邻二氮菲分光光度法测铁722型分光光度计ppt课件

1、邻二氮菲分光光度法测铁邻二氮菲分光光度法测铁FeNN32+一、实验目的v学习分光光度法主要丈量条件的选择。v掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法。v了解721型或其他型号分光光度计的构v造和学习运用方法。二、实验原理 分光光度法测定物质含量时的主要丈量条件是经过吸收曲线的测绘而选择的入射波长。 邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，反响式如下：FeNN32+NN3Fe2+2Fe3+ + 2NH2OH = 2Fe2+ +N2 + 2H2O + 2H+FeNN32+配合物lgK稳 =21.3，摩尔吸光系数(510)=1.1104 测定时pH=5较适宜。酸度高时，反响速度慢，酸度太低，亚铁离子易水解

2、，影响测定。 三、仪器与试剂仪器：722或其他型号型分光光度计、容量瓶、吸量管。100mg/ml铁规范溶液、10 mg/ml铁规范溶液、10%盐酸羟胺暂时配置、0.1%邻二氮杂菲溶液新配置、1mol/L醋酸钠溶液、铁未知液。四、实验操作步骤110 ug/mL铁规范运用液和水样的配制铁规范运用液和水样的配制用移液管移取用移液管移取100 ug/mL的铁规范贮藏液的铁规范贮藏液10.00 mL，置于，置于100mL容量瓶中，参与容量瓶中，参与2 mL 6 molL HCl，用蒸馏水稀释至，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。刻度，摇匀。2规范系列的配制规范系列的配制用刻度移液管分别移取上一步骤配制的铁规范运

3、用溶液用刻度移液管分别移取上一步骤配制的铁规范运用溶液10ug/mL：0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL依次放入依次放入7只只50mL容量瓶中，容量瓶中，分别参与分别参与10%盐酸羟胺溶液盐酸羟胺溶液1.0 mL，稍摇动，再参与，稍摇动，再参与0.1%邻二氮菲溶液邻二氮菲溶液2.0 mL及及Hac-NaAc缓冲溶液缓冲溶液5 mL，稀释至刻度，充分摇匀。，稀释至刻度，充分摇匀。四、实验操作步骤3.丈量条件实验丈量条件实验吸收曲线的测绘：吸收曲线的测绘： 取上述规范系列中铁规范溶液用量为取上述规范系列中铁规范溶液用量为6.0 mL的显色溶液，在分光光度计上，的显色溶液

4、，在分光光度计上，从波长从波长440nm开场，以含铁规范溶液开场，以含铁规范溶液为为0.0 mL的试液为参比，每隔的试液为参比，每隔20nm测测定一次吸光度定一次吸光度A值。当临近最大吸收波值。当临近最大吸收波长附近时应每间隔长附近时应每间隔510nm测定一次测定一次A值。值。 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标制以波长为横坐标，吸光度为纵坐标制出吸收曲线，从吸收曲线上确定最大出吸收曲线，从吸收曲线上确定最大吸收波长吸收波长 max ).A4.铁含量的测定规范曲线的绘制：12345610 mg/ml铁规范溶液参比 2 ml 3 ml 4 ml 5 ml 6 ml 以不加铁规范以不加铁规范溶液的试液

5、为溶液的试液为参比液，上一参比液，上一步骤所选择的步骤所选择的最大吸收波长最大吸收波长为测定波长，为测定波长，依次测定规范依次测定规范系列中各溶液系列中各溶液的吸光度的吸光度A值。值。以铁的质量浓度为横坐标，以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制规范曲线。值为纵坐标，绘制规范曲线。5水样微量铁的测定水样微量铁的测定准确移取准确移取510mL以所测吸光度在规范曲线范围内为宜以所测吸光度在规范曲线范围内为宜未知试样溶液，按同样步骤和方法测定吸光度未知试样溶液，按同样步骤和方法测定吸光度A值。在规值。在规范曲线上查出所含铁的浓度，计算水样中铁的含量。范曲线上查出所含铁的浓度，计算水样中铁的含量。

6、 五、结果与数据处置1.吸收曲线的绘制：吸收曲线的绘制：将各波长及相应的吸光度将各波长及相应的吸光度列出，用坐标纸绘制吸收列出，用坐标纸绘制吸收曲线。吸光度最大时相应曲线。吸光度最大时相应的波长即为最大吸收波长，的波长即为最大吸收波长，并在图上标出。并在图上标出。A max v以铁含量为坐标，吸光度为纵坐标以铁含量为坐标，吸光度为纵坐标在坐标纸上绘制规范曲线；在坐标纸上绘制规范曲线；v由未知液的吸光度在规范曲线上查由未知液的吸光度在规范曲线上查出出5ml未知液中的铁含量；未知液中的铁含量；v计算每毫升未知液中含多少克铁。计算每毫升未知液中含多少克铁。SP-72型可见分光光度计型可见分光光度计S

7、P-72型分光光度计型分光光度计1仪器性能的检查仪器性能的检查 1接通电源，让仪器预热至少二非常钟，使仪器进入热稳定任接通电源，让仪器预热至少二非常钟，使仪器进入热稳定任务形状。务形状。2仪器接通电源后，即进入自检形状。显示器实时显示仪器的仪器接通电源后，即进入自检形状。显示器实时显示仪器的自检形状。当仪器发生缺点时，显示器会自动显示缺点位置。自检终自检形状。当仪器发生缺点时，显示器会自动显示缺点位置。自检终了，仪器自动寻觅光源最大能量，查找终了，仪器自动停留在了，仪器自动寻觅光源最大能量，查找终了，仪器自动停留在546nm处，并自动调处，并自动调100%T和和0%T。显示器上显示。显示器上显

8、示546nm和和“100.0%T。仪器此时进入测试形状。仪器此时进入测试形状。2运用方法运用方法 1按按“方式键方式键Mode将测试方式设置为吸光度方式。将测试方式设置为吸光度方式。 2按按“波长设置键设置想要的分析波长，如波长设置键设置想要的分析波长，如340nm。 3将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中。留意比色将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中。留意比色皿内的溶液面高度不应低于皿内的溶液面高度不应低于25毫米，大约毫米，大约2.5毫升；被测试的毫升；被测试的样品中不能有气泡和漂浮物。样品中不能有气泡和漂浮物。 4翻开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿翻开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。留意：普通情况下，参比样品放在样品槽中，盖上样品室盖。留意：普通情况下，参比样品放在样品架的第一个槽位中；仪器所附的比色皿，其透视率是经过测试架的第一个槽位中；仪器所附的比色皿，其透视率是经过测试匹配的，未经匹配处置的比色皿将影响样品的测试精度；比色匹配的，未经匹配处置的比色皿将影响样品的测试精度；比色皿的透光部分外表不能有指印和溶液痕迹。皿的透光部