细胞重组与克隆技术ppt课件

1、细胞重组与克隆技术细胞拆合：把完好细胞的细胞核与细胞质用特殊的方法别分开来，或把细胞核从细胞质中汲取出来，或用紫外线等把细胞中的核杀死，然后再把同种或异种的细胞核和细胞质重新组合起来，培育新的细胞或新的生物个体。 细胞重组：细胞交融技术与细胞核质分别技术结合，在交融介质作用下，使胞质体与完好细胞合并，重新构成胞质杂种细胞的过程。 8.1细胞重组8.11胞质杂种 8.12微细胞核移植 8.13核移植 8.14细胞重建8.11胞质杂种胞质体cytoplast：除去细胞核后由膜包裹的无核细胞，由细胞松弛素B处置后，经离心得到。 1972年，Prescott借助细胞松弛素的和高速离心得到 核体kary

2、oplast：由胞质体分别出来的核，带有少量胞质并围有质膜的构造。 胞质杂种细胞：将胞质体和另一完好细胞交融得到的细胞。 杂种细胞：核体与完好细胞交融。 重组细胞：核体与另一种细胞的胞质体交融。利用细胞交融技术得到的重组细胞1、2、3亲本细胞 4、6核体 5、7胞质体 8、9杂种细胞 10重组细胞 11胞质杂种细胞 PEG介导 HAT培育基挑选 鉴别与意义利用双重标志法鉴别杂种细胞的真伪，可以采用两个具有不同缺陷型的细胞作标志，或用3H胸腺嘧啶核苷作核标志，并使其吞入不同颗粒的乳胶作为胞质标志，或者用3H亮氨酸等标志氨基酸作为胞质标志，也可用红绿荧光的聚乙烯颗粒标志重组细胞。 意义：胞质杂种细

3、胞是不同种系之间的一种真正的新型细胞，在适宜的条件下能胜利的生存下去，它在物种的种类改良、医学及农业的各个方面将产生艰苦的影响。8.12微细胞核移植 微细胞：只需一条或几条染色体和一薄层细胞质，外面包裹一层完好的细胞质膜的核质体。利用秋水仙素先将细胞阻断在染色体中期，然后培育，再用细胞松弛素B处置得到。 以微细胞作供体，经过与遗传性完好的受体细胞交融，可以将微细胞内所含有的几条染色体转移到受体细胞中去。微细胞杂种细胞的制造过程 8.13细胞核移植核移植起始于用微吸管对阿米巴等原生动物进展的核操作。 在1952年，美国人罗伯特布里格斯和TJ金，首先利用两栖类卵细胞建立细胞核移植技术。由于两栖类的

4、蛙卵数量较多，体积较大，容易获得，操作方便。 19581962年，英国剑桥大学的约翰格登教授和麦金尼尔利用瓜蟾原肠内胚层细胞核移植，培育出可育的非洲瓜蟾。非洲爪蟾制造我国的研讨中国的细胞核移植技术任务，开场于本世纪50年代，主要是在两栖类和鱼类上进展的， 从1961年开场，童第周等以金鱼和鳑鲏鱼为资料，进展鱼类不同亚科间的细胞核移植获得胜利，用以研讨杂交细胞核于纯种细胞核在发育功能上的差别，以及细胞质对细胞核的影响。 1978年，将黑斑蛙成体红细胞的细胞核移入去核的未受精卵内，卵子最后发育成正常的蝌蚪。哺乳动物核移植，哺乳类的移核实验必需在一种很精细的仪器显微操作仪下才干进展。 最早用来做移核

5、实验的哺乳动物是小鼠。 1977年，美国缅因州巴尔港的杰克逊实验室用“亚无性繁衍的方式，培育出7只单亲小鼠。 1981年1月，美国杂志封面刊登3只小鼠的照片，他们将囊胚内细胞团细胞的核移入去核的受精卵中，经培育移核卵发育至囊胚期，再将胚胎植入同步孕鼠的子宫内，最后产下两雌一雄仔鼠，并发育成了可育的个体。核移植小鼠 克隆克隆clone是指遗传上完全一样的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁衍群体，也指经过克隆方式消费克隆群体的过程或手段。 从实际上讲，任何一个具有核的细胞都含有其生物体基因组的全部基因，因此都可以克隆。多莉的诞生 克隆步骤上 克隆步骤下 克隆动物胜利与否的关键性问题首先是核

6、移植过程中要分别得到供体细胞和作为受体细胞的卵细胞 。 其次要取处在适当发育阶段及细胞周期的受体和供体细胞，受体细胞和供体细胞处于细胞周期中的同一时期 ，核移植胜利的几率最大。 受体细胞在细胞周期中所处的时间对转核实验胜利与否的影响要大于供体细胞所处的时间的影响，普通取G2期进展核移植的效果都较好。另外，细胞诱导分裂成熟的因子MPF的活性有关。克隆的伦理克隆羊的诞生也从实际上，阐明了人类可以本身进展无性繁衍的能够性。假设克隆技术运用于人类，必将对人类社会的根本组织单位家庭产生很大的冲击，同时也一定会直接要挟人类社会现有的法律、伦理和品德。多个国家政府曾经明确宣布政府科研基金决不会支持任何将克隆技术运用于人类的研讨。8.14细胞重建细胞重建的概念是我国贝时璋院士提出的。 定义：体内曾经存在的某种物质，可以由细胞质，甚至细胞外的某种基质为基地，经过自组织、自装配过程，一步步地构成完好的细胞。 早在20世纪30年代，贝教授在一种甲壳类动物南京丰年虫的二倍体雌虫卵母