《生物技术基础》课程试卷及参考答案

1、8/8生物技术基础课程试卷适用专业：课程性质：选修，学时：40，学分：2，考试日期：考试时间：120分钟，总分：100分，闭卷一、名词解释（每词4分，共24分）1、细胞工程2、蛋白质工程3、限制性内切酶4、干细胞5、同裂酶6、克隆动物二、填空（每空1分，共20分）1、DNA的基本组成单位是 ，RNA的基本组成单位是 。2、最常用的DNA聚合酶有 、 、 和 等4种。3、细胞工程的基本操作有： 、 和 技术。 4、目前常用的转基因动物制作方法有： 、 、 、 、 。5、DNA经类型限制性内切酶切割后可产生 和 两种末端结构。6、按照分化潜能大小来分类，干细胞可分为： 、 和 三类。三、简答题（每

2、题7分，共42分）1、什么叫PCR？它的基本原理和反应过程有哪些？2、简述基因克隆（DNA重组技术）的基本过程。3、蛋白质工程基本步骤有哪些?4、发酵工程的概念、内容，典型的发酵工程包括哪几部分？5、单克隆抗体生产的基本原理是什么？6、简述重组DNA的筛选与鉴定中蓝-白斑筛选的原理。四、论述题（12分）论述基因工程在食品产业中的应用主要有哪些？生物技术基础课程试卷参考答案一、名词解释（每词4分，共24分）1、细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。2、

3、蛋白质工程：蛋白质工程是指通过蛋白质化学、蛋白质晶体学和动力学的研究，获取有关蛋白质物理和化学等各方面的信息，在此基础上利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列进行有目的的改造并分离、纯化蛋白质，从而获取自然界没有的、具有优良性质或适用于工业生产条件的全新蛋白质的过程。3、限制性内切酶：是一类由细菌产生的能专一识别双链DNA中的特定碱基序列、并水解该点磷酸二酯键 的核酸内切酶，简称限制酶或切割酶。4、干细胞：干细胞是一种具有多项分化潜能和自我复制、更新能力的原始未分化细胞，是形成哺乳类各种组织器官的祖宗细胞。5、同尾酶：指来源不同，但识别与切割顺序有一定的相关性的一类酶。它们作用后产生相同的粘

4、性末端。6、克隆动物：是利用显微外科技术，将一个体细胞核移植到一个去核的卵细胞中，再植入母体子宫，便可不经授精而发育成的一类动物。二、填空（每空1分，共20分）1、脱氧核糖核苷酸，核糖核苷酸；2、DNA聚合酶，DNA聚合酶大片段Klenow片段，Taq DNA聚合酶，T4 噬菌体DNA聚合酶3、无菌操作技术、细胞培养技术和细胞融合技术4、受精卵雄原核显微注射法、胚胎干细胞（ES细胞）法、逆转录病毒感染法、体细胞核移植法、精子载体法、YAC法5、粘性末端，平末端6、全能干细胞，多能干细胞，专能干细胞。三、简答题（每题6分，共42分）1、PCR也叫聚合酶链式反应，是DNA片段体外扩增的一种技术。在

5、微量离心管中,加入适量的缓冲液, 微量的模板DNA,四种脱氧单核苷酸,耐热性多聚酶, 一对合成DNA的引物,通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍; 扩增了特异区段的DNA带。 2、包括以下几个步骤：（1）提取外源目的基因（或称外源基因），酶解连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子；（2）将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化（transformation）；（3）对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定；3、(1)分离纯化目

6、的蛋白，使之结晶,进行分析,得到其空间结构的尽可能多的信息。（2）对目的蛋白的功能作详尽的研究，确定它的功能域。（3）通过对蛋白质的一级结构、空间结构和功能之间的相互关系分析，找出关键的基团和结构。(4)围绕这些关键的基团和结构提出对蛋白质进行改造的方案，并用基因工程的方法去实施。 (5)对经过改造的蛋白质进行功能性测定.4、发酵工程的概念：指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于生产过程的一种新技术。（1）以菌体为产品的发酵（2）以微生物的酶为产品的发酵（3）以微生物的代谢产物为产品的发酵 （4）产品的转化发酵发酵工程包括哪几部分：（1）菌

7、种的选育；（2）确定菌种繁殖和发酵生产所用的培养基；（3）对培养基、发酵罐及其附属设备进行灭菌；（4）菌种经逐级扩大培养后，作为生产种子接种于发酵罐中；（5）控制发酵罐中微生物的生长条件，最大程度地获得人们渴望的代谢产物；（6）产物萃取和精制。5、B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂

8、交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。6、它是一种利用蓝色化合物的形成作为指示剂的筛选方法，筛选含有编码-半乳糖苷酶的基因。当在质粒中插入外源DNA-半乳糖苷酶的N端基因失活不能与宿主-半乳糖苷酶的C端进行-互补产生白色菌落。四、论述题（12分）主要要点：一、利用基因工程改造食品微生物 （一）改良微生物菌种 最早成功应用的基因工程菌(采用基因工程改造的微生物)是面包酵母菌。 啤酒生产中要使用啤酒酵母，但由于普通啤酒酵母菌种中不含-淀粉酶，所以需要利用大麦芽产生的-淀粉酶使谷物淀粉液化成糊精，生产过程比较复杂。（二）改良乳酸菌遗传特性 （三）酶制剂的生产 利用基因工程技术不但可以成倍地提高酶的活力，而且还可以将生物酶基因克隆到微生物中，构建基因工程菌来生产酶。据1995年统计，已有50的工业用酶是用转基因微生物生产的。转基因微生物生产酶的优点：产量高、品质均一、稳定性好、价格低等。二、利用基因工程改善食品原料的品质 （一）改良动物食品性状 （二） 改造植物性