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文档简介
1、dnA勺粗提取与鉴定一、选择题.下列关于DNA勺粗提取与鉴定实验的相关叙述,错误的是()A.可以选择DN蛤量较高的生物组织为材料,如鸡的血细胞B. DNA溶于酒精,且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出C.可以利用嫩肉粉把杂质多糖和RNA去除D.洗涤剂可以瓦解细胞膜,从而获得含有DNA的滤液解析:选C鸡血细胞中含有 DNA可作为提取 DNA勺生物材料,不可选用哺乳动物成熟 的红细胞;DNA溶于酒精,且 NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时DNA解度最小,两者均可将 DNA大量析出;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,可将蛋白质水解,从而除去蛋白质;洗涤剂可以瓦 解细胞膜,从而获得含有 DNA的
2、滤液。. “DNA的粗提取与鉴定”实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水,其作用分别是()A.防止鸡血细胞失水皱缩和稀释NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出B.防止鸡血细胞失水皱缩和溶解DNAC.使鸡血细胞吸水涨破和稀释NaCl溶液至0.14 mol/L 使DNAW出D.使鸡血细胞吸水涨破和溶解DNA解析:选C第一次加蒸储水的目的是使鸡血细胞涨破,释放出核DNA第二次加蒸储水的目的是将 NaCl溶液浓度降低到 0.14 mol/L ,使DNAW出。.某同学用洋葱进行 DNA提取和鉴定实验,操作错误的是()A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B.用
3、蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析:选 A 加入洗涤剂后,搅拌动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作;用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质,可纯化过滤后研磨液中的DNA;加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证 DNA 分子不断裂,保持其完整性;加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。.若从植物细胞中提取DNA发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定 TOC o 1-5 h z 时颜色反应不明显等。其可能的原因是()植物细胞中不含DNA 研磨不充分 过滤不充分冷酒精的量过大A.B.C.D.解
4、析:选D研磨不充分会使细胞核内的 DNA释放不完全,提取的 DNA量变少;过滤不充 分也会导致提取的 DNA量过少;若用于沉淀 DNA的酒精量过少,也会导致 DNA的沉淀量少, 从而影响实验效果。.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,如果实验材料是植物细胞,需要进行研磨并搅拌。 下列相关说法正确的是()A.在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸储水,充分研磨后过滤获取滤液B.加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜C.要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D.先加入洗涤剂,搅拌和研磨后再加入食盐解析:选B提取植物材料中的 DNAM,需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和食盐。 加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜
5、和核膜,以利于DNA的释放,同时要进行充分地搅拌和研磨,使DNA全释放。搅拌时应轻缓、柔和,避免产生大量泡沫,不利于后续操作。.下表是关于DNA的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述,正确的是()选项试齐操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合有利于血液凝固B蒸储水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸储水加入溶解有DNA勺NaCl溶液中析出DNA幺状物D冷却的酒精加入过滤后的NaCl溶液中产生特定的颜色反应解析:选C在DNA勺粗提取与鉴定实验中,柠檬酸钠可以防止血液凝固;鸡血中加入蒸储水可以使细胞膜和核膜破裂; DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在物质的量浓度 为0.14 mol/L
6、的NaCl溶液中溶解度最低,有利于 DNAW出;DNA溶于酒精,而蛋白质溶于 冷却的酒精可以获得较纯的 DNA DNAiM二苯胺(沸水浴加热)呈蓝色。. DNA粗提取与鉴定实验中有以下过滤:过滤用蒸储水稀释过的鸡血细胞液;过滤含黏稠物的0.14 mol/L 的NaCl溶液;过滤溶解有 DNA勺2 mol/L的NaCl溶液,以上过滤 分别为了获得()A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B.含核物质的滤液、滤液中DNA占稠物、含DNA的滤液C.含核物质的滤液、滤液中DNA稠物、纱布上的 DNAD.含较纯的DN屣液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液解析:选A用蒸储水稀释鸡血细胞液,使血细
7、胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质, 此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理,方能得到较纯的DNA DNA& 0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,呈丝状黏稠物,经过滤留在纱布上。.下列关于“ DNA粗提取与鉴定实验”白叙述,正确的是()A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增大DNAft NaCl溶液中的溶解度B.将DNA状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA勺提取D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DN顺得量减少解析:选C 洗涤剂能瓦解细胞膜,但对 DNA在NaCl溶液中的溶解度无影响;DNA丝状物需先溶解在适
8、宜浓度的 NaCl溶液中,然后加入二苯胺试剂,混合均匀后沸水浴加热,待冷却后观察到溶液变蓝;常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使DNA水解而影响DNA的提取;用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对DNA分子的破坏,有利于 DN册子的提取。.下列与析出DNA稠物有关的叙述,错误的是 ()A.操作时缓缓滴加蒸储水,降低DNA的溶解度B.在操作时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整C.加蒸储水可同时降低 DN解口蛋白质的溶解度,两者均可析出D.当丝状黏稠物不再增加时,NaCl溶液的物质的量浓度约等于0.14 mol/L解析:选C向含有DNA勺溶液中加入蒸储水后,NaCl溶液的浓度会变小,当 NaCl溶
9、液的物质的量浓度为 0.14 mol/L 时,DNA溶解度最小,而此日蛋白质溶解在NaCl溶液中。.在利用鸡血进行“ DNA勺粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是()A.用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L ,滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,可去除部分杂质C.将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同解析:选B用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L后,过滤并收集析出物;利用二 苯胺试剂鉴定 DNA时,需沸水浴加热几分钟,才呈蓝色;用菜花替代鸡血作为实验材料,需 加入洗
10、涤剂和食盐,并对材料进行研磨。调节NaCl溶液浓度改变不同物质在其中的溶解度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质。二、非选择题.如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答:A2NaCl溶泄A2NaCl溶泄冷却的95%的酒精从鸡(1)从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是(2)图A表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取 (填“滤液”或“析出物”)进行下一步实验;图B表示的相关操作过程中,加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是 ;图 C表示在滤液中加入冷却的95%的酒精,其目的是(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA可?加 溶液,结果丝状物被染成绿色。(4)图D中
11、a试管为对照组,b试管为实验组。a试管现象 ; b试管现象。在沸水中加热的目的是 ,同时说明DNA寸高温有较强的 。a试管在实验中的作用是 。b试管中溶液颜色的变化程度主要与 有关。解析:图A表示释放核物质后进行过滤的过程,纱布上的过滤物主要是细胞膜、核膜的碎片等杂质,而 DNAi要存在于下面的滤液中,所以过滤后应取滤液进行下一步实验。DNA3溶于冷酒精,而其他一些物质可以溶于冷酒精,从而可进一步提纯 DNA甲基绿为比较常用的 细胞核染色剂,染色后细胞核中染色体呈绿色,可以用来鉴定 DNA答案:(1)鸡血细胞核中DNA含量丰富,材料易得向鸡血细胞溶液中加入蒸储水,并搅拌(2)滤液溶解DNA分子
12、提取杂质更少的 DNA使去除脂溶性杂质)(3)甲基绿 (4) 溶液不变蓝 溶液变蓝 加快颜色反应速度耐受性对照加入DNA丝状物)的多少.如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。洗挣切成小块口 研磨研磨液比流液c(1)图中实验材料 A可以是 等,研磨前加入的 B应该是。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后, 再向滤液中加入 2 mol/L的NaCl溶液的目的是 ,再过滤得到滤液 D ,向滤液 D中加入蒸储水的目的是(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中, 将含有一定杂质的 DNA状物分别放入体积为 2 mL的4种溶液中,经搅拌后过滤,获得下表所示的4种滤液,含DNA少的是滤液 。1研磨液中搅
13、拌研磨后过滤滤?取E22 mol/L 的 NaCl溶液中搅拌后过滤滤?夜F30.14 mol/L 的 NaCl搅拌后过滤滤?夜G溶液中4冷却的95%勺酒精溶液中搅拌后过滤滤?夜H(4)DNA鉴定的原理是 。解析:选用洋葱、菜花等植物材料提取DNA时,要在切碎的材料中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨;DNAft 2 mol/L的NaCl溶液中溶解度较高,而在 0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小。向滤液中加入 2 mol/L 的NaCl溶液可以使 DNAff,过滤除去 不溶的杂质。向滤液中加入蒸储水可降低NaCl溶液的浓度,使 DNA析出,除去溶解在低盐溶液中的杂质;DNM
14、溶于冷酒精,可利用这一原理进一步提纯DNA鉴定DNA的原理是在沸水浴的条件下,DNAM二苯胺会被染成蓝色。答案:(1)洋葱、菜花 洗涤剂和食盐(2)使DNAff 使DNA第解度下BI而沉淀)析出H(4)在沸水浴条件下,DNAM二苯胺会被染成蓝色.临床上常利用血液中的DNA进行身份鉴定、基因诊断等,但血液中DNA含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的DNA科研人员以大鼠血液为材料,尝试比较两种提取 DNA的方法,主要操作如下:实验结果(表中O%反映溶液中核酸的浓度,OD80反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度,理论上,纯 DNA的 OD60/OQ80 为 1.8):提取方法ODe0OED80OD60
15、/OD280DN贻量(g/mL 血液)方法A0.3040.1881.6238方法B0.6120.4201.4676.5试回答下列问题:(1)补全相关实验步骤: ,。(2) 实验中利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是DNA总是很少,这是因为(3)DNA总是很少,这是因为(4)两种方法中,OD60/OD280均低于1.8,主要原因是 ;其中方法 A的0%/0陛80更接近1.8,原因是 。(5)根据实验结果,从人血液中提取DNAM应优先选择方法 (填“A”或B”)。解析:(1)DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度最大,应取上清液;DNA不溶于酒精,细胞中的某些蛋白质溶于酒精,为沉淀物。(2)实验中利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是DNA不溶于异丙醇,有些杂质溶于异丙醇。(3)与用鸡血作实验材料相比,从哺乳动物的血液中提取的DNA总是很少,这是因为哺乳动物血液中红细胞无细胞核,只有白细胞内有DNA (4)两种方法中OD60/OD280均低于1.8 ,主要原因是溶液中混有较多的蛋白质;其中方法A的OD60/OD280更接近1.8,原因是蛋白酶 K能催化部分蛋白质的水解
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