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文档简介
1、采供血机构任务人员远程二类上岗培训张俊玲.第二册 传染病和传染性病原体一 、传染性病原体 二、免疫学根底三、 HIV 四、 HIV挑选实验原理五、 HIV抗体的筛检方法的选择六、抗HIV抗体筛检实验的运用七、质量保证八、其它传染性病原体.一 传染性病原体 病毒、细菌、原虫、真菌,只需前三种可经血传播,但最常见的经血传播的病原体是病毒。 .病毒:由核酸、核衣壳、包膜组成;但朊病毒不含核酸、仅由蛋白质组成、此病毒侵袭神经系统和脑组织。病毒蛋白质存在于病毒包膜和核衣壳上,可被机体免疫应对来识别。.细菌:原核生物-具有明晰的细胞 构造、但缺乏真正的细胞核。许多细菌包被有荚膜,能直接引起免疫应对。 .原
2、虫:属真核生物、是单细胞有机体、大多数原虫生活在水里、仅少数寄生在其它动物的身上。真核生物-有真正的细胞核核膜、核仁。.真菌:不同与细菌、大多数真菌能分解有 机物和废物、只需少数种类的真菌可引起人类疾病。真菌分霉菌型和酵母型酵母菌和类酵母菌酵母型以单细胞方式经过出芽的方式生长。霉菌可构成菌丝体,酵母菌不构成菌丝体。.近年,一种新的传染性病原体朊病毒被证明存在。朊病毒是独一不含任何核苷酸,仅由蛋白质组成的病原体。.经血传播的传染性病原体的传播传染性病原体能否可经血传播取决于以下三个条件;1. 病原体必需可以随血进入宿主或患者体内。2. 被感染的献血者没有任何病症。3. 病原体在血液中能存活一段时
3、间。.具备三个条件能否真的发生还取决于多种要素,如患者的免疫形状和输入的传染性病原体的数量。输血是传播传染性病原体的主要途径但不是首要途径。.二、免疫学根底1、 免疫系统的组成; 免疫器官,免疫组织,免疫细胞,免疫分子组成。.免疫器官:中枢免疫器官骨髓、胸腺、是免疫活性细胞的产生、增殖和分化的场所 周围免疫器官脾、淋巴结、何粘膜相关淋巴组织、是免疫细胞和应对的场所。.免疫细胞: 1 .T淋巴细胞 2. B淋巴细胞 3. 第三类淋巴细胞 4. 辅助细胞.T淋巴细胞:辅助T淋巴细胞Th:CD4 分Th1和Th2 细胞毒淋巴细胞Tc:CD8. 2. B淋巴细胞:是产生抗体的细胞 3. 第三类淋巴细胞
4、大颗粒淋巴细胞:NKc Kc LAK细胞5%-10% NKc杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞 Kc 识别IgG包被的细胞 LAK非特异性的杀灭靶细胞4. 辅助细胞:单核吞噬细胞系统、树突状细胞和棘细胞.免疫分子;主要是免疫球蛋白、既抗体、它属于r球蛋白。.1.抗体是由蛋白质和碳水化合物组成、是r-球蛋白、也称作免疫球蛋白2.抗体分子的根本构造是由一条重链分子量约50000和一条轻链分子量约25000组成,共有五种免疫球蛋白:IgG IgM IgA IgE IgD, 其区别在于重链成分和构造的不同。.3. IgG 占人体免疫球蛋白总量73%、4. IgM占人体免疫球蛋白总量8%、由五个根本单位组成、是
5、初次免疫应对的主要抗体。5. IgA占人体免疫球蛋白总量18%、由二个根本单位组成、是分泌物和粘膜中的主要抗体.6. IgE 和 IgD共占1%、IgD位于淋巴细胞外表为外表受体;IgE与过敏反响有关、位于肥大细胞和嗜碱性细胞外表.免疫系统的组成:免疫器官、免疫组织、免疫细胞 免疫分子组成。但根据其作用,免疫系统是由两部分组成、即外来蛋白的体内识别和阻止体内传染性病原体繁衍生长这两部分组成,这种免疫应对是特异性的。.免疫反响 免疫反响分体液免疫和细胞免疫细胞免疫由T淋巴细胞介导、包括辅助性T细胞和杀伤性T细胞,辅助性T细胞表达CD4、杀伤性T细胞表达CD8,体液免疫Bc:是B细胞介导的抗原抗体
6、反响,和免疫学检测方法有关. 细胞免疫ThTh1 Th2 NK破坏被微生物感染的细胞和组织 Tc: LAK非特异性的杀灭靶细胞 K:识别IgG包被的感染细胞 .减少输血传染传染性病原体的方法仔细选择献血员筛检捐赠的血液去除血液中被感染的特殊成分用物理方法灭活感染性病原体.血液筛查就是检查传染性标志物传染性标志物:可以是病原体本身、也可以是特异性抗体.HIV和HBV 感染后,抗体的产生对机体免受再次感染有维护作用, .对献血员筛查而言,检测病原体本身比检测抗体要好。抗体的出现仅提示了一种免疫力,而非感染形状。对乙型肝炎,检测HBsAg是用于HBV 感染的筛查;而对于HIV,检测HIV抗体用于献血
7、者HIV感染的筛查.三 HIV1. 1983年发现的HIV1;1986年西非发现HIV2,两者的包膜蛋白不同。2. 与HIVRNA相关的两种蛋白质分别是7KDa和9KDa7P和9P,逆转录酶是P66。糖蛋白的缩写是gp.3. HIV1的包膜蛋白:P17/gp41/gp120 HIV2的包膜蛋白:P17/ gp36/gp110130.4. 当病毒开场复制时、感染进入最后阶段、产生大量病毒粒子,以出芽的方式脱离细胞时,外面包裹一层细胞膜、构成病毒颗粒。5. HIV为逆转录病毒,其中心蛋白P24和包膜蛋白gp41最具免疫性,主要破坏免疫系统、感染CD4+细胞。CD4+细胞:协助刺激免疫应对的Tc、
8、Thc、吞噬细胞.6. AIDS相关综合征的缩写是ARC7. ARC恶性开展的预兆是:既可检测到gp41抗体又能检测到P24抗原。8. 输血是HIV传播的重要途径、但不是主要途径。.四HIV挑选实验原理1. HIV抗体检测的根本方法:EIA抗人球法I型、竞争法 II型、夹心法 III型、颗粒凝集实验、特异性快速实验颗粒凝集实验、特异性快速实验只能检测抗体。. 抗人球蛋白EIA法中的标志酶通常是辣根过氧化物酶使底物氧化和碱性磷酸酶使底物去磷酸化。竞争型EIA法的酶结合物是酶标HIV抗体 ,其浓度应低于标本中的HIV抗体最小浓度。. HIV抗原检测 : HIV抗原检测采用夹心法抗体-抗原-抗体 结
9、果判读 : I型与夹心法 III型中、高OD值、产生颜色、阐明有反响;竞争法 II型中、高OD值、产生颜色、阐明无反响;Cut-off值的计算:Cut-off值=Ncm+0.2 (阴性对照的平均值).规范比率=OD值/Cut-off值,数值小于1为无反响结果; 数值大于1为有反响结果;但在竞争型EIA法中、比率= Cut-off值/ OD值。. 特异性快速法:蛋白A由金黄色葡萄球菌产生,能与IgG的Fc段结合补体结合部位。.五HIV抗体的筛检方法的选择灵敏度:检测出最弱阳性标本的才干真阳性/真阳性+假阴性100% 特异性:防止假阳性或非特异性阳性结果的才干真阴性/真阴性+假阳性100%。 质控
10、品:质控品中不能含有那些能够干扰实验的防腐剂,叠氮钠能够EIA法中的辣根过氧化物酶时候失活。.六抗HIV抗体筛检实验的运用 筛检结果处置:初试阳性标本用特异性快速法普通只重做一份,而颗粒法和EIA均做双份。.七质量保证 1. 对质量体系而言,最本质的是各种程序文件化。2. SOP初稿由各岗位任务人员起草,担任人审核。3.质量审核的目的在于质量控制任务的完好性和质量体系得有效性。.八其它传染性病原体一 HBV二 HCV三 梅毒四疟疾五恰加斯病又称为南美洲锥虫病.一、HBV 27nm的HBV壳体中心含有病毒核酸和DNA聚合酶、其具有传染性;而22nm的球形颗粒或管状小颗粒只含有病毒蛋白、其没有传染
11、性。.HBV-1 病毒构造方式图.HBV-1病毒的增值过程.HBV感染后的血清变化.HBV血清标志物.对血清标志的根本认识HBsAg HBV感染确认 Anti-HBs 自然痊愈、疫苗注射 HBeAg 传染标志 anti-HBe 复制水平低 anti-HBc IgM:HBV 复制,多见于乙型肝炎急性期 IgG:感染 .二HCV感染与检测HCV-1 病毒构造:至今尚未培育胜利,三维构造不清,运用反义病毒学推出。.HCV-2 临床病理.丙肝实验室诊断及临床意义 抗- HCV HCV RNA/HCV Ag 解释 (-)(-)排除HCV感染 (+)(+)活动性HCV感染(急性或慢性感染) (-)(+)早
12、期HCV感染免疫障碍患者慢性HCV感染 (+)(-)康复低或间歇病毒血症、慢性感染、抗-HCV假阳性结果、“被动”输入抗体.三、梅毒梅毒 密螺旋体属T-惨白球细菌传染病G-,梅毒螺旋体对温度非常敏感、4保管24-48小时后、传染危险根本上消除。.密螺旋体人类密螺旋体属病原体主要有四种统称: 1. 惨白球梅毒 2. 细弱密螺旋雅司病局限在热带T-惨白球亚类 3.品他螺旋体品他病 :主要在 中美和南美洲流行 4.Bejel病:非洲及中东的非性传 染病 .梅毒临床分期 一期损伤粘膜淋巴系统普通分三期: 二期损伤皮肤和细胞膜、传染性最 强。 三期损伤神经系统合心血管系统.梅毒检测: 非特异性:RPR(
13、用正常牛 心类脂质作抗原)、USR 特异性:TPHA、FTA-ABS 用梅毒螺旋体作为抗原螺旋体是革兰氏染色阴性,细胞壁中的外层细胞膜含有抗原性蛋白.四、疟疾1. 疟原虫有二个宿主:人和按蚊2. 疟原虫在二个宿主的生命循环 人类宿主内的生命循环: 孢子虫肝细胞滋养体裂细胞裂殖子释放入血红细胞滋养体裂细胞裂殖子部分构成雌雄配子体雌雄配子体在血液中存活6-12小时.能引起疟疾的疟原虫有四种: 间日疟原虫 卵型疟原虫 三日疟原虫 恶性疟原虫通常只需由恶性疟原虫引起的疟疾是致命的.四、恰加斯病又称为南美洲锥虫病1.克鲁斯锥虫引起的、属于有鞭毛的原生动物2.克鲁斯锥虫在人类宿主的血液中不能增殖3.锥鞭体
14、在昆虫中的肠内以短膜型鞭毛虫方式增殖.有关概念 一、病原体1、能引起输血传播的病原体有:病毒、细菌、原虫。2、最常见的经输血传播的病原体是病毒。.二、病毒1、朊病毒是独一的不含任何核苷酸仅由蛋白质组成的病原体。2、DNA是由碱基腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、磷酸和核糖组成的脱氧核糖核酸。RNA是由碱基腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、尿嘧啶、磷酸和核糖组成的核糖核酸。3、病毒感染相应的宿主细胞后,可被机体免疫应对的物质是病毒核酸。 4、病毒的构造:病毒核酸、病毒衣壳病毒中心、包膜病毒外衣。5、窗口期:埋伏性感染后,机体内不能检测到相应的抗体 .(三)、细菌1、细菌是由细胞核、细胞器、细胞壁极其附属
15、构造荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢组成。2、细菌感染人体后产生的病变通常是由细菌产生并释放病毒而导致的。.3真核细胞微生物:有核膜、核仁、多个染色体,由DNA和组蛋白组成。真菌、原虫4原核细胞微生物:仅有原始核,无核膜和核仁,仅为单个裸露的DNA分子。细菌5非细胞性生物:由单一的DNA或RNA和蛋白质组成,必需寄生在活的易感细胞内生长繁衍。病毒.(四)、原虫和真菌1、原虫是单细胞有机体。2、真菌是一种具有典型细胞核的真核细胞微生物。 a.酵母菌: 单细胞真菌,不构成菌丝, 真菌分为 b.类酵母菌:但类酵母菌可有假菌丝 c.霉菌:多细胞真菌,有菌丝和孢子.血型血清学一、血液中主要成分的功能及其在数学中的
16、意义二、ABO的抗原抗体反响及其影响要素三、 ABO血型系统的正反定型,对献血者和患者鉴定四、RH血型系统 五、配血实验重要性六、血型鉴定和配血实验的原理.血型血清学一、血液成分与功能全血是由细胞和血浆组成,1、红细胞: 其入血后寿命约120天、随后被网状内皮系统降解去除,红细胞内的血红蛋白在输血任务中用知浓度的硫酸铜溶液测定、男性用密度为1.052、女性用1.050的硫酸铜溶液。血红蛋白男-170g/L 女120-160g/L . 粒细胞2.白细胞: 淋巴细胞 单核细胞 白细胞是有核细胞且平均寿命很短,粒细胞平均3-5天,单核细胞分开循环系统后寿命只需几天. 中性粒细胞 50%-70% 粒细
17、胞 嗜碱性粒细胞1%-5% 其功能是抵御炎症感染 嗜酸性粒细胞 0%-1%.淋巴细胞:大部分由淋巴组织和胸腺产 生 20%-40% 主要是针对外源性抗原及病毒性 感染.单核细胞: 8% 去除外源性物质如细菌、这一 过程称为吞噬3. 血小板:正常成人含量约10-30万、血小板离体后如保管适当、可保管5天.血清和血浆: 血清是凝固红细胞的上清液; 血浆是抗凝血的上清液。凝血激活途径:内源性外表接触、外源性组织损伤 .二、血型免疫学根底1. IgG和IgM的区别都能激活补体、最适PH值6.5-7.5 IgG73%不完全抗体、能经过胎盘、与红细胞在盐水中不凝集、但可致敏红细胞、最适反响温度37、。如H
18、R血型抗体 IgM8%完全抗体、不能经过胎盘、与红细胞在盐水中凝集、最适反响温度4、。如ABO血型抗体,平均寿命10天.2. 抗原与抗体比例最适细胞浓度是2-5%3. 抗人球蛋白实验 抗人球蛋白实验分三阶段;第一致敏与包被、第二阶段洗涤、第三阶段参与抗人球蛋白。4. 补体 5630分钟可将其灭活.三、ABO血型系统1. 1900年Landsteiner发现了ABO血型2. ABO血型鉴定、必需进展细胞与血清两组实验、即正定与反定、反定时用O细胞的目的是证明能否有不规那么抗体3. 新生儿ABO血型只作正定4. A抗原亚型1911年发现A1 A2两种亚型、A2 和A2B的血清中有能够有抗A1抗体。
19、.5. 抗AB和抗A常用抗AB来确定弱A和B抗原这种抗A和抗B的混合物与弱A和B抗原亲和力强,抗AB在患者的红细胞鉴定中部需求,但建议用于献血者简单。6. 直接抗人球蛋白实验:测定细胞外表致敏的抗体7. 间接抗人球蛋白实验:测定游离在血清中的抗体.A2和A2B的人血清中有能够有抗A1,但通常很弱。A2人血清有抗A1占2%, A2B的人血清中有抗A1占25 %.四、Rh血型系统 1939年发现了Rh血型、抗原的发育与ABO抗原的发育不一样、RhD抗原在胎儿早期就得到了充分的发育,脐带或新生儿红细胞的Rh血型与成人一样强。.。RH系统不象ABO系统,它有六个基因,称为:Cc,Dd,Ee;五种抗原称
20、为Cc,D,Ee。d基因不产生抗原。.1. RhDu型的献血员作为Rh阳性对待、RhDu型的病人作为Rh阴性性对待。2. 不完全D和RhDu型不同、不完全D是部分抗原丧失、可产生针对丧失部分抗原的抗-D抗体;而RhDu型是细胞上D抗原数量低于正常。.五、配合性实验和发血患者用血选择1.为大量输血的患者选血、大量输血是指患者在24小时内输了超越本身血容量的血液、在输了12单位血后,可以输注未经交叉配合的血液,但三天后仍需输血必需进展交叉配合。.2. 给婴儿或新生儿选择全血或红细胞悬液、普通用不超越7天的、最新颖的血液。血液选用与母婴配合Rh血型适宜的血液由于婴儿血清中存在母亲的血型抗体如母亲为O型,婴儿为A型,那么选用O型的红细胞加AB型血浆;在换血的情况下选血的原那么有赖于换血的缘由。RhD新生儿溶血病患儿换血、那么用RhD阴性血;ABO新生儿溶血病患儿换血、那么用低效价O型血;其他任何新生儿黄疸患儿换血、可选用ABO、Rh与婴儿同型的血液或Rh同型的。.3. 不规那么抗体挑选:不规那么抗体挑选多用抗人球蛋白实验、挑选细胞有双细胞挑选R1R1O型CDe/CDe, R2R2cDE/ cDE, 三细胞挑选R1R1 、R2R2 、 RRO型cde/cde.4. 输血反
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