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文档简介
1、 目的:掌握免疫透射比浊的原理、基本操目的:掌握免疫透射比浊的原理、基本操作方法及其在临床上的应用。作方法及其在临床上的应用。抗原浓度与浊度的关系:抗原浓度与浊度的关系:A A0Cc0试剂与器材试剂与器材 1.待检人血清待检人血清 2.人人IgG标准液(标准液( 6g/L 、12g/L、20g/L、30g/L) 3.羊抗人羊抗人IgG诊断血清诊断血清 4.缓冲液缓冲液(含含PEG) 5.加样器、试管、水浴箱、分光光度计等加样器、试管、水浴箱、分光光度计等操作方法操作方法 1.生理盐水稀释待测样本和标准液(生理盐水稀释待测样本和标准液(1:10)?)? 2.按下表操作按下表操作加入物加入物空白管
2、空白管(l)标准管标准管(l)样品管样品管(l)缓冲液缓冲液225022502250生理盐水生理盐水30标准品(稀释后?)标准品(稀释后?)30待测样本待测样本(稀释后?)(稀释后?)30混匀,混匀,375min,600nm,空白管调零,读取各管吸空白管调零,读取各管吸光度值光度值A1抗抗IgG750750750混匀,混匀,37孵育孵育5min后后,在波长为在波长为600nm处测定处测定,以以空白管调零,读取各管吸光度值空白管调零,读取各管吸光度值A2,A=AA=A2 2-A-A1 1结果计算结果计算 以标准品各管的以标准品各管的A A为横坐标,以对应标准为横坐标,以对应标准品浓度为纵坐标,绘制标准曲线。依据样品浓度为纵坐标,绘制标准曲线。依据样品管的品管的A A在标准曲线上查出待测浓度。在标准曲线上查出待测浓度。注意事项注意事项 1.待检血清无溶血,稀释时必须准确。待检血清无溶血,稀释时必须准确。 2.检测时反应体系保持抗体过量。检测时反应体系保持抗体过量。 3.当当IgG浓度超过浓度超过30g/L时,应将样品用生理时,应将样品用生理盐水稀释后再测定,测得的结果乘以稀释盐水稀释后再测定,测得的结果乘以稀释倍数。倍数。 4.检测用抗体应亲和力高,特异性好检测用抗体应亲和力高,特异性好,R型抗型抗体。体。 5.试剂中
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