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文档简介

1、果蝇伴性遗传实验报告篇一:实验七 果蝇的伴性遗传实验七 果蝇的伴性遗传09 级生物技术 2 班 中午组 李昭慧汪琼燕一、目的1、记录交配结果和掌握统计处理方法;2、正确认识伴性遗传的正、反交的差别。二、原理1910 年,摩尔根在实验室中无数红眼果蝇中发现了一只 白眼雄蝇。 让这只白眼雄蝇与野生红眼雌蝇交配, F1 全是红 眼果蝇。让 F1 的雌雄个体相互交配,则 F2 果蝇中有 3/4 为 红眼, l/4 为白眼,但所有白眼果蝇都是雄性的。这表明, 白眼这种性状与性别相连系,外祖父的性状通过母亲遗传给 儿子。这种与性别相连的性状的遗传方式就是伴性遗传。摩 尔根等对这种遗传方式的解释是:果蝇是

2、XY 型性别决定动 物,控制白眼的隐性基因( W位在X性染色体上,而 丫染 色体上却没有它的等位基因。如果这种解释是对的,那么白 眼雄蝇就应产生两种精子:一种含有X染色体,其上有白眼基因(W,另一种含有丫染色体,其上没有相应的等位基因;F1杂型合子(WW雌蝇则应产生两种卵子:一种所含的X染色体,其上有红眼基因( W;另一种所含的X染色体,其上 有白眼基因(W;后者若与白眼雄蝇回交,应产生1/4红眼 雌蝇, l/4 红眼雄蝇, 1/4 白眼雌蝇, l/4 白眼雄蝇。实验结 果与预期的一样,表明白眼基因( W确在X染色体上。果蝇的性染色体有 X 和 Y 两种类型 .雌蝇细胞内有 2 条 X染色体,

3、为同配性别(XX),雄蝇为XY是异配性别性染色体 上的基因在其遗传过程中 , 其性状表达规律总是与性别有关 因此, 把性染色体上基因决定性状的遗传方式叫伴性遗传。果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的 相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均 为红眼果蝇,F1代相互交配,F2代则雌性均为红眼,雄 性红眼:白眼=1:1;相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交 配,F1代雌性均为红眼 ,雄性都是白眼,F1相互交配 得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1 :1,雄蝇红眼与白眼 比例亦为1:1。由此可见位于性染色体上的基因,与雌雄 性别有关系。伴性遗传可归纳为下列规律:当同配性别的性染色体(如哺

4、乳类等为 XX 为雌性, 鸟类 ZZ 为雄性)传递纯合显性基因时, F1 雌、雄个体都为 显性性状。F2性状的分离呈3显性:1隐性;性别的分离呈1 雌: 1 雄。其中隐性个体的性别与祖代隐性体一样,即 1/2 的外孙与其外祖父具有相同的表型特征。当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时, F1 表 现为交叉遗传,即母亲的性状传递给儿子,父亲的性状传递给女儿, F2 中,性状与性别的比例均表现为 1: 1存在于 Y 染色体差别区段上的基因 在进行伴性遗传实验时, 也会出现例外个体, 即在 B 杂 交组合,F1 代中出现不应该出现的雌性白眼,这是由于两条 x 染色体不分离造成的,不过这种情况极为罕

5、见,约几千个个 体中才有一个。三、仪器、设备、试剂及材料1、器材恒温培养箱 , 双筒解剖镜,架盘天平 , 高压灭菌锅 , 培养 瓶, 麻醉瓶 , 白瓷板 , 毛笔,镊子 , 棉花塞。2、试剂乙醚,丙酸 , 酵母粉 , 玉米面 , 琼脂条 , 葡萄糖,蒸馏水。3、材料黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)品系 , 野生型红眼 (+) 和突变型白眼 (white eye,w). 决定黑腹果蝇红眼和 白眼的基因位于 X染色体上,是一对等位基因.四、步骤1、配制培养基果蝇培养基配方 :A:糖6.2克,加琼脂0.62克,再加水38mm煮沸溶解;B:玉米粉8.25克,加水 38mm加

6、热搅拌均匀,再加0.7克酵母粉;A和B混合加热成糊状后,加 0.5mm丙酸, 即可分装到培养瓶中。 倒入培养基的厚度约 2 厘米,在培 养基中插入一张消过毒的干燥硬纸片,以扩大果蝇的活动场 所。将培养瓶置入高温高压灭菌锅内,以121 C, 1.5大气压消毒 30 分钟。 消毒完成后,待灭菌锅内压力降至常压后 开启锅盖使其半开,再以灭菌锅干燥培养瓶之棉塞 30 分钟,完成后取出使其冷却 备用。待培养基冷却后,用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。因为 瓶里有了积水,移入的果蝇容易淹死或粘住。2、收集处女蝇雌果蝇自羽化开始 10 小时之内尚未成熟而无交配能力。 选择处女蝇时,先把培养瓶中的老果蝇全部除去,收

7、集10小时之内羽化出来的新果蝇,麻醉后用放大镜在百瓷板上将 果蝇雌雄分开,这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。如 果要验证选取的处女蝇是否准确,先不要放入雄蝇, 3 天后 看雌蝇是否产卵,如果产卵就不是处女蝇了。3、接种 按照无菌操作技术,一手持培养瓶,一手持广口瓶,轻 轻地旋转广口瓶棉塞,使果蝇掉离棉塞,迅速取下两瓶的棉 塞,瓶口相对,培养瓶在上,果蝇触角根部的感觉神经能和 人类的耳朵一样感知声音和重力,受惊吓后会向上逃走,轻 轻敲击广口瓶,果蝇会陆续飞入培养瓶,塞好瓶口,进行伴 性遗传杂交时 , 应该同时配置正交和反交试验组合 . 因为决 定性状的基因在性染色体上 , 正, 反交的结果会出

8、现性状和 性别的差异 . 在果蝇培养前 , 要在杂交培养瓶上贴上标签 , 标 明实验题目 , 杂交组合 , 杂交日期 , 实验者姓名 . 最后 , 把培养 瓶放在2025 C恒温培养箱内饲养果蝇.标签如下:4、去亲本:果蝇饲养几天以后 , 肉眼可见培养瓶中出现了幼虫和蛹 , 这时可以将亲本移出 , 以防亲本与 F1 果蝇混杂 , 影响实验结 果。5、F1 代性状观察和统计:再经过几天饲养之后,培养瓶中会陆续羽化出F1代果蝇,仔细观察 F1 代果蝇性状 , 统计正 , 反交 F1 代表型性状的观察 结果 , 并将结果填入表6、F1 代自交:把正交试验得到的 F1 代果蝇转入一个新培养瓶中进行 相

9、互交配 , 把反交试验得到的 F1 代果蝇也转入一个新培养瓶 中进行互交 (不需挑选处女蝇 ), 以期获得 F2 代.7、去亲本:经过78天的培养,当培养瓶里出现了 F2代幼虫和蛹时, 把培养瓶里的成蝇转移出去,防止与F2代果蝇混杂.8、F2 代性状观察和统计:再经过几天饲养之后 ,F2 代果蝇会陆续羽化来 , 仔细观 察 F2 代果蝇的性状 , 统计正 , 反交 F2 代表型性状的观察结果 并将结果填入表格。篇二:果蝇杂交实验报告果蝇杂交实验报告 实验日期:XX年9月28日-XX 年 10 月 20 日 小组编号:周五 5 组 小组成员:白坦蹊 陈朱媛 呼波 王启明 【摘要】 实验利用果蝇,

10、这一常用的遗传学模式生物,进行杂交 实验,验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、 基因连锁交换等遗传学规律。报告对实验数据进行了卡方检 验,对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算,证明实验数 据基本符合假设的。【实验原理】一、遗传定律基因分离定律 一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性,在配子 形成时,按原样分离到不同的配子中去,理论上配子分离比 是1 : 1, F2代基因型分离比是 1 : 2 : 1,若显性完全,F2 代表型分离比是3 : 1。控制体色性状的突变基因位于 2 号常染色体,正常体色 对黑体完全显性, 用正常体色果蝇与黑体果蝇交配, 得到 F1 代都是正常体色, F1

11、代雌雄个体之间相互交配, F2 代产生 性状分离,出现两种表现型。 2. 基因自由组合定律 不同相对性状的等位基因在配子形成过程中,等位基因 间的分离和组合是互不干扰,各自独立分配到配子中去,它 们所决定的两对相对性状在 F2 代是自由组合的,在杂种第 二代表型分离比就呈 9 : 3 : 3 : 1。控制体色性状的突变基因位于 2 号常染色体,正常体色 对黑体完全显性,控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性,用黑体红眼果蝇(旱)与正常体色白眼果蝇(3 )交配,得到F1代都是正常体色,F1代雌雄个 体之间相互交配, F2 代产生性状分离, 出现四种表现型。 3. 伴性遗传位于性染

12、色体上的基因,其传递方式与位于常染色体上 的基因不同,它的传递方式与雌雄性别有关,因此称为伴性 遗传。果蝇的性染色体有 X和丫两种,雌蝇为XX,雄蝇为XYo 红眼与白眼是一对相对性状,控制该对性状的基因(W)位于X染色体上,且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。当红眼雌蝇与 白眼雄蝇杂交时, F1 代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼, F2代雌性果蝇都是红眼,雄性果蝇红眼和白眼的比例为1: 1;当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时, F1 代雌性果蝇为红眼, 而雄 性果蝇为白眼,此现象又称为绞花式遗传,F2代雌性果蝇的 红眼与白眼比例为1 : 1,雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1 :1 。 4. 连锁与交换定律连

13、锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起 而遗传的现象;互换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间 的对应片段的交换,从而引起相应基因间的交换与重组。同 一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体基因之间可以 发生一定频度的交换,因此在子代中将发现一定频度的重组 型,但一般比亲组型少得多。 5. 基因定位基因定位就是确定基因在染色体上的位置,确定基因的 位置主要是确定基因之间的距离和顺序,而它们之间的距离 是用交换值来表示的。只要准确地估算出交换值,并确定基 因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染色体上,绘 制成图。三点测交 三点测交是基因定位最常用的方法,它是通过一次杂交 和一次用隐性亲本

14、测交,同时确定三对基因在染色体上的位 置。 二、果蝇的生活史与雌雄辨认1.果蝇的生活史果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育 阶段(图 1)。卵:卵白色,长椭圆形,长约0.5mm,在背面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到 食物中去。幼虫:幼虫从卵中孵化出来后,经过两次蜕皮到第三龄 期,体长可达45mm在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部, 并且有一黑点即口器;稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺 前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。 神经节位于消化道前端的上方。蛹:幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出 附在瓶壁上, 渐次形成一个棱形的蛹。

15、起初颜色淡黄、 柔软, 以后逐渐硬化, 变为深褐色, 这就显示即将羽化了。 成虫: 刚羽化出的果蝇,身体狭长,翅还没有展开,身体较白嫩, 此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的,没有多大区别。 不久,蝇体变为粗短椭圆形,双翅展开,体色加深,如野生 型果蝇的体色成为灰褐色。图 1 果蝇的生活史果蝇雌雄的辨认体型雌果蝇体型较大,雄果蝇较小;腹部末端雌性腹部椭圆, 末端稍尖, 雄性末端钝圆;腹部背面雌性有明显 5 条黑色条纹,雄性有三条,前两条细,后一条宽,延至腹面,肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。 4) 腹部腹面 雌性有较明显的 6 个腹片,雄性有 4 个腹片。5) 性梳雄性第一对足的跗节基部外侧有

16、黑色鬃毛状性 梳(图 3-3 ),雌性则无。 6) 性梳的有无,是鉴别雌雄性果 蝇的明显标志之一 【实验材料与方法】 一、实验材料 1. 2.3.用具:显微镜,麻醉瓶,培养瓶,滤纸,毛笔,标签, 恒温培养箱材料:檀黑体突变型果蝇原种 (e) 、三隐(白眼、 小翅、 卷刚毛)突变型果蝇原种 (m) 药品:乙醚,乙醇,培养基二、实验步骤设计杂交组合亲本:正交(m雌x e雄),反交(e雌x m雄) 正交产 生的F1代继续杂交,产生 F2代。2.第二步:(9.28-9.30) 收集处女蝇 收集方法 :1 )放飞成蝇 ( 生长好、接近羽化蛹多者 )2)清除成蝇后的 10 小时内收集处女蝇杂交接种 ( 次

17、日就要检查 , 如有死亡及时补救 ) 。杂交 瓶上注明 : 杂交组合、实验日期、实验者姓名。部分蛹变黑 ,F1 即将孵出前, 移出亲本蝇。 亲本蝇冻存( 为防止失败 , 可留存活蝇适当时间) ,配制新培养基,用于 F1 同胞交配。F1 代果蝇的观察和交配。 F1 代果蝇孵出 7-9d 观察 统计 F1, 并选 10-20 对再杂交于 6. 一个或多个新瓶。F1 杂交一周后,移出 F1 代果蝇。亲本蝇冻存。第一只 F2 代果蝇出现后 10 天内,观察、统计 F2 代 的结果,进行分析【实验结果及分析】 一、杂交结果 杂交获得的果蝇形状数据见表 1、表 2。1. 伴性遗传与自由组合定律的检验 1)

18、 图谱分析 正交反交P:EEXwXw (正常体色、白眼、雌)xeeXWY (黑檀体、红眼、雄)eeXWXW黑檀体、红眼、雌)x XWY(正常体色、白眼、雄)F1: EeXWXw (正常体色、红眼、雌)EeXwYEeXWXWE常体色、红眼、雌) EeXW(Y 正常体色、红眼、雌)理论: 1 : 1 1 : 1 实际: 23 :2715 :14F2:实际:2) 适合度测验单从上面的分析中我们很难得出结论,所以我们再利用适合度测验来进一步分析。首先分析眼色的伴性遗传:通过适合度测验,可以发现,针对正反交 F1 代,正 交F2代所做的3次适合度测验所得 P值均大于0.05,且F1 代的 P 值很高,说

19、明我们得到的实验的数据与理论比率之间 差异不显著,假设成立,实验数据可以反应出眼色的伴性遗 传规律。接着对控制眼色的基因与控制体色的基因间的自由 组合定律做适合度检验:通过适合度检验, 可以发现P值大于0.05,说明实验值与理论值差异不显著,假设成立,即试验中控制眼色和体色 的基因服从自由组合定律。基因的连锁与交换篇三:果蝇杂交实验报告果蝇杂交实验报告摘 要 经典遗传学的三大遗传定律分别是:分离定 律,自由组合定律和连锁与交换规律。果蝇具有生活史短、 繁殖率高、饲养简便等特点,是研究遗传学的好材料,尤其 在基因分离、连锁、交换等方面,对果蝇的研究更是广泛而 充分。本次通过实施已有实验方案,观察

20、后代中果蝇的各种 性状,结合各种统计处理方法,从而证明这三大定律。1 原理分离定律 一对等位基因在杂合状态中保持相对的独 立性,在配子形成时,按原样分离到不同的配子中去,理论 上配子分离比是1 : 1, F2代基因型分离比是 1 : 2 : 1,若显 性完全,F2代表型分离比是3 : 1。控制体色性状的突变基因位于 2 号常染色体,灰体对黑 体完全显性,用灰体果蝇与黑体果蝇交配,得到 F1 代都是 灰体, F1 代雌雄个体之间相互交配, F2 代产生性状分离, 出现两种表现型。 (图 1 )图 1 图 2自由组合定律 不同相对性状的等位基因在配子形成 过程中,等位基因间的分离和组合是互不干扰,

21、各自独立分 配到配子中去,它们所决定的两对相对性状在 F2 代是自由 组合的,在杂种第二代表型分离比就呈 9: 3: 3: 1。控制体色性状的突变基因位于 2 号常染色体,灰体对黑 体完全显性,控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼 对白眼完全显性,用黑体红眼果蝇 (旱)与灰体白眼果蝇(S) 交配,得到 F1 代都是灰体, F1 代雌雄个体之间相互交配, F2 代产生性状分离,出现四种表现型。 (图 2)伴性遗传 位于性染色体上的基因,其传递方式与位于 常染色体上的基因不同,它的传递方式与雌雄性别有关,因 此称为伴性遗传。果蝇的性染色体有 X和丫两种,雌蝇为XX,雄蝇为XYo 红眼与白眼是一

22、对相对性状,控制该对性状的基因(W)位于X染色体上,且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时, F1 代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼, F2 代雌性果蝇都是红眼,雄性果蝇红眼和白眼的比例为1: 1;当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时, F1 代雌性果蝇为红眼, 而雄 性果蝇为白眼,此现象又称为绞花式遗传,F2代雌性果蝇的 红眼与白眼比例为1 : 1,雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1 :1 。(图 3 )图 3 图 4连锁与交换定律 连锁是指在同一同源染色体上的非 等位基因连在一起而遗传的现象;互换是指同源染色体的非 姊妹染色单体之间的对应片段的交换,从而引起相应基因间 的交换与重组。

23、同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染 色体基因之间可以发生一定频度的交换,因此在子代中将发 现一定频度的重组型,但一般比亲组型少得多。野生型果蝇 翅形为长翅,复眼为红眼。突变型果蝇 翅形为残翅,翅顶端与身体末端约等长,控制该性状的突变基因位于 X性染色体上,长翅对残翅完全 显性;眼色为白眼,复眼呈白色,控制该性状的突变基因位 于X性染色体上,红眼对白眼完全显性。长翅红眼果蝇(旱)与残翅白眼果蝇(3 )交配时,得到F1 代都是长翅红眼, F1 代雌雄个体之间相互交配, F2 代产生 性状分离;当残翅白眼果蝇 (旱)与长翅红眼果蝇(3 )交配时, 得到 F1 代雌性果蝇都是长翅红眼, 雄性果蝇都

24、是残翅白眼,F1 代雌雄个体之间相互交配, F2 代产生性状分离。通过后 代中各种表型比例的分析,就可计算出重组率。 (图 4) 基因定位 基因定位就是确定基因在染色体上的位置, 确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序,而它们 之间的距离是用交换值来表示的。只要准确地估算出交换值, 并确定基因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染 色体上,绘制成图。2 实验材料实验材料用具 显微镜,麻醉瓶,培养瓶,滤纸,毛笔,标签,恒温培养箱 2.1.2 材料 黑腹果蝇的几个品系:野生型 18( Wild type,+ )、残 翅 22 ( Vestigial,Vg )、白眼 2( White,w )

25、、黑檀体 e( ebony,e ) 野生型果蝇的双翅是长翅(翅长过尾部) ,红眼(复眼 红色),灰体(身体灰褐色) 。所有野生性状对隐性性状显性 完全。2.1.3 药品 乙醚,乙醇,丙酸,培养基 2.2 实验方法 乙醚麻醉T观察T果蝇交配T选用处女蝇T分出雌雄 本-F1成蝇羽化-开始计算-观察性状。 可靠的计数及观察 是培养开始的 20 天以内(再晚 F2 也可能有了) 。若须继续 实验,观察F2,可在F1内挑出雌雄数对,另外培养,因为 这次是用 F1 作亲本,进行个体间互交,所以这时不是处女 蝇也可以。但如要把 F1 雌蝇与另一品系雄蝇杂交时,还要 严格地选取处女蝇,方法同上。蝇T单独饲养T

26、杂交T贴好标签T培养T78天后倒掉亲在作新的留种培养时,应事先检查一下果蝇有没有混杂, 以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶 510对,移入新瓶时, 须将培养瓶横卧,然后用毛笔将麻醉的果蝇从白瓷板上轻轻 扫入,待果蝇醒过来后再把培养瓶竖起,以防果蝇粘在饲料 上。原种每 2 4 周换一次培养基。每一原种培养至少保留 两套,培养瓶的标签上要写明突变名称,培养日期等。作原 种培养温度可控制在 1015 C,培养时避免日光直射。果蝇在适宜条件下会产子代,在肉眼能看到幼虫时就可 把亲本倒掉,几天以后,新的成蝇便产生。待成蝇有了足够 保种的数量后,要调换培养瓶,作为下一代的亲本,继续培 养。原种果蝇培养遇到的

27、麻烦是饲料发 霉。发霉的原因很 多,如用具没有灭菌,空气污染,亲本不及时倒掉,都会引 起饲料发霉。严重的霉菌污染会影响果蝇的生长。饲料中加 丙酸可以抑制霉菌,但并不能完全制止。发现培养瓶中有少 量霉点时可用烧过的解剖针挑出。若大量霉菌污染,可把果蝇全部倒在一个消毒过的空指管中,让它活动23小时,换一支指管,再活动 12小时,而后倒入一支新的培养瓶 中继续培养,这样可以防止霉菌污染。原种保存遇到的另一个问题是混杂,几个不同品系的果 蝇在一起培养, 一定要防止混杂。 培养瓶的塞子要做得紧些, 不使果蝇逃出。调换培养瓶时,要防止果蝇飞散。外逃的果 蝇要打死。 发现了混杂的原种, 要根据原种果蝇的全部

28、特征, 挑出数对雌雄蝇饲养,进行筛选直到完全没有分离为止。一 般混杂时,只要方便,可以重新引种,将混杂种弃去。实验设计 第一周:我们实验的目的是分别验证三种不同的遗传方式(自 由组合,伴性遗传和基因的连锁交换) ,所以我们要选取合 适的果蝇组合进行杂交。具体组合方式如下表所示:表一:亲本果蝇组合类型间、实验者的姓名等内容。相同操作进行反交实验。 将培养瓶置于25 C下培养- 周。 第二周:将培养瓶中所有亲本果蝇清除,继续培养一周,并配 置新的培养基,以备第三周用。 第三周:观察并记录正反交组合中 F1 的性状。从正反交组合中的 F1 中各挑选出两对果蝇,放入一个新的培养瓶,贴上标签,在25 C下继续培养。第四周:将培养瓶中所有亲本果蝇清除后, 继续培养一周。 第 五周当 F2 代果蝇数目足够时,将成蝇全数麻醉至死,倾 倒在滤纸上,用显微镜观察果蝇的不同性状,分别统计并记 录数据。3 结果数据记录表二:果蝇A与果蝇B的杂交结果1表三:果蝇A与果蝇B的杂交结果2结果分析3.2.1 自由组合定律 图谱分析A 灰身长翅( AABB) B 黑体残翅( aabb)P:AABB (灰身长翅)x aabb (黑体残翅)F1:AaBb( 灰身长翅 )自交F2:灰身长翅黑体长翅 灰身残翅 黑体残翅理

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