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2、旺期、n、sHdddg&寸00.01tts2床旺、岂O.SHddd岳肄ffiSK-sKeSHddaTIOUnn800IBHe龍s将实验重复三次,求得清除率的平均值。2、总的抗氧化活性的测定总的抗氧化活性实验采用改良后的Prieto法。2.1实验原理:磷钼络合物测定方法的原理是Mo(VI)被抗氧化物质还原成绿色的Mo(V)络合物,其最大吸收波长为695nm。抗氧化物质活性越强,则定的吸光度值越大。此方法操作简单,所用试剂低廉、方法重现性好,非常适合抗氧化性的测定。2.2溶液的配制样品液:同上磷钼试剂:0.6mol/L浓硫酸溶液、28mmol/L磷酸钠溶液和4mmol/L钼酸胺溶液混匀,即得。2.
3、3实验步骤分别取不同浓度的各样品溶液(0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml)1.0ml置10ml离心管中,加入3.0ml试剂溶液(试剂溶液中包括0.6mol/L的硫酸、28mmol/L的磷酸钠、4mmol/L的钼酸铵)。混合液于95工水浴锅中分别水浴30min,60min、90min、120min、150min。放冷至室温,695nm处测吸光度值。以蒸馏水为空白,吸光度值越大,表明抗氧化能力越强。BHT做为阳性对照。将实验重复三次,求平均值。3.1 实验原理以普鲁士蓝Fe4(Fe(CN)6)3之生成量作为指标,将六氰合铁酸钾K3Fe(CN)6还原成K4Fe(CN)6,再利
4、用Fe3+形成Fe4(Fe(CN)6)3,由700nm处吸光值变化检测还原力大小。吸光值愈高表示样品的还原力也就越强。3.2 溶液的配制3.2.1样品的配制:用乙醇配制浓度分别为0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml各样品溶液,浓度分别为0.06,0.12,0.18,0.24,0.30mg/mlBHT溶液,Vc溶液。3.2.2 0.2mol/LPBS,PH=6.6:A溶液:0.2mol/LNa2HPO4溶液:称Na2HPO4.2H2O35.63g,定容至1000mL;B溶液:0.2mol/LNaH2PO4溶液:称NaH2PO4.2H2O31.21g,定容至1000mL;取A溶液37.5mL加B溶液62.5mL,即为pH=6.6的0.2mol/LPBS。3.3实验步骤不同浓度的各样品溶液(0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml)1.Oml加入0.2moL/L的磷酸盐缓冲液(pH=6.6)2.5mL和1%的铁氰化钾溶液2.5mL猖混合物于50C水浴保温20分钟,然后加入2.5ml10%(w/v)三氯乙酸溶液,混合溶液3000rpm离心10min,精密吸取上清液2.5ml,加入2
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