双氢青蒿素干预结直肠癌模型动物肿瘤生长的实验研究

1、双氢青蒿素干预结直肠癌模型动物肿瘤生长的实验研究作者：战晓农余卫华刘恋黄燕王雷赵学军李国桥【摘要】【目的】观察双氢青蒿素(DHA)对结直肠癌模型动物肿瘤生长的影响。【方法】选用SPF级BALB/c裸鼠，背部皮下接种结直肠癌LoVo细胞悬液复制结直肠癌模型;造模成功裸鼠随机分成5组：模型对照组，5FU组(腹腔注射5FU20mgkg-1d-1，共5d)，DHA高、中、低剂量组(分别按120、60、30mgkg-1d-1剂量灌胃给药)。14d后，检测活体肿瘤及解剖剥离后裸瘤体积、平均瘤体质量、肿瘤生长速率和抑瘤率。【结果】治疗后DHA各给药组及5FU组活体肿瘤的体积及肿瘤生长速率均减少，与模型组比较

2、差异有显著性意义(P001);5FU组及DHA高、中剂量组的裸瘤体积显著小于模型组(P005或P001);各给药组瘤体质量显著低于模型组(均P005);DHA高、中剂量组的抑瘤率显著高于5FU组(P005)，但DHA低剂量组抑癌率显著低于5FU组(P005)。【结论】DHA对结直肠癌模型动物肿瘤生长具有一定的抑制作用。【关键词】双氢青蒿素/药理学;结肠肿瘤/中药疗法;直肠肿瘤/中药疗法;疾病模型，动物;裸鼠青蒿素是从黄花青蒿中提取的有效成分，为一种含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物，临床上主要用于治疗疟疾。近年来国内外研究发现，青蒿素及其衍生物还具有其他药理活性，特别是其抗肿瘤作用受到了广泛关注

3、。Efferth等1发现青蒿琥酯对55株肿瘤细胞具有体外抑瘤作用，青蒿琥酯对结直肠癌细胞株的半数抑制浓度(IC50)为(213074)mol/L，而且对白血病等细胞株均有效果。周从明等2用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测青蒿琥酯对人结直肠癌细胞株(HCT8)的杀伤作用，结果发现青蒿琥酯对HCT8的IC50值为199g/mL。青蒿素类药物的抗疟作用主要因其具有独特的过氧桥结构，可以被铁裂解产生大量的自由基，进而形成一些亲电子化合物，攻击细胞膜或细胞内其他膜性结构，改变了细胞的通透性3。至于青蒿素及其衍生物的抗肿瘤作用机制，很多研究者4-5认为与青蒿素类药物的抗疟机制和肿瘤细胞代谢的特

4、点有关，青蒿素类药物具有诱导肿瘤细胞凋亡、抑制新生血管等作用。为进一步探讨双氢青蒿素的抗癌活性，本研究观察了其对结直肠癌细胞株荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响，现报道如下。1材料与方法11细胞株结直肠癌细胞株LoVo由南方医科大附属南方医院消化病研究所提供。12实验动物SPF级健康BALB/c雌性裸鼠50只，出生46周，体质量2025g，由中科院上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，合格证号：SCXK(沪)20070005;SPF环境下饲养。13药物双氢青蒿素片(DHA)由四川三奇制药有限责任公司生产，批号：071001，以羧甲基纤维素钠作为助溶剂溶解，再取定量混合液加入双氢青蒿素，分别配置成30、60、120g/mL;阳性对照药5氟尿嘧啶(5FU)注射液由上海旭东制药厂提供，批号：080708，以生理盐水配置成20mg/mL，冷藏备用。14动物造模6-7、分组及给药在SPF级实验室无菌环境下，将培养成功的结直肠癌LoVo细胞以胰酶消化后，配置成细胞悬液，细胞浓度为2106个/mL。取细胞悬液05mL，以无菌针管于裸鼠右背部皮下接种，接种工作在30min内完成，定期观察肿瘤接种情况，9d后所有皮下瘤块长至0608cm时，表示动物肿瘤造模成功。再随机分为5组，每组10只，各组标记后称体质量记录。模型对照组灌胃生理盐水02mL/d