同济医院检验科ISO15189体系文件02甲肝抗体（HAV-IgM）测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ202第2版标题：甲肝抗体（HAV-IgM）测定第2章 第02号第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页1. 目的：检测血清标本中的抗HAV-IgM抗体。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：甲肝抗体测定4. 检测方法：酶免疫分析法。5. 检测原理：采用兔抗-人IgM链包被反应板，加入待测标本，同时加入HAVAg、抗 -HAV-HRP，如待测标本中含有抗-HAV-IgM时，就能与包被兔抗-人IgM链结合，并且与HAVAg、抗-HAV-HRP结合成复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应

2、。6. 试剂：6.1 品牌：科华实业公司。6.2 包装规格：48人份。6.3 内含物：每盒试剂含以下成分：6.3.1 微孔反应条：12孔X4；6.3.2 酶结合物：3.2mlX1瓶；6.3.3 阳性对照：1mlX1瓶；6.3.4 阴性对照：1mlX1瓶；6.3.5 洗涤液 (用前以蒸馏水作25倍稀释)：30mlX1瓶；6.3.6 显色剂A：4.0mlX1瓶；6.3.7 显色剂B：4.0mlX1瓶；6.3.8 终止液：3.5mlX1瓶；6.3.9 HAVAg: 2.2mlX1瓶；6.3.10封片：3片；6.3.11说明书：1份；7 仪器品牌、型号：意大利Alisei全自动酶免分析仪。8 操作步骤

3、：8.1 打印工作单:8.1.1 打开电脑及打印机电源，8.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；8.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。8.1.4 在检验项目处选择HAV执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列待测标本:根据工作单上的库位号从标本架中找出相应标本，并按工作单上的顺序排列在Alisei全自动酶免分析仪的样本架上。8.3 装载试剂：开启Alisei，根据待测标本数量，点击编辑工作列表，出现试剂及酶标板界面。按照屏幕所示放好洗板液，洗针液，标本试管，预稀释管和试剂。8.4 装载酶标板：点击Alis

4、ei界面的装卸反应板按钮进行装载反应板，按项目顺序进行装载。等所有项目酶标板装载完成后，点击开始按钮，机器开始检测。8.5 Alisei分析仪检测参数：试剂空 白阳性对照阴性对照标 本（生理盐水1：1000稀释）单 孔双 孔双 孔单 孔100ul/孔37，20分钟洗涤，洗涤液350ul/孔 5次抗原试剂50ul/孔酶结合物50ul/孔混匀，37，20分钟洗涤，洗涤液350ul/孔 5次A液50ul/孔B液50ul/孔混匀，37，10分钟终止液50ul/孔450/630mn读取OD值8.6 结果：仪器自动记录OD值并可打印测定结果，同时传入LIS中，发送报告详见免疫报告发送程序。 8.7 结果判

5、断：（阳性样品OD值）（阴性对照平均OD值）2.1判断为阳性，否则阴性。阴性对照OD值低于0.05作0.05计算。9. 参考范围：正常人阴性。10 . 临床意义：抗-HAV-IgM在亚临床期即已出现，其滴度在感染后3个月维持1:1000以上，己被公认为早期诊断甲型肝炎的依据。11. 病人准备、标本要求：标本为血清时最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。12.1 使用前试剂应摇匀。12.2 试剂盒应置28中保存。12.3 试剂盒内容物及标本从冷藏环境中取出，在37平衡30分钟后方可使用。12.4 待测标本不可用NaN3防腐。12.5 结果判断须在10分钟内完成。12.6 不同批号的试剂不可混用。12.7 手工操作时，封片