胚胎发育学课件

1、胚胎发育学课件胚胎学实验内容了解切片制作过程观察斑马鱼、蛙、鸡胚活体及切片 制作2Dpf鸡胚整装片一、切片的制作1、切片的种类 取材 切片、涂片、铺片、压片、磨片等； 切片 石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片； 连续切片、整装片 2、切片的制作取材固定（浸蜡、包埋）切片染色透明封固等 next固定液单一固定液复合固定液长处突出，短处抵消 染色液染色方法常用染色方法Mallorys三色染色铁矾苏木精染色尼氏体染色镀银法 上皮界限、网状纤维、神经细胞全貌（Golgi简易法）、神经细胞（石蜡切片法）镀金法 运动终板特殊组分染色法Feulgen反应示DNAPyronine法示RNAPAS法糖元碱性磷酸酶G

2、omoni法（钴）透明剂二甲苯（XYL）甲苯苯氯仿香柏油二、切片观察观察重点一早期卵裂斑马鱼 蛙胚 未受精卵 合子期胚胎分裂期胚胎 囊胚 （ 原肠胚 器官形成期）；原肠化蛙胚 背唇、腹唇、瓶状细胞（早）； 原肠腔vs囊胚腔（早中晚）； 卵黄栓 （晚）； 神经胚蛙胚 神经板、脊索、原肠腔、中胚层； 神经管、神经嵴、（体腔）、外胚层；器官形成鸡胚附：1、3mm蛙胚连续切片； 2、鸡胚原条期切片。观察重点二：鸡胚发育过程整装片及切片1、未孵化鸡胚（处于囊胚期）切片2、原条期（孵育16小时）切片 明区，暗区，原条，原结，原窝3、19小时鸡胚整装片4、孵育1天的鸡胚整装片（四个体节） 明区，暗区，前羊膜

3、，神经褶，四对体节， 脊索，退缩的原条5、33小时鸡胚整装片 前脑，视泡，中脑，菱脑，心脏，体节， 神经管 6、孵育3天鸡胚整装片 端脑，间脑，中脑，后脑，听泡，尿囊，心脏， 尾，体节观察重点三：鸡胚活体标本的形态结构特征 2 Dpf鸡胚 气室、卵壳膜、胚盘等 78 Dpf鸡胚1、观察四种胎膜(卵黄囊、羊膜、尿囊、绒毛膜) ，胚胎的外形，卵黄囊是否完全包住卵黄？尿囊的大小？2、羊膜大小。3、眼睛、喙、四肢、指和趾的分化。next三、整装片制作实验材料、仪器及药品受精的鸡蛋(白来航2Dpf ）恒温箱、检卵灯、温度计、湿度计；染色缸、药匙、镊子、吸管、废液缸、解剖剪、玻璃皿、 生理盐水、卡氏固定剂

4、、 95酒精、酒精洋红、 100酒精、甘油、载玻片、盖玻片等2Dpf鸡胚整装片制作流程 上 下 临时制片取材0.9%的生理盐水冲洗卡氏固定液，51095酒精，2酒精洋红，203095酒精，2分钟100酒精，2 (*2)100甘油封片永久制片1：1的100（酒精：二甲苯）10二甲苯10树胶封片 附：1、蛙卵的获得2、鸡的孵化整装片制作结束斑马鱼胚胎早期发育图谱爪蟾的人工受精人工受精催青 1、激素催青绒毛膜促性腺激素（HCG）；12小时 2、垂体提取液催青步骤1、区分爪蟾的雌雄雌：大； 雄：婚爪垫；2、催青、抱对 ；3、精子悬浮液制备处死4、取卵与人工受精挤压5、体外受精蛙胚早期卵裂蛙原肠胚蛙神经胚鸡卵的人工孵育 选蛋 孵化前消毒0.01%高锰酸钾 、水温40 ，擦拭 孵化 21天1、 温度37.8（36.538.5） 2 、湿度4070% 3 、通风4 、翻蛋 3040次 vs 35次 /天 5 、晾蛋6 、照蛋 56天 无精蛋、裂纹蛋； 11天 死胚蛋 ； 21天死胚蛋、破壳蛋未孵化鸡胚Back3Dpf鸡胚器官原基8Dpf鸡胚胚外结构Back鸡蛋的结构1蛋壳；2气室；3内壳膜；4外壳膜；5系带层蛋白；6胚盘；7卵黄；8卵黄膜；9浓蛋白；10稀蛋白；11脐带；12潘氏