香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成的影响ppt课件

1、香榧子油对实验性动脉粥样硬化构成的影响设计者和执行者：陈超 陈小羽 江泽红 刁燕 杜圣富 孙永珍香榧子油简介n榧子为红豆杉科Taxaceae植物榧树To肼eyagrand括ForteX Lindl的枯燥成熟种子，始载于，历版中国药典均收载，具有杀虫、消积、润肠、通便之效果。其栽培种类香榧To用eya grandis CVmerriUii是我国特有经济树种之一。其种子俗称香榧子，为我国珍贵的干果，炒熟后香酥甘醇，风味独特，质量甚佳，营养丰富香榧子油的药理作用香榧子油香榧子油 。降血脂和降低血清胆固醇作用调理老化的内分泌系统的疗效软化血管，促进血液循环但未见有关香榧子油对预但未见有关香榧子油对预防

2、动脉粥样硬化构成的实防动脉粥样硬化构成的实验研讨报道验研讨报道动脉粥样硬化的发病机制动脉粥样硬化的发病机制1.脂质的作用：高胆固醇血症引起内皮功能脂质的作用：高胆固醇血症引起内皮功能妨碍，妨碍， 通透性添加通透性添加2.内皮损伤：各种要素对动脉内皮的损伤，内皮损伤：各种要素对动脉内皮的损伤，导致动脉壁的慢性炎症应对，逐渐构成粥导致动脉壁的慢性炎症应对，逐渐构成粥样斑块，是动脉粥样硬化的始动要素样斑块，是动脉粥样硬化的始动要素 3.巨噬细胞和平滑肌细胞的作用巨噬细胞和平滑肌细胞的作用主要内容：实验目的实验目的实验设计实验设计 预测结果预测结果 4123实验假设实验假设实验目的：实验目的：n从血脂

3、从血脂,斑块面积内膜面积、内膜厚度、内斑块面积内膜面积、内膜厚度、内膜厚度中膜厚度膜厚度中膜厚度,巨噬细胞和平滑肌源性泡巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞等方面研讨香榧子油对实验性动脉粥沫细胞等方面研讨香榧子油对实验性动脉粥样硬化构成的影响样硬化构成的影响. 研讨方面：研讨方面：研讨香榧子油对研讨香榧子油对实验性动脉粥样硬化实验性动脉粥样硬化构成的影响构成的影响脂质脂质斑块面积内膜面积斑块面积内膜面积、内膜厚度、内膜厚度、内膜厚度中膜厚度内膜厚度中膜厚度巨噬细胞和巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞平滑肌源性泡沫细胞实验假设：n香榧子油对实验性动脉粥样硬化构成能够有预防作用 实验仪器实验仪器 实验试剂实验试

4、剂 实验方法实验方法及步骤及步骤 实验对象实验对象 M1M2M4M3实验设计:1实验仪器:n电子称，试管，离心管，冰箱，手术器材，一次性塑料注射器，图像分析仪n岛津UV3000型紫外分光光度计，刖一182放射免疫卜计数仪。2实验试剂：n根底饲料小麦粉根底饲料小麦粉392、玉米粉、玉米粉151、大、大米米105、豆粕、豆粕151、鱼粉、鱼粉151、酵母、酵母粉，粉，38、鱼肝油、鱼肝油07及精盐及精盐05,高高脂饲料脂饲料(根底饲料根底饲料825、胆固醇、胆固醇20、胆酸、胆酸钠钠05、蛋黄粉、蛋黄粉50及猪油及猪油10),香榧子油香榧子油饲料饲料(在高脂饲料的根底上添加香榧子油在高脂饲料的根底

5、上添加香榧子油(自提自提)，其量占饲料的其量占饲料的2)。生理盐水、蒸馏水、乙醚。生理盐水、蒸馏水、乙醚。苏丹苏丹染液，苏木素依红染液，苏木素依红(HE)、间苯二酚品红染、间苯二酚品红染色色(ET+VG),2戊二醛溶液戊二醛溶液,P0wervision一一Pv6002试剂盒试剂盒3实验对象：n30只安康家兔4实验方法和步骤：1.计算斑块面积内膜面积比计算斑块面积内膜面积比2.计算内膜厚度中膜厚度比计算内膜厚度中膜厚度比3.计算巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞阳性百分数计算巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞阳性百分数采用采用SPSS80统计软件进展数据统计软件进展数据的分析处置的分析处置 1.动物按体重随

6、机分动物按体重随机分3组组2.建立高胆同醇饮食并免疫损伤诱建立高胆同醇饮食并免疫损伤诱导动脉粥样硬化模型导动脉粥样硬化模型 实验分组与模型建立实验分组与模型建立n1.动物按体重随机分3组，即正常对照组(根底饲料组)、高脂对照组和香榧子油实验组，每组10只动物。2. 模型组和香榧子油组建立高胆同醇饮食并免疫损伤诱导动脉粥样硬化模型2高胆固醇饲料每只每日100克喂养，两周后静脉注射牛血洁白蛋白250 mgkg(以生理盐水制成10溶液注射)每周1次，共3次；正常组注射等量生理盐水，每周1次，共3次。同时香榧子油组予灌胃法给药香榧子油4 rag(kgd)，相当于75 mgd的l临床剂量，共12周，正常

7、组和模型组灌等量蒸馏水。每周丈量体重。实验步骤：1.在实验分组与模型建立根底上第4、8、12周时取尾血，取血前12小时禁食。2.第12周末取尾血后，乙醚麻醉，剖开胸腔心脏取血。3.所取尾血置于干净试管中后，2500 rmin离心5 min，取血清分装于34支15ml塑料尖底离心管中于0.30度冰箱保管，用酶学法测血清TC胆固醇、TG甘油三酯及HLD-C高密度脂蛋白胆固醇。4.处死动物，取自动脉剥离外膜脂肪组织，纵行剖开置于4多聚甲醛中保管。大体标奉行苏丹染色后摄像图像分析仪测定斑块面积和内膜面积，计算斑块面积内膜面积比。n5.于胸自动脉上段(第4肋问动脉处)和腹自动脉上段(腹腔动脉处)各取材5

8、 mm，常规石蜡包埋，延续切片，制成4 m厚横截面切片，分别行苏木素依红(HE)、间苯二酚品红染色(ET+VG)染色。将动脉等距分成5点(包括内膜最厚处)，利用图像分析仪丈量内膜厚度、中膜厚度，计算内膜厚度中膜厚度，最后将两段组织的目的加以平均。每组取2例动物胸自动脉上段组织放人2戊二醛溶液中固定，扫描和透射电镜察看超微构造改动。n6.另取4m厚胸自动脉上段组织(第4肋间动脉处)横截面切片用小鼠抗兔一巨噬细胞单克隆抗体RAM 1 1和小鼠平滑肌细胞单克隆抗体-aelin进展常规免疫组织化学染色，特异性鉴定巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞，采用P0wervision一Pv6002试剂盒，以EnVis

9、ion复合物为二抗，设替代对照(PBS替代一抗)，胞浆内棕黄色颗粒状产物为阳性标志。采用显微一微机图像分析系统计算阳性细胞百分数。用酶学法测血清TC、TG及HLD-C，计算AI香榧子油组的血清香榧子油组的血清TC、TG及及AI比正常组高，比模比正常组高，比模型组低；血清型组低；血清HDL-C比正比正常组低，比模型组高常组低，比模型组高香榧子油对斑块面积内香榧子油对斑块面积内膜面积、内膜厚度、内膜膜面积、内膜厚度、内膜厚度中膜厚度都比正常厚度中膜厚度都比正常组大，比模型组小组大，比模型组小香榧子油组斑块中巨噬细胞香榧子油组斑块中巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞含量和平滑肌源性泡沫细胞含量比正常组大，

10、比模型组小比正常组大，比模型组小丈量内膜厚度、中膜厚度，计算内膜厚度中膜厚度计算斑块中巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞阳性细胞百分数丈量结果丈量结果预测结果预测结果统计学分析数据：n采用SPSS80统计软件进展数据的分析处置，一切数据均用均数规范差表示，多组间比较用方差分析，两组间比较用检验，P005为差别有显著性。 四、预测结果:香榧子油对大香榧子油对大鼠鼠TC、TG和和HLD-C的影响的影响 香榧子油对斑块面积香榧子油对斑块面积内膜面积、内膜厚内膜面积、内膜厚度、内膜厚度中膜度、内膜厚度中膜厚度的影响厚度的影响 香榧子油对斑块香榧子油对斑块部位免疫组化结部位免疫组化结果的影响果的影响 香榧子油

11、对实验性动脉粥样硬化构成有预防香榧子油对实验性动脉粥样硬化构成有预防作用作用预期结果预期结果五、参考文献n1.陈振德等榧属植物的研讨进展国外医药植物学分册，2019，11(4)：150n2.韩琴琴等运用国产酶试剂测定血清胆固醇的方法上海第一医学院学报，1984，11：181n3.张蚰美,魏欣冰动脉粥样硬化模型的病理形状学察看 2019n4.蔡海江,朱敏天,李子行免疫性损伤对家兔实验性动脉粥样硬化的影响 1979n6 .Tsukada T，Rosenfeld M，Ross R，etal. Immunocytochemical analysis of cellular components in athemsclerotie lesions：use of monoelonal anlIbodies with the Watanabe and fatfed rabbit Arteriosclerosis，19866：601613n7. Fukumoto Y，Libby P，llabkin E、et m Stabns alt