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文档简介

1、在线设计基因、lncRNA的siRNA/shRNA序列siDirectDSIRSigmainvivogenRNAi Codex12345网址: siDirect1:输入基因的accession number(NCBI)siDirect2:点击,自动出现对应序列3:点击,设计siRNAsiDirect点击options,可设置其他参数点击options,网站会给出一系列的siRNA及其他判断信息,如Tm值,脱靶效应,GC含量等siDirectsiDirect以小鼠HOXC6为例,accession number为NM_010465.2siDirect红框处即为得到的siRNA序列,包含正义链(上

2、行)和反义链(下行)siDirect以人LINC01018为例,accession number为NR_024424.2DSIR(寻找基因、lncRNA的siRNA/shRNA序列)2网址: DSIRDSIR1:输入基因名2:输入FASTA序列DSIR3:选择要设计的序列要求4:运行DSIR以小鼠HOXC6为例,NCBI中找到小鼠HOXC6的转录本序列DSIR选择siRNA 21nt,点击运行网站会按照评分高低,将设计的siRNA排序,且去掉评分在90分以下得siRNA,我们只要选择排在前面得siRNA即可。SS为正义链,AS为反义链DSIRDSIR以人LINC01018为例Sigma(寻找基

3、因、lncRNA的shRNA序列)3网址: science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.htmlSigma输入基因名或基因IDSigmaSigma以HOXC6为例点击shRNASigma此处包含种属信息,可根据需要选择好种属,然后点击价格SigmaProduct Details下面出现VALIDATED,即为验证过的序列。一般倾向选择CDS区的shRNA。sigma一般为pLKO.1载体,其shRNA序列一般为:5 CCGG21bp senseCTCGAG21bp antisenseTTTTTG 3正

4、义链反义链Sigma该网站有关lincRNA的沉默序列非常少;因此不建议选用该网站设计shRNA序列invivogen(寻找基因的siRNA序列)4网址: invivogen1:输入基因名2:输入编码序列invivogen3:点击搜索invivogen以小鼠HOXC6为例,NCBI中找到小鼠编码区的HOXC6序列invivogen点击搜索后即可得到上述siRNA序列信息RNAi Codex(寻找基因的siRNA序列)5网址: RNAi CodexRNAi Codex搜索形式多样,如基因symbol、Accession number、Ensembl ID等种属包含:人、小鼠、大鼠RNAi Cod

5、ex以人HOXC6为例,选择Symbol,输入基因名,选择种属人,点击提交;结果中点击箭头所示的编号,即可出现序列信息(红色序列即为siRNA序列)小结网站名类型适用范围检索方式种属网址siDirectsiRNAshRNAgenelncRNAaccession number不限 design.cgiDSIRsiRNAshRNAgenelncRNAgene name & FASTA不限 SigmashRNAgenelncRNA(少)gene name /symbol/ID人/小鼠/大鼠 /china-mainland/zh/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.htmlinvivogensiRNAgenegene name & 编码序列不限 RNAi

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