀呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀淀生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色生成黄绿色沉淀，放置后变淡蓝色生成黄绿色沉淀，放置后变淡蓝色（2重氮化重氮化-偶合反应偶合反应猩猩红红色色的的偶偶氮氮染染料料橙橙黄黄色色 重重氮氮盐盐N NH HA Ar r萘萘酚酚, ,O OH HN Na aN NO OH HC Cl l, ,2 22 2（3芳伯氨基与芳醛的缩合反应芳伯氨基与芳醛的缩合反应有色希夫氏碱有色希夫氏碱芳醛芳醛H2NHAr芳醛：芳醛：对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等对二甲氨基苯甲醛、香草

5、醛、水杨醛等如：与对二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中如：与对二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黄色希夫氏碱。生成黄色希夫氏碱。N1取代基为含氮杂环，有一定碱性，可以和取代基为含氮杂环，有一定碱性，可以和有机碱沉淀剂生成沉淀。有机碱沉淀剂生成沉淀。（4N1取代基的反应取代基的反应红棕色红棕色碘化钾试液碘碘化铋钾试液-SDSD2红外光谱识别法红外光谱识别法 红外法具有指纹性，在一定波长下，磺胺类药红外法具有指纹性，在一定波长下，磺胺类药物各具有其独特的吸收光谱图，可鉴别本类药物的特物各具有其独特的吸收光谱图，可鉴别本类药物的特征官能团。征官能团。图图8-1 磺胺嘧啶的红外吸收光谱磺胺嘧啶的红外吸收光谱三、磺

6、胺嘧啶的检查三、磺胺嘧啶的检查1溶液澄清度与颜色的检查溶液澄清度与颜色的检查NNH3N2C4HNO2SSO2NHC4N2H3方法：比色法方法：比色法要求：澄清无色；如显色，与黄色要求：澄清无色；如显色，与黄色3 3号号标准比色液比较，不得更深。标准比色液比较，不得更深。有色的氧化产物有色的氧化产物偶氮苯化合物偶氮苯化合物2有关物质的检查有关物质的检查目的：控制药物的纯度。目的：控制药物的纯度。方法：薄层色谱法，主成分自身对照法方法：薄层色谱法，主成分自身对照法杂质的限度：杂质的限度：0.5。3干燥失重干燥失重 105干燥至恒重，减失重量干燥至恒重，减失重量0.5。4酸度酸度取本品取本品2.0g

7、，加水，加水100mL，置水浴中，置水浴中振摇加热振摇加热10分钟，立即放冷，滤过；分分钟，立即放冷，滤过；分取滤液取滤液25mL，加酚酞指示液，加酚酞指示液2 滴与氢氧滴与氢氧化钠滴定化钠滴定(0.1mol/L)0.20mL，应显粉红色。，应显粉红色。 5炽灼残渣：不得过炽灼残渣：不得过0.1。 6重金属：不得过百万分之十。重金属：不得过百万分之十。四、含量测定四、含量测定H2NSO2NHR+NaNO2+ HCl2NSO2NHRNCl-+NaCl+2H O21亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 测定原理：利用磺胺类药物的测定原理：利用磺胺类药物的N1取代物分取代物分子中含有芳伯氨基，在子中含有芳伯

8、氨基，在05低温状态下、盐低温状态下、盐酸介质中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定酸介质中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类药物的含量。磺胺类药物的含量。 取供试品约取供试品约0.5 g，精密称定，置烧杯中，精密称定，置烧杯中，加水加水40 mL与盐酸溶液与盐酸溶液(1+2)15 mL，然后置于，然后置于电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂插入铂-铂电极后，将滴定管的尖端插入液面铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约下约2/3处，用亚硝酸钠液滴定液迅速滴定，处，用亚硝酸钠液滴定液迅速滴定，随滴随搅拌。至近终点时，将滴定管的尖端提随滴随搅拌。至近终

9、点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，将洗液并人溶液中，出液面，用少量的水淋洗，将洗液并人溶液中，继续缓缓滴定，直到电流计指针突然偏转，并继续缓缓滴定，直到电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点永停法）。每不再回复，即为滴定终点永停法）。每1mL的亚硝酸钠滴定液的亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于相当于25.03 mg的的C10H10N4O2S。磺胺嘧啶含量测定磺胺嘧啶含量测定（1加入适量加入适量KBr（2酸的种类及用量酸的种类及用量 芳胺芳胺 盐酸盐酸1 2.56mol（3室温条件下滴定室温条件下滴定（4滴定速度滴定速度（5指示终点的方法指示终点的方法 药典采用永停法药典

10、采用永停法 %100101 . 003.25%32WcVNaNO磺胺嘧啶含量计算公式：计算公式：主要条件：主要条件：2非水溶液滴定法非水溶液滴定法含磺酰亚氨基含磺酰亚氨基SO2NHR，其，其N上的上的H具有具有一定酸性一定酸性R吸电子效应越强，吸电子效应越强，N上的上的H越易失去，越易失去，酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。 取供试品约取供试品约0.5g，精密称定，加二甲，精密称定，加二甲基甲酰胺基甲酰胺40mL溶解后，加偶氮紫指溶解后，加偶氮紫指示液示液3滴，用甲醇钠滴定液滴，用甲醇钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液恰显蓝色，并将滴定的滴定，至

11、溶液恰显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每结果用空白试验校正。每1mL甲醇钠甲醇钠滴定液滴定液(0.1mol/L)相当于相当于26.73mg的的C11H13N3O3S。磺胺异噁唑磺胺异噁唑（1） 测定结果准确，终点明显。测定结果准确，终点明显。（2甲醇钠滴定溶液应临用前标甲醇钠滴定溶液应临用前标定。定。（3滴定最好在隔绝空气中二氧滴定最好在隔绝空气中二氧化碳的情况下进行。化碳的情况下进行。计算公式：计算公式：讨讨 论：论：%100101 . 0T)(%30WcVV甲醇钠磺胺异噁唑含量3紫外分光光度法紫外分光光度法仅有单一组分或虽有多种组分，但组分间互仅有单一组分或虽有多种组分，但组分间互不

12、干扰的制剂：不干扰的制剂：直接采用紫外分光光度法，在待测组分的最直接采用紫外分光光度法，在待测组分的最大吸收波长处测定吸收度，以对照品比较法或大吸收波长处测定吸收度，以对照品比较法或吸收系数法计算吸收系数法计算磺胺嘧啶片的溶出度测定磺胺嘧啶片的溶出度测定有多种组分且各组分吸收光谱互相重叠：有多种组分且各组分吸收光谱互相重叠： 采用计算分光光度法采用计算分光光度法 复方磺胺甲噁唑片的含量测定复方磺胺甲噁唑片的含量测定(2000(2000版）版）磺胺嘧啶片的溶出度测定磺胺嘧啶片的溶出度测定100标标示示量量溶溶液液总总体体积积稀稀释释倍倍数数溶溶出出量量1%1cmE1%A 取供试品照溶出度测定浆法

13、，以盐酸溶液取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液(91000)1000mL为溶剂，转速为为溶剂，转速为100r/min，依法操作，经，依法操作，经60min，取溶液，取溶液5 mL滤过，精密量取续滤液滤过，精密量取续滤液1 mL，置，置50 mL量瓶中，加量瓶中，加0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在254 nm的波长处测定吸收的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶度，按磺胺嘧啶C10Hl0N4O2S的吸收系数（的吸收系数（ ）为）为866计计算出每片的溶出量，限度为标示量的算出每片的溶出量，限度为标示量的70，应符合规定。，应符合规定。计算公式如下：计

14、算公式如下：检查方法：检查方法：1%1cmE复方磺胺甲噁唑片含量测定复方磺胺甲噁唑片含量测定 处方组成： 磺胺甲噁唑 400mg 甲氧苄啶测定 80mg 辅料 适量 测定方法： 双波长分光光度法 双波长分光光度法双波长分光光度法(双波长等吸收法双波长等吸收法) 当光谱重叠时，在其光谱中当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在选定的波长处，干选择两波长，在选定的波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组分与扰组分有相同的吸收；被测组分与干扰组分的吸收有足够大的差别。干扰组分的吸收有足够大的差别。则两波长处吸光度的差值与被测组则两波长处吸光度的差值与被测组份的浓度成正比。份的浓度成正比。BBAABABAB

15、BAABABAlclcAAAlclcAAA2222211111由于BBAA21所以AAABABAlcAAA)(1212可见，在双波长分光光度法中吸光度的差值与干扰组份B无关。2 为测定波长, 为参比波长A为待测组分, B为干扰组分1 磺胺甲噁唑测定：因为磺胺甲噁唑在257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小，并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为测定波长2），在304nm波长附近选择等吸收波长为参比波长1）。 甲氧苄啶测定：由甲氧苄啶紫外吸收图谱可知，在239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收，而此波长是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸收点，故选择2

16、39nm作为甲氧苄啶的测定波长，在295nm波长附近选择等吸收波长作为参比波长。 波长选择波长选择 精密称取在105干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1) 与对照品溶液(2) 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量约相当于磺胺甲噁唑50mg与甲氧苄啶10mg），置100ml 量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲噁唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品母液。对照品溶液对照品溶液配制配制供试品母液供试品母液配制配制 稀释液的配制：精密量取供试品母液与对照稀释液

17、的配制：精密量取供试品母液与对照品溶液品溶液(1)(1)、(2)(2)各各1ml 1ml ，分别置，分别置50ml50ml量瓶中，量瓶中，各加各加0.40.4氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得。即得。 参比波长和测定波长的确定：取对照品溶液参比波长和测定波长的确定：取对照品溶液(2)(2)的稀释液，以的稀释液，以257nm 257nm 为测定波长为测定波长(2)(2)，在在304nm 304nm 波长附近波长附近( (每间隔每间隔0.5nm)0.5nm)选择等吸收选择等吸收点波长为参比波长点波长为参比波长(1)(1)，要求，要求2 2 1 1 0 0 。 样液的测

18、定：再在样液的测定：再在22与与11波长处分别测定波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1) (1) 的稀的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值释液的吸收度，求出各自的吸收度差值( () )计算，即得。计算，即得。 磺胺甲噁唑测定磺胺甲噁唑测定 稀释液的配制：稀释液的配制： 精密量取上述供试品母液与精密量取上述供试品母液与对照品溶液对照品溶液(1)(1)、(2)(2)各各2.5ml,2.5ml,分别置分别置50ml 50ml 量量瓶中，各加盐酸氯化钾溶液取瓶中，各加盐酸氯化钾溶液取0.1mol/L0.1mol/L盐盐酸溶液酸溶液75ml75ml与氯化钾与氯

19、化钾6.9g6.9g，加水至，加水至1000ml1000ml，摇，摇匀稀释至刻度，摇匀，即得。匀稀释至刻度，摇匀，即得。 参比波长和测定波长的确定：照分光光度法取参比波长和测定波长的确定：照分光光度法取对照品溶液对照品溶液(1) (1) 的稀释液，以的稀释液，以239.0nm 239.0nm 为测定为测定波长波长(2)(2)，在，在295nm 295nm 波长附近波长附近( (每间隔每间隔0.2nm)0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长选择等吸收点波长为参比波长(1)(1)，要求，要求2-2-1 1 0 0 ， 样液的测定：再在样液的测定：再在2 2 与与1 1 波长处分别测定波长处分别测定

20、供试品溶液的稀释液与对照品溶液供试品溶液的稀释液与对照品溶液(2) (2) 的稀释的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值液的吸收度，求出各自的吸收度差值( () )，计算，即得。计算，即得。 甲氧苄啶测定甲氧苄啶测定计算公式计算公式mAmmxmgTMPSMZRRA/片）的含量（式中，式中，AXAX为供试品溶液稀释液的吸光度差值；为供试品溶液稀释液的吸光度差值； ARAR为对照品溶液稀释液的吸光度差值；为对照品溶液稀释液的吸光度差值； mR mR为为SMZSMZ对照品的称量对照品的称量mgmg） m m为样品的称量为样品的称量g g）；）； 为平均片重为平均片重g/g/片）。片）。 m第二节第二

21、节 氟喹诺酮类药物的分析氟喹诺酮类药物的分析 喹诺酮类药物是一类化学合成抗菌药，喹诺酮类药物是一类化学合成抗菌药，由于具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用安全由于具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用安全及易于制造等优点，发展迅速。及易于制造等优点，发展迅速。基本母核结构：基本母核结构：6-6-氟氟-4-4-喹诺酮喹诺酮-3-3-羧酸羧酸NOFCOOH一、几种常用药物的化学结构及理化性质一、几种常用药物的化学结构及理化性质NOC2H5COOHFNHNNOCOOHFNHNNOC2H5COOHFNH3CNNOCOOHFNH3CNOCH3 环丙沙星环丙沙星 氧氟沙星氧氟沙星常用药物结构常用药物结构诺氟沙星诺氟沙星

22、培氟杀星培氟杀星理理 化化 性性 质质 显酸碱两性显酸碱两性 氟喹诺酮类药物结构分子中氟喹诺酮类药物结构分子中都含有羧基及碱性氮原子都含有羧基及碱性氮原子 溶解性溶解性 易溶于碱和酸，在水和乙醇易溶于碱和酸，在水和乙醇中极微溶解。中极微溶解。 紫外区有特征吸收紫外区有特征吸收 具有共轭系统具有共轭系统二、诺氟沙星的分析二、诺氟沙星的分析诺氟沙星：临床常用消炎药诺氟沙星：临床常用消炎药化学名：化学名：1-乙基乙基-6-氟氟-4-氧代氧代-l,4-二氢二氢-7-(1-哌嗪基哌嗪基)-3-喹啉羧酸喹啉羧酸构造：构造：NOC2H5COOHFNHN性质：结构中有羧基显酸性，有哌性质：结构中有羧基显酸性，

23、有哌嗪基显碱性，是两性化合物。嗪基显碱性，是两性化合物。1鉴别试验鉴别试验显显红红棕棕色色本本品品与与丙丙二二酸酸、醋醋酐酐共共热热（1） N1为叔氨基为叔氨基 （2F6显有机氟化物的性质显有机氟化物的性质 （3） 紫外吸收特征：紫外吸收特征：5g/mL本品的本品的0.4NaOH溶液，溶液，max273nm（4采用红外光谱、薄层色谱、采用红外光谱、薄层色谱、HPLC鉴鉴别别蓝蓝紫紫色色茜茜素素氟氟蓝蓝 pH4.33CeF2检查试验检查试验（1溶液的澄清度：溶液的澄清度：目的：控制碱不溶性杂质的限量目的：控制碱不溶性杂质的限量检查方法：比浊法检查方法：比浊法指标要求：指标要求：5份均应澄清；如显

24、浑浊，份均应澄清；如显浑浊，与与2号浊度标准液比较，均不得更浓。号浊度标准液比较，均不得更浓。（2氟：氟：限制：含氟量限制：含氟量 5.4（理论（理论5.95） 偏低原因：原料制备、副反应偏低原因：原料制备、副反应（3有关物质：有关物质：HPLC法法 限制：杂质限制：杂质A0.2%。其他单个杂质。其他单个杂质0.5%。其他各杂质的和。其他各杂质的和1.0%。（4干燥失重：本品易吸收水分。干燥失重：本品易吸收水分。 限制：限制：105，减失重量不得过，减失重量不得过1.0%（5炽灼残渣炽灼残渣 铂坩埚铂坩埚 限制：遗留残渣不得过限制：遗留残渣不得过0.1%。（6重金属重金属 限制：限制： 15p

25、pm。3含量测定含量测定 原理：利用分子中有哌嗪基团显碱性。原理：利用分子中有哌嗪基团显碱性。 测定方法：取本品约测定方法：取本品约0.25g，精密称定，精密称定，加冰醋酸加冰醋酸20mL溶解后，加橙黄溶解后，加橙黄指示指示剂，用高氯酸标准滴定溶液剂，用高氯酸标准滴定溶液(0.1mol/L)滴定至溶液显紫红色，并将滴定结果用滴定至溶液显紫红色，并将滴定结果用空白校正。空白校正。 本卷须知：严格控制醋酐用量本卷须知：严格控制醋酐用量 诺氟沙星分子中哌嗪基为仲胺，容诺氟沙星分子中哌嗪基为仲胺，容易发生乙酰化反应。易发生乙酰化反应。非水碱量法非水碱量法色谱条件：色谱条件：色谱柱：色谱柱：C18柱柱流

26、动相：流动相：0.025mol/L磷酸溶液磷酸溶液用三乙胺调节用三乙胺调节pH值至值至3.00.1）-乙腈乙腈87 13）检测波长：检测波长：278nm系统适用性：系统适用性： 诺氟沙星峰与与诺氟沙星峰与与环丙沙星峰和依诺沙星峰的分离度环丙沙星峰和依诺沙星峰的分离度均应不小于均应不小于2.0定量方法：外标法定量方法：外标法 高效液相色谱法三、环丙沙星的分析三、环丙沙星的分析 化学名：化学名：1- 1-环丙基环丙基-6-6-氟氟-l,4-l,4-二氢二氢-4-4-氧氧-7-(1-7-(1-哌嗪基哌嗪基)-3-)-3-喹啉羧基喹啉羧基构造：构造：NOCOOHFNHN与诺氟沙星的结构区别是与诺氟沙星的结构区别是N1N1上的取代基不同上的取代基不同 1鉴别试验鉴别试验红外光谱法：与对照的图谱一致。红外光谱法：与对照的图谱一致。 TLC法：供试品所显主斑点的颜色位置与法：供试品所显主斑点的颜色位置与对照品的主斑点相同