同济医院检验科ISO15189体系文件21柯萨奇病毒IgM抗体（COXB-IgM）测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ721第2版标题：柯萨奇病毒IgM抗体（COXB-IgM）测定第7章 第21号第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的：检测血清标本中的抗COXB-IgM抗体。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：柯萨奇病毒IgM抗体测定4. 检测方法：酶免疫分析法。5. 检测原理：应用柯萨奇B1-6病毒抗原包被反应条孔，采用间接酶免疫法测定血清中IgM抗体。6. 试剂：6.1 品牌：购自北京福瑞公司。6.2 包装规格:48人份.6.3 内含物:每盒试剂含以下成分：6.3.1 预包被反应条48孔；6.3

2、.2 酶结合物工作液1瓶（6ml）；6.3.3 20倍浓缩洗涤液1瓶（13ml）；6.3.4 显色剂A 1瓶（3ml）；6.3.5 显色剂B 1瓶（3ml）；6.3.6 阳性对照1支（0.3ml）；6.3.7 阴性对照1支（0.3ml）；6.3.8.终止液1瓶（3ml）；6.3.9 样品稀释液1瓶（3ml）；6.3.10 说明书1份。7. 仪器品牌、型号：BIORAD3550UV酶标仪，测定波长为450nm。8. 操作步骤8.1 打印工作单:8.1.1 打开电脑及打印机电源；8.1.2 双击齐效检验系统 ，登陆工号与密码；8.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息，打开标本申请明细信息查询，打

3、开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。8.1.4 在检验项目处选择COXB-AB执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列被检测标本:根据工作单上的库位号找出相应标本，并按工作单上的顺序排列。8.3 按以下步骤开始操作:8.3.1 按所需人份取出包被板放在板架上，剩余板条放回袋中封口备用8.3.2 用去离子水或蒸馏水将一瓶洗涤液全部稀释至500ML。8.3.3 样本稀释：取400l生理盐水于塑料试管中，在加10l样本混匀。阴、阳对照已经1：40稀释可直接使用。8.3.4 加样：每孔加2滴样本稀释液，分别加10l阴、阳对照和稀释过的样本于各自孔中，留一孔作空白对照。37孵育45分钟。

4、甩干后用稀释洗涤液洗4次（手洗、机洗均可），每次静置片刻，每次甩去洗涤液后都要在面巾纸上拍干。8.3.5 加酶：每孔加2滴酶结合物（除空白对照孔），37孵育30分钟，洗涤拍干。8.3.6 显色：各孔滴加显色剂A、B各1滴，37孵育避光10分钟，每孔滴加终止液1滴。在酶标仪上，测定波长为450nm，参考波长为655nm，测OD值。8.4 结果判定：Cutoff值=02.+阴性对照(低于0.05以0.05计)，样本值大于 Cutoff值者为阳性。8.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。9. 参考范围：阴性。10. 临床意义：10.1 确诊有无柯萨奇病毒感染及感染程度；10.2 急性心肌炎患者的诊断；10.3 优生优育，防止新生儿感染；10.4 柯萨奇病毒的流行病学调查。11. 病人准备、标本要求：血清，脂血、溶血不可使用。12. 注意事项：12.1 温育时，反应板温育时间必须严格控制，洗涤须彻底。12.2 实验前试剂盒置室温30分钟后方