饲料添加剂 液态嗜酸乳杆菌

1、Q/0900TGA泰安市国泰民安生物科技有限公司企业标准Q/0900 TGA0092016饲料添加剂 液态嗜酸乳杆菌2016 - 08 - 18发布2016- 09-18实施泰安市国泰民安生物科技有限公司泰安市国泰民安生物科技有限公司发布前言本标准按照GB/T 1.1标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准自发布之日起有效期三年，到期应复审。本标准由泰安市国泰民安生物科技有限公司提出并起草。本标准主要起草人：王旺、李春利。本标准于2016-08-18首次发布。饲料添加剂 液态嗜酸乳杆菌1范围本标准规定了饲料添加剂液态嗜酸乳杆菌液体产品的术语和定义、分类和代号、要求、抽样、

2、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。本标准适用于以嗜酸乳杆菌为菌种经发酵、灌装制成的饲料添加剂液态嗜酸乳杆菌液体产品。2规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB 4789.3 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数GB 4789.5 食品卫生微生物学检验 志贺氏菌检验GB 4789.10 食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB/T 5917.1 饲料粉碎粒度测定 两层筛筛分法GB/T 6435 饲料中水分的测定GB/T 6682 分析实验室用

3、水规格和试验方法GB 10648 饲料标签GB/T 13079 饲料中总砷的测定GB/T 13080 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法GB/T 13081 饲料中汞的测定方法GB/T 13082 饲料中镉的测定方法GB/T 13091 饲料中沙门氏菌的检验方法GB/T 13092 饲料中霉菌的检验方法GB/T 14699.1 饲料 采样GB/T 17480 饲料中的黄曲霉毒素B2的测定 酶联免疫吸附法GB/T20191 饲料中嗜酸乳杆菌的微生物学检验JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则中华人民共和国兽药典2005年国家质量监督检验检疫总局第75号令定量包装商品计量监督管理办法3术语和

4、定义下列术语和定义适用于本标准。3.1杂菌目标菌以外的菌均视为杂菌。4产品分类和代号产品分类和代号见表1表1 产品分类和代号通用名称产品代号适用动物饲料添加剂液态嗜酸乳杆菌GA-10养殖动物饲料添加剂液态嗜酸乳杆菌GA-11养殖动物5 要求5.1 感官指标 为褐色液体，略有沉淀，无变质、异味、异臭，有微生物发酵的特殊气味。5.2 PH值 不高于5.05.3 卫生指标卫生指标见表2 表2 卫生指标项目指标黄曲霉毒素B1,g/kg 10.0砷(以总砷计)，mg/kg 2.0铅（以pb计），mg/kg 20.0汞（以Hg计），mg/kg 0.1镉(以Cd计)，mg/kg 0.5杂菌率， 0.5大肠菌

5、群，个/kg 1.0×105霉菌总数，个/kg 2.0×105沙门氏菌（CFU/25克）0致病菌（肠道致病菌及致病性球菌）不得检出5.4 技术指标技术指标见表3 表3 技术指标产品代号嗜酸乳杆菌，CFU/Ml GA-101.0×108GA-1110.0×1095.5 净含量符合标签标注，偏差符合定量包装商品计量监督管理办法的规定。6 抽样6.1组批原料不变，同一配方、同一工艺、同一生产周期连续生产的产品为一个批次。6.2采样按照GB/T 14699.1的规定进行样品采集。所采样品具有代表性，避免采样时交叉感染。采样工具经无菌处理，如已灭菌牛皮纸或广口瓶、

6、金属勺和刀。7试验方法7.1感官指标样品放置在烧杯内，在非直射阳光、光线充足、无异味的环境中，用眼观的方法观察其色泽，用鼻嗅的方法检查其气味。7.2 PH值按兽药典二部附录PH值测定法的规定执行。7.3黄曲霉毒素B1GB/T 17480规定执行7.4 砷方法1：按GB/T 13079的规定执行(仲裁法)方法2：按中华人民共和国兽药典的规定执行7.5 铅方法1：按GB/T 13080的规定执行(仲裁法)方法2：按中华人民共和国兽药典的规定执行7.6 汞按GB/T 13081的规定执行7.7 镉按GB/T 13082的规定执行7.8 杂菌率按附录A的规定执行7.9 大肠菌群按GB 4789.3的规

7、定执行7.10 霉菌总数按GB/T 13092的规定执行7.11 沙门氏菌按GB/T 13091的规定执行。7.12 志贺氏菌按GB 4789.5 的规定执行。7.13 金黄色葡萄球菌按GB 4789.10规定执行。7.14 嗜酸乳杆菌方法1：按GB/T 20191的规定执行(仲裁法)方法2：按附录A的规定执行7.15 净含量按JJF 1070的规定执行。8 检验规则8.1 检验分类检验分为出厂检验和型式检验。8.2 出厂检验 出场检验项目为感官指标、Ph值、嗜酸乳杆菌活菌数。 检验合格的，签发“产品质量检验合格证”。8.3 型式检验 型式检验项目为本标准“要求”中的全部项目。 型式检验每年进

8、行一次。有下列情况之一的必须进行型式检验： a)主要原料变化及配方有较大改变，可能影响产品性能时； b)工艺变化、设备改造后； c)停产6个月以上，重新恢复生产时； d)行业主管部门提出进行型式检验要求时； e)主成分指标与上次型式检验有较大差异时。 型式检验由本企业化验室检验或委托检验 。8.4 判定规则 按照本标准的规定执行。有一项指标不符合本规则要求，再从双倍量的包装中抽取样品进行复检，以复检结果为准。若仍有一项指标不合格，则判该批产品为不合格品。卫生指标中的微生物指标不得复检，直接判定该批产品为不合格产品。各项技术指标中的极限数值采用修约值比较法。 若供需双方对产品质量发生争议时，可由

9、双方协商，或选定法定机构按照本标准进行判定。9 标签符合GB 10648的要求10 包装、运输、贮存和保质期10.1 包装采用聚烯烃塑料瓶内包、瓦楞纸箱外包装。10.2 运输运输过程防雨、防潮、防止污染、保持包装的完整性。10.3 贮存存放在通风、干燥、无污染的地方，避免与有毒、有害物质混合存放。10.4 保质期 在符合运输、贮存条件的情况下，原包装产品保质期6个月。附录A (规范性附录) 嗜酸乳杆菌及杂菌率的测定A.1原理利用LBS培养基对样品中嗜酸乳杆菌活菌数进行梯度稀释倾注法计数。A.2培养基和稀释液除非另有说明，在分析中仅使用确认认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682规定的三级水或相

10、当纯度的水。按本标准规定的方法配制培养基或购买商品化的产品。 LBS培养基 成分酵母浸粉5.0、胰酪蛋白胨10.0、磷酸二氢钾6.0、硫酸亚铁0.034、硫酸镁0.575、葡萄糖20.0、乙酸钠25.0、柠檬酸铵2.0、硫酸锰0.12、琼脂15.0。A 制法称取LBS培养基84.0g，在吸取吐温-801ML和冰乙酸1.3ML,加热搅拌溶解于1000ML蒸馏水中，调节PH值5.5（±0.2），当日使用，无需高压灭菌。次日使用，需118高压灭菌15min.注明：该培养基溶解后有少量沉淀。 稀释液 成分氯化钠8.5g、蒸馏水1000ML。 制法称取氯化钠8.5g于1000ML蒸馏水中，充分

11、溶解，121高压灭菌15min.备用。A.3 仪器与设备 天平：感量：0.01g 振荡器 高压灭温锅：121 生化培养箱A.4 样品制备按GB/T 14699.1的规定，采取有代表性的样品500ML，从中吸取10.00ML，加入带玻璃珠的盛有90ML无菌生理盐水的三角瓶中，置旋转式摇床上200rpm充分振荡30min,即成木叶的菌悬液，备用。A.5 测定步骤 样品稀释用无菌移液管吸取1ML上述母液的菌悬液加入盛有9ML无菌生理盐水的试管中，混匀成1：102稀释的菌悬液，这样依次稀释，分别得到1：103、1：104、1：109等浓度（每个稀释度必须更换无菌吸管） 接种混匀在无菌超净工作台中,采用

12、无菌操作，用1ML无菌移液管分别吸取1ML不同稀释度悬液加入已灭菌的培养皿，将事先已灭菌并融化好的LBS培养基倒入上述培养皿中，每个约15-20ML。旋转混匀，静置凝固。每个样品取2-3个连续适宜稀释度，每一稀释度重复2-3次，同时加盐水对照。 培养将接种好的培养皿放置生化培养箱内，盖好皿盖，平皿倒置，于37±0.5培养18-24H. 菌落特征菌落表面粗糙，不透明，不闪光，边缘扩张，圆形或蔓延成波浪形、不规则形，灰白色或微黄色。 菌落计数 结果计算嗜酸乳杆菌活菌数（CFU/ML）=嗜酸乳杆菌菌落平均数×稀释倍数 菌落计数办法只计算符合的菌落。当只有一个稀释度，其菌落在30-300之间时，则以该菌落数乘以稀释倍数。若有两个稀释度，其菌落在30-300之间时，应按两者菌落总数之比值来决定，若其比值小于2，计算两者的平均数乘以稀释倍数:若大于2则计数其中