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文档简介

1、C 8 色谱柱的使用定义、区分?液相色谱柱根据极性分为正相柱和反相柱。?正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ ODS） 称为C18柱，其它常用的反相柱还 和苯基柱等。C83C45C2使用、维护? pH 适用范围反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时 一定要注意流动相的 PH 范围。一般的 C18 柱 PH 值范围都在 2? 8,流动相的 PH 值小于 2 时，会导致键合相的水解；当 PH 值大于 7 时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降 解。 pH

2、 过高或过低述可能会损害密封圈和柱塞杆以及色谱柱更严重的是当 PH 大于 9.5 时会破坏流通池的石英玻璃如果发现上述情况，色谱柱入口会发生塌陷。? 样品的前处理&最好使用流动相溶解样品b.使用针头过滤器（0.45um滤膜）出去样品的可见异物?流动相配制a流动相对样品具有一定的溶解能力，并且保证样品不会在色谱柱内析出或长时间留在色谱林内流动相不与样品发生反应流动相粘度尽量小，使样品得到高效分离的同时降低柱压，延长色谱柱寿命流动相沸点不能太低，避免有气泡产生，影响实验进行流动相要保证现配现用，不能储存太久，避免流动相生成杂质微生物影响检测流动相使用前先脱气注意事项? 新色谱柱使用：a 先用 10-20 倍柱体积的色谱级甲醇或乙月青由低流速缓慢提高至正常流速冲洗，随后换至10%甲醇低流速缓慢提高至正常流速冲洗分清色谱柱方向尽 量在色谱柱前段加保护柱，并定期清洗保护柱? 色谱柱冲洗使用完毕先用10%甲醇/ 水冲洗，如果长时间不用 再用纯甲醇冲洗、保护（一般情况下 ， 10%甲醇 / 水低流速冲洗过夜）再生用相当于 20 倍体积的溶剂按顺序冲洗柱子，尽可能按照色谱柱箭头方向冲洗，尽量不 反冲：10%甲醇/ 水溶液一甲醇一氯仿（

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