中学生物实验中常用试剂的配制及作

1、1. 碘液配制：取2g碘化钾，溶解在5ml蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏 水稀释至 300ml。溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。2. xx 试剂配制：斐林试剂(Fehling'ssolution)是德国化学家斐林(Hermann vonFehling, 1812年-1885年)在1849年发明的。斐林试剂斐林试剂 A和斐林试剂 B配制而成的。斐林试剂 A是氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液，斐林试剂 B是硫酸铜的质量分数为0.05g/mL的溶液。临用时斐林试剂 A与斐林试剂B等 量混合。作用：鉴定还原性糖：

2、C6H12O6果糖、麦芽糖、乳糖等。还原性糖与斐林试剂发生作用,水浴加热,生成砖红色沉淀。如用于鉴定 组织液中是否有还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。3. xx 尿糖定性试剂配制： 1 73克柠檬酸钠和 100克无水碳酸钠溶解于 800毫升水中。再取17.3 克结晶硫酸铜溶解在 100毫升水中,慢慢将此溶液加入上述溶液中, 最后用水稀释到 1 升,边加边搅,如产生沉淀可滤去。作用：鉴定还原性糖,在沸水浴加热条件下与还原糖反应而生成砖红色的Cu2O 沉淀,使用原理同斐林试剂,都是二价铜离子与醛基在沸水浴加热条件 下反应而生成砖红色的沉淀,所不同的是班氏试剂可长期使用。4.双缩脲试剂1

3、/ 5配制：双缩脲试剂(biuret reage nt )是由双缩脲试剂A(NaOH和双缩脲试剂 B(CuSO4)两种试剂组成。双缩脲试剂 A 的成分是氢氧化钠的质量分数为 0.1g/mL 的 水溶液；双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。双缩脲试剂使用时，先向 2mL蛋白质溶液加入2mL双缩脲试 剂A,振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入 34滴双缩脲试剂B,振荡 摇匀后观察现象。具体方法是先将双缩脲试剂 A 加入组织样液，振荡均匀(必须营造碱性环 境)，再加入双缩脲试剂B,摇荡均

4、匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶 液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反 应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与 Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与 蛋白质浓度成正比。5. xx皿染液配制：苏丹皿或苏丹W干粉0.1g; 95%酒精10 ml;过滤后再加入10 ml甘 油。或者取0.1克苏丹皿，溶于20毫升95%酒精中，即成0.5%苏丹皿染液。作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹 皿染成橘黄色(或被苏丹W染成红 色)。6. xxxx 染色剂配制：配制质量分数为 1%健那绿染液 :将 0.5g 健那绿溶解于 50mL 生理盐水 中 ,加温到 30-40 摄氏度 ,使其

5、充分溶解。作用：专一性用于线粒体染色的活细胞染料。将线粒体染成蓝绿色7. 吡罗红甲基绿染色剂配制：2/ 5 染色剂 A 液的两种配制方法第一种方法：取吡罗红甲基绿粉1 g,加入到100 mL蒸馏水中溶解，然后 用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。第二种方法：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红 G 5 g溶于95mL 蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，即为A 液,放入棕色瓶中备用。 染色剂 B 液的配制方法 B 液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4 g,用蒸馏水溶解至1 000 mL备用；再取乙酸12 mL，用蒸 馏水稀

6、释至1 000 mL备用。取配好的乙酸钠溶液 30 mL和稀释的乙酸20 mL， 加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。 吡罗红甲基绿染色剂是由 A液、B液混合配制而成的。取 A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂 应现用现配。作用：甲基绿可以给 DNA染色，使DNA呈现绿色。吡罗红可以给 RNA染 色，使RNA呈现红色。8. 质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液配制：30g蔗糖溶解于蒸馏水中，并稀释至100毫升。作用：观察成熟植物细胞质分离时用。经此处理细胞仍具活性。9. 层析液配制：由20份石油醚（在60900C下分馏出

7、来的）、2份丙酮和1份苯混 合而成。代用品： 93号汽油、 95%的酒精溶液。作用：是一种脂溶性很强的有 机溶剂，叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤 纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。10. 解离液3/ 5配制：质量分数为 15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精溶液等量混合。作用：用于洋葱根尖的解离，能杀死细胞，并使组织中的细胞相互分离开 来。11. 染色体染色剂配制：质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫溶液的配制；取1克龙胆紫，用少量 蒸馏水溶解后，加蒸馏水，稀释到 100 毫升，保存在棕色瓶内。质量浓度为0.02g/mL 醋酸洋红溶液的配制；取 45

8、 毫升冰醋酸，加蒸馏水 55毫升，煮 沸后徐徐加入洋红 2 克，搅拌均匀后加入 1 颗铁锈钉，煮沸 10 分钟，冷却后过 滤，贮存在棕色瓶内。作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。12. 质量浓度为 0.1mg/ml 的亚甲基蓝溶液配制：配制：将10mg亚甲基蓝溶于蒸馏水，并稀释至100ml而成作用： （1）用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察；（2）用于检测水中细菌情况，根据亚甲基蓝褪色情况，判断水质被细菌污 染情况。是活体染色剂。13. 二苯胺试剂配制：A液：1.5克二苯胺（C12H11N溶于100ml冰醋酸（乙酸,C2H4O2中， 再加 1.5ml 浓硫酸，用棕色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化 ,再使用。B液：体积分数为0.2%的乙醛溶液（C2H4O。将0.1ml B液加入10ml A液 中，制成二苯胺试剂，现配现用。作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色。因此，二苯胺可以作为鉴定 DNA的试剂。14. 溴麝香草酚蓝水溶液：4/ 5配制：在 1 升 20%酒精溶液中加入 l 克溴麝香草酚蓝即可。作用：溴麝香草 酚蓝溶液是一种指示剂，检测二氧化碳。较低浓度的C02使其由蓝变绿，较高浓度CO2使其由蓝变绿再变黄.15. 重铬酸钾的浓硫