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1、专题1基因工程知识点参考答案【知识点一】基因工程的概念应从以下几个方面理解:原理基因重组操作环境体外操作对象基因操作水平分子基本过程目的基因的获取-基因表达载体的构建-将目的基因导入受体细胞-目的基因的检测与鉴结果定向改变生物性状【知识点二】基因工程的基本工具1. 限制性酶(1)原核细胞(2)识别特定磷酸二酯键一种特定的核苷酸序列(3)磷酸二酯键-两(4)黏性平相同2. DNA连接酶一一“分子缝合针”(1)大肠杆菌DNAT4噬菌体DNA(2)大肠杆菌DNAT4噬菌体DNA黏性末端平末端注意:比较有关的酶(1)DNA水解酶:游离的脱氧核苷酸(2)DNA解旋酶:两条H键注意:高温(3)DNA聚合酶
2、:模板(4)DNA1接酶:磷酸二酯键模板(5)限制性酶:磷酸二酯键3. 基因进入受体细胞的载体一一“分子运输车”(1)分子运载车的分类:质粒:原核细胞小环病毒:常用的病毒有入噬菌体动植物病毒。(2)运载体使用的目的:目的基因目的基因(3) 作为运载体必须具备的条件: 复制限制酶外源基因或目的基因标记基因【知识点三】基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作步骤主要包括:目的基因的获取;基因表达载体的构建;将目的基因导入受体细胞;目的基因的检测与鉴定。1. 目的基因的获取方法:从基因文库中获取、利用PCR提取目的基因、人工合成法。 PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。原理DNA
3、双链复制。条件:模板DNARNA引物;四种脱氧核苷酸;热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。过程:(90-95度)变性S5560度)弓I物3(70-75度)延伸合成变性复性子链延伸2. 基因表达载体: 功能:稳定存在;遗传表达 目的基因+启动子+终止子+标记基因3. 转化:维持稳定表达(1) 导入植物细胞:农杆菌转化法(表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染植物细胞)这是双子叶植物和裸子植物中常用的基因转化方法;基因枪法,花粉管通道法(2) 导入动物细胞:显微注射法,(3) 导入微生物细胞:CaT感受态基因表达载体基因表达载体4. 目的基因检测和表达:(1) 分子水平检测 细胞染色体DNA上DNA分子杂
4、交DNA 分子杂交mRNA杂交带J抗体抗原-抗体(2) 个体水平检测:性状【知识点四】基因工程的应用一、植物基因工程成果1 .抗虫转基因植物杀虫基因:主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抵制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。2 .抗病转基因植物抗病基因:病毒外壳蛋白病毒的复制酶几丁质酶抗毒素合成3 其他抗逆转基因植物:抗逆基因:调节渗透压的(使植物细胞渗透压升高以适应盐碱或干旱环境)、抗冻蛋白、抗除草剂4 利用转基因改良植物的品质举例:蛋白质编码某种关键酶的活性,氨基酸二、动物基因工程1. 生长激素2.乳糖3.蛋白启动子成果:乳腺生物反应器4. 免疫排斥调节因子,抗原决定基因除去抗原决定四基因工程药品来源:工程菌。成果:白细胞介素、干扰素、抗体、疫苗、激素等。五、基因治疗1.概念:把正常基因该基因的表达产物最有效2. 种类:体外基因治疗和体内基因治疗。3原理:正常【知识点五】蛋白质工程的崛起1. 基因工程的实质:蛋白质,自然界已存在2. 蛋白质工程的目的:符合人们生活需要自然界已存3. 蛋白质工程的目标:蛋白质蛋白质4. 蛋白质工程的基本途径:预期蛋白质功能一设计预期蛋白质结构一推测应有的氨基酸序列-找到相对应的脱氧核苷序列,自然界
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