第五节-血栓与止血一般检验课件

1、第五节-血栓与止血一般检验第一章 血液学一般(ybn)检验第五节 血栓与止血(zh xu)一般检验第一页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验第五节 血栓与止血(zh xu)一般检验内内 容容 概述概述 一、出血时间测定一、出血时间测定 二、凝血酶原时间测定二、凝血酶原时间测定 三、血浆活化部分凝血活酶时间三、血浆活化部分凝血活酶时间 四、血浆凝血酶时间四、血浆凝血酶时间 五、血浆纤维蛋白原测定五、血浆纤维蛋白原测定 六、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定六、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定 七、血浆七、血浆D-二聚体测定二聚体测定 八、八、出凝血检查出凝血检查(jinch)的临床应用的临床应用第

2、二页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验概述(i sh)凝血机制凝血机制(jzh)(jzh)第三页，共四十九页。4第五节-血栓与止血一般检验概述(i sh)凝血与纤溶的关系凝血与纤溶的关系(gun x)(gun x)第四页，共四十九页。2022-5-20第五节-血栓与止血一般检验概述(i sh)出凝血障碍出凝血障碍(zhng i)的因素的因素第五页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验定义(dngy) 出血(ch xi)时间（bleeding time，BT）是指在特定条件下，皮肤小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的时间称为出血时间。一、出血(ch xi)时间测定第六页，共四十九页。

3、第五节-血栓与止血一般检验（一）（一）TBT法法 1TBT （template bleeding time ） 原理 使用出血时间测定器在受检者前臂皮肤上造成一个标准切口，记录血液自行流出到自然(zrn)停止所需要的时间，即为出血时间（BT）。 2主要器材 血压计、出血时间测定器、秒表。 3简要操作 加压 消毒皮肤造成切口计时。一、出血时间(shjin)测定第七页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 1减少药物的影响 检测前1周内不能服用抗血小板药物（如阿司匹林等），以免影响结果。 2选择合适的测定器 不同年龄应该选择不同类型的出血时间测定器。新生儿型：切口(q

4、i ku)为0.5mm2.5 mm。儿童型：切口为1.0mm3.5 mm。成人型：切口为1.0mm5.0 mm。一、出血时间(shjin)测定第八页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 3注意温度的影响 应在25左右的室内进行，以保证穿刺部位温度恒定。 4选择正确穿刺部位 穿刺时应避开浅表静脉、疤痕、水肿和溃疡等处皮肤。 5避免接触和挤压伤口(shngku) 血液应自行流出，采用滤纸吸去流出的血液时，应避免与伤口接触，更不能挤压伤口。一、出血时间(shjin)测定第九页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（三）方法学评价（三）方法学评价(pngji)方法方法

5、评价评价TBT法使用标准的出血时间测定器，能够使皮肤切口的深度、长度相对恒定，重复性好、灵敏度高，是目前推荐的方法Ivy法传统方法，虽然在上臂施加了固定的压力，但因直接使用刺血刀作皮肤切口，切口深度和长度仍未能达到标准化，灵敏度较差，已趋向淘汰Duke法 传统方法，操作简单，但穿刺深度、长度难以标准化，灵敏度差，已淘汰一、出血时间(shjin)测定第十页，共四十九页。11第五节-血栓与止血一般检验参考参考(cnko)区间及临床意义区间及临床意义（四）参考区间（四）参考区间TBT：（6.92.1）分钟。（五）临床意义（五）临床意义1BT延长(ynchng)主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。见

6、于：血小板数量异常，如血小板减少症、原发性血小板增多症。血小板功能缺陷，如血小板无力症、巨大血小板综合征。某些凝血因子缺乏，如血管性血友病（vWD）、低（无）纤维蛋白原血症和DIC。2BT缩短主要见于某些严重的血栓性疾病。一、出血(ch xi)时间测定第十一页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验定义定义(dngy) 凝血酶原时间（prothrombin time， PT）是在体外模拟体内外源性凝血的全部条件，从加入组织因子(ynz)开始到血浆凝固所需要的时间测。 PT是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十二页，共四十九页。2022-5-

7、20第五节-血栓与止血一般检验PT原理原理(yunl)第十三页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理原理 采用Quick一步凝固法。37条件下，在待检血浆中加入足量的组织凝血活酶（含组织因子、磷脂）和适量的钙离子(lz)，通过激活因子而启动外源性凝血途径，使乏血小板血浆凝固。从加钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为凝血酶原时间。 2简要操作简要操作 采血并分离血浆加血浆与凝血活酶试剂（12）混匀并立即计时倾斜试管，观察结果。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十四页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证1病人准备

8、停用影响(yngxing)止凝血功能的药物至少1周。2采血 要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血，止血带使用时间不超过1分钟，采血要顺利，加血液至抗凝管后，应立即轻轻地颠倒混匀58次，避免标本溶血和凝固。创伤性或留置导管的血标本、溶血或凝块形成的标本、输液时同侧采集的标本均不宜做PT等止凝血试验。3标本运送 及时送检，因为血液离体后，凝血因子逐渐消耗，随着标本存放时间延长，消耗加快。4标本离心 按规定离心力与离心时间要求，及时分离标本，获得乏血小板血浆。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十五页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证5组织凝血活酶（thro

9、mboplastin）的质量 必须使用标有国际敏感指数（international sensitivity index，ISI）的PT试剂。6ISI和国际标准化比值（international normalization ratio，INR） ISI值越接近1.0，表示灵敏度越高。ISI为组织凝血活酶参考品与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率，即在双对数的坐标纸上，纵坐标为用参考品测定的PT对数值，横坐标为用待标定的组织凝血活酶测定的相同(xin tn)标本PT对数值INR计算公式为：INR（病人PT值/正常人平均PT值）ISIWHO等国际权威机构要求，每次（每批）PT测定的正常对照值，必须用

10、至少来自20名以上男女各半的正常人混合血浆所测定的结果。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十六页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 7测定 试剂、标本温浴时间应控制在310分钟内，测定温度应控制在（371），准确判断血浆凝固终点（纤维蛋白形成）是PT测定结果准确性的关键。 8结果审核与复查 结果审核应该结合标本质量和临床诊断等作出综合(zngh)判断，才能发出正确的检验报告。重视异常结果的复查，必要时重新采集标本进行复查，并加强与临床沟通，及时掌握反馈信息，持续改进检验质量。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十七页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检

11、验（三）报告（三）报告(bogo)方式方式报告方式报告方式评价评价PT（秒）必须使用的方式，因为试剂不同，其结果差异大，但要同时报告正常对照值INR当口服抗凝剂病人治疗监测时，必须使用的报告方式PTRPTR被检血浆PT/正常对照血浆PT，现已少用PTA为被检血浆相当于正常对照血浆凝固活性的百分率，可用于评估肝受损程度二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十八页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（四）方法学评价（四）方法学评价(pngji)方法方法评价评价手工测定法重复性差，耗时；但操作简单，不需特殊仪器，准确性好，为仪器校准的参考方法仪器法操作简便、快速，结果重复性好；目前常采用光学法和

12、磁珠法。磁珠法的检测结果不受黄疸、乳糜、溶血标本的干扰，但反应杯中需要加入磁珠，成本高二、血浆(xujing)凝血酶原时间第十九页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验参考参考(cnko)区间及临床意义区间及临床意义（五）参考区间（五）参考区间每个实验室必须建立相应的参考区间。PT：成人1113秒，超过正常对照值3秒为异常(ychng)。INR：依ISI不同而异。PTR：成人0.851.15。PTA：70130。（六）临床意义（六）临床意义1PT延长 先天性凝血因子、缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症。获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏症（影响凝血因子、合成）、原发纤溶亢进症、DIC等

13、。血循环中存在抗凝物质，如口服抗凝剂等。2PT缩短 先天性凝血因子增多症。高凝状态和血栓性疾病。药物，如长期服用避孕药等。二、血浆(xujing)凝血酶原时间第二十页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验定义定义(dngy) 活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）是在体外模拟体内内源性凝血的全部(qunb)条件，测定血浆凝固所需的时间。 APTT反映内源性凝血因子是否异常和血液中是否存在抗凝血物质，是常用而且比较灵敏的内源性凝血系统的筛检指标之一。三、血浆活化(huhu)部分凝血活酶时间第二十一页，共四十九页。第五节-血栓

14、与止血一般检验APTT原理原理(yunl)第二十二页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理原理 在37条件下，于待检血浆中加入足量的接触因子激活剂（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），在Ca2+参与下，通过激活因子而启动内源性凝血途径，观察血浆凝固所需的时间。 2简要操作简要操作(cozu) 采血并分离血浆加血浆与APTT试剂（11）温育活化3分钟加氯化钙混匀并立即计时倾斜试管观察结果。三、血浆活化部分(b fen)凝血活酶时间第二十三页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 1标本 采血后应尽快测定。 2

15、APTT试剂 是激活剂和部分凝血活酶的混合物。 3激活时间 血浆加入APTT试剂后被激活的时间要保证为3分钟。时间过短，APTT延长。 4其它 与PT试验相同，如采血顺利、抗凝剂的种类(zhngli)及比例等。三、血浆(xujing)活化部分凝血活酶时间第二十四页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验 （三）方法学评价（三）方法学评价 与PT试验相同。 （四）参考区间（四）参考区间 2535秒，超过正常对照值10秒为异常。 （五）临床意义（五）临床意义1APTT延长 因子、水平降低的血友病甲、乙，因子缺乏症，部分血管性血友病。严重(ynzhng)的因子、缺乏，如严重肝脏疾病、维生素K缺乏症等

16、。原发性或继发性纤溶亢进。口服抗凝剂、应用肝素等。血液循环中存在病理性抗凝物质，如抗因子或抗体、狼疮样抗凝物等。2APTT缩短 高凝状态和血栓性疾病，如DIC高凝期、心肌梗死、深静脉血栓形成等。三、血浆(xujing)活化部分凝血活酶时间第二十五页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验概述概述(i sh) 凝血酶时间（thrombin time，TT）是从加入凝凝血酶血酶开始至血浆中纤维蛋白原（纤维蛋白原（Fg）转变为纤维纤维蛋白（蛋白（Fb）所需的时间。 TT延长主要(zhyo)反映Fg浓度减少或功能异常以及血液中存在相关的抗凝物质（肝素、类肝素等）。四、血浆(xujing)凝血酶时间第二

17、十六页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验TT原理原理(yunl)第二十七页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理 37条件下，在待检血浆中加入“标准化”凝血酶后，直接将血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白，使乏血小板血浆凝固，其凝固时间即为TT。 2简要操作 采血并分离血浆加血浆与凝血酶试剂（11）混匀并立即计时倾斜试管(shgun)观察结果。四、血浆(xujing)凝血酶时间第二十八页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验 （二）质量保证（二）质量保证 与PT试验相同。 （三）方法学评价（三）方法学评价 与PT试验相同。 （四）参考区间（四）

18、参考区间 1618秒，超过正常对照值3秒为异常。由于试剂中凝血酶浓度不同，其检测(jin c)结果存在差异。因此，每个实验室必须建立相应的参考区间。四、血浆(xujing)凝血酶时间第二十九页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验 1TT延长低（无）纤维蛋白原血症和异常纤维蛋白原血症，其中(qzhng)更多见于获得性低纤维蛋白原血症。肝素或类肝素抗凝物质，如肝素治疗、肿瘤和SLE等。原发性或继发性纤溶亢进时（如DIC），由于FDP增多对凝血酶有抑制作用，可导致TT延长。 2TT缩短 一般无临床意义。四、血浆(xujing)凝血酶时间（五）临床意义（五）临床意义第三十页，共四十九页。第五节-血

19、栓与止血一般检验概述概述(i sh) 纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）是由肝脏合成，是血浆浓度最高的凝血因子。Fg浓度或功能异常(ychng)均可导致凝血障碍。 Fg是出血性疾病与血栓性疾病诊治中常用的筛检指标之一。 常用的方法有Clauss法、PT衍生法等。五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定第三十一页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验Fg原理原理(yunl)第三十二页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（一）（一）Clauss法法 1原理 在待检稀释的血浆中加入(jir)足量的凝血酶，使血浆中的Fg转变成纤维蛋白，血浆凝固，其血浆凝固时间与Fg含量呈负相关；以Fg含量一

20、定的国际标准品为参比血浆，测定其对应的凝固时间，制作标准曲线；通过标准曲线，可以得到待检血浆中Fg含量。 2简要操作 采血并分离血浆溶解Fg试剂及参比血浆制备标准曲线检测待检血浆报告结果。五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定第三十三页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 1保证结果的可靠性和准确性 Fg参比血浆必须与待检血浆平行测定，以保证测定结果的可靠性。当Clauss法测定结果超出其检测线性时，必须改变稀释度，并重新测定，才能(cinng)保证其结果的准确性。如Fg5.00g/L时，可将原来设定的稀释度1 10改变为1 20的稀释血浆进行检测，结果乘以2。

21、五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定第三十四页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（二）质量保证（二）质量保证 2注意异常结果的复查 当标本中存在异常纤维蛋白原、纤维蛋白（原）降解产物（FDP）、肝素和类肝素抗凝物质时，Clauss法测定的Fg浓度可假性减低(jind)或测不出，此时，需用其他方法（如PT衍生法）复查。PT衍生法检测结果可疑时（如结果过高或过低），则采用Clauss法复查。五、血浆纤维蛋白(xin wi dn bi)原测定第三十五页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验（三）方法学评价（三）方法学评价(pngji)五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定第三十六页，共四十

22、九页。第五节-血栓与止血一般检验（四）参考区间（四）参考区间(q jin)成人：2.004.00g/L；新生儿：1.253.00g/L。（五）临床意义（五）临床意义1Fg增高 Fg是一种急性时相反应蛋白，其增高往往是机体一种非特异性反应。感染：毒血症、肺炎、亚急性细菌性心内膜炎等。无菌性炎症：肾病综合征、风湿热、风湿性关节炎等。血栓前状态与血栓性疾病：糖尿病、急性心肌梗死等。恶性肿瘤。外伤、烧伤、外科手术后、放射治疗后。其他：妊娠晚期、妊娠高血压综合征等。2Fg减低 原发性纤维蛋白原减少或结构异常：低或无纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症。继发性纤维蛋白原减少：DIC晚期、纤溶亢进、重症肝炎和

23、肝硬化等。五、血浆纤维蛋白(xin wi dn bi)原测定第三十七页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验 纤维蛋白原、可溶性纤维蛋白、纤维蛋白多聚体、交联纤维蛋白均可被纤溶酶降解，生成纤维蛋白（原）降解产物(chnw)（FDP）。 血液中FDP增高是体内纤溶亢进的标志，但不能鉴别原发性纤溶亢进与继发性纤溶亢进。 FDP中X、Y、D和E等片段具有纤维蛋白原的抗原决定簇，用其免疫动物可获得抗FDP抗体。因此，通过免疫学方法可检测血浆FDP浓度。六、血浆纤维蛋白(xin wi dn bi)（原）降解产物测定概述概述(i sh)第三十八页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验 FDP测定方法有

24、胶乳凝集试验、酶联免疫吸附（ELISA）法与免疫比浊法。胶乳凝集试验是定性试验，免疫比浊法使用(shyng)血凝仪进行定量测定。由于各厂家选用的抗FDP抗体可能存在质量的不同，导致其定量测定结果存在差异，因此，每个实验室必须建立相应的参考区间。六、血浆纤维蛋白（原）降解(jin ji)产物测定（一）测定方法（一）测定方法第三十九页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验六、血浆纤维蛋白(xin wi dn bi)（原）降解产物测定（二）方法学评价（二）方法学评价(pngji)第四十页，共四十九页。2022-5-20第五节-血栓与止血一般检验 （三）参考区间（三）参考区间 阴性（5mg/L）。

25、（四）临床意义（四）临床意义 FDP阳性或增高见于(jiny)原发性纤溶亢进或继发性纤溶亢进，如DIC、肺栓塞、深静脉血栓形成、恶性肿瘤、肝脏疾病、器官移植排斥反应和溶栓治疗等。六、血浆(xujing)纤维蛋白（原）降解产物测定第四十一页，共四十九页。第五节-血栓与止血一般检验概述概述(i sh) D-二聚体（D-dimer，D-D）是交联纤维蛋白的降解产物之一。 因为继发性纤溶中纤溶酶的主要作用(zuyng)底物是纤维蛋白，生成特异性FDP即为D-D，所以D-D是继发性纤溶特有代谢产物。 现多用D-D抗体应用免疫学方法检测血浆D-D浓度。七、血浆(xujing)D-二聚体测定第四十二页，共四十九页。2022-5-20第五节-血栓与止血一般检验 （二）方法学评价（二）方法学评价 与FDP测定相同。 （三）参考（三）参考(cnko)区间区间 阴性（250g/L）。七、血浆(xujing)D-二聚体测定第四十三页，共四十九页。2022-5-20第五节