离子色谱操作教程

1、离子色谱操作程序、准备工作：去离子水：必须准备足量的去离子水淋洗液：配制好要用的淋洗液配制标准溶液：提前准备好预分析离子的标准溶液（均用去离子水配制）样品：进样前要用m的过滤膜过滤检查淋洗液的液面高度，不应低于200ml、 开关机：1、开机：打开N2保护气，调钢瓶分压在之间，淋洗液前仪器压力表3-6psi之 间；打开IC、PC电源开关；打开仪器软件开关、开泵；开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器；检验仪器是否正常：压力1300-1500psi以下，一般阳离子 1140-1160psi之间，阴离子在1140-1180之间；系统压力的波动应 小于10psi；阴离子的背景电导应低于2

2、08；阳离子的背景电导 应低于10；内部无泄漏；抑制器、废液出口有连续气泡，泵出口 无气泡2、关机：关抑制器关泵关软件关保护气关电源离子色谱程序设定方法1、打开色谱工作站，点击计算机代码，双击与控制面板2、确认各模块的“connected”图标均为绿色后，点击红色正方形图标(stop flow)和 绿色三角图标(continue)，开泵(pump on/off)，设定流速3、点击蓝色圆形图标(acquisition on/off)，选ECD-ECD_1，选择抑制器类型，输入淋 洗液浓度，点击“确定”开始采集基线(如果这次和上次用的同一个系统，则可以直接连接后开泵，点击蓝色图标采集基线4、阳离子

3、分析：柱：CS12A抑制器：CAES淋洗液：20mM MSA淋洗液流量：min测试电 流：65mA阴离子分析：柱：AS14抑制器：ASRS_4mm淋洗液：Na2CO3/ NaHCO3淋洗液流量： min测试电流：20mA5、设定运行程序(Program File)依次点击file和new，选择program file，点击“OK”，点击“下一步”，确认泵 的工作方式(isocratic)、淋洗液通道A、高/低压极限(设为0-3000psi)和流 速是否正确，点击“下一步”。选择手动进样“manual”，进样时间设为30s将 acquisition time调整至0-18min,点击“下一步”，

4、确认以下参数：采样频率 (5Hz),自动调零“Yes”池温柱温均为“35C”选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，电流为推荐值，点击“下一步”选择 “review the program in a new window”，点击“完成”在程序的第一行添加一下提示信息:message 请进样”,删除”的“inject”(注 意：绿色字体为注释信息，不起作用) 存盘退出(推荐存入独立的“program”子目录中)6、建立方法文件（mothed file）依次点击file和new,选择method file依次点击file和save as，存盘退出（推荐存入独立的“method”子目录中）7、建立样品表（s

5、equence）依次点击file和new，选择sequence （using wizard），点击“OK”，点击“下一步” （连续两次次）填入未知样的数量“number of”和每个样的平行测定次数“ injection per”，点击“apply”，点击“下一步”，填入标准样品的数量“number of”和每个样 的平行测定次数“injection per”，点击“apply”，点击“下一步”，选择正确的程 序文件，点击“open”，选择正确的方法文件，点击open”，选择方法文件和程序文 件，选择正确的报告文件，点击“下一步”，为这个sequence起名“sequence name”， 点

6、击“完成”8、运行标准样品点击蓝色圆形图标（acquisition on/off），选择“yes”，停止采集基线依次点击batch和starto点击“add”，打开需要运行的样品表点击“ready check”，如果样品表没有错误，将出现“ready check was successful” 提示，点击“确定”点击“start”，注入样品，点击“确定”8、处理标准曲线（以多点校正为例）依次点击file和browser，双击需要处理的标准样品文件（第一个标准点），依次点击 view 和 QNT-Editer点击屏幕左下角“General”，在“Dimension of”处输入浓度单位“mg/L

7、”点击相邻的“Detection，设定最小峰面积为。点击键盘“1”，选择“是（Y）”将新生成的 “Minimum Area” 重新选为 “Inhibit Integration”，按 “Enter”键点击键盘的“【”后，将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处，在min的第三行输 入屏幕左下角显示的时间“”点击相邻的“Peak Table”选择Edit、Autogenerate Peaktable，依次点击OK和确定,在“Peak Name”下顺序输入离子名称，注意：定性分析到此结束。如需进行单点校正,直接执行下一步。在“”下“Lin”处双击左键，选择“Linear with Offset”，点

8、击“OK”， 在“Loff”处点击右键，从弹出的对话框中选择“Fill Column”点击相邻的“Amount Table”，注意：如果进行单点校正，在“Amount mg/L”处输入 各个组分的浓度，存盘退出在 “Amount mg/L”处点击右键，依次选择 Columns 和 Edit Amount Columns。点击 “Auto-Generate”，按 “Apply”键，按 “OK” 键退出在“Amount”下输入各个组分的标准点浓度，屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线, 点击“Integration”图标，选择“Calibration”，查标准曲线合格后，存盘退出离子色谱的基本操作

9、一、淋洗液的配制：阳离子20mM的MSA （甲磺酸）。配制：（分析纯即可）溶解在2升的淋洗液瓶中。注意配制过程中MSA要用的滤膜过滤，以防止堵塞管路。阴离子 。配制：称取俱叫NaHC03（分析纯即可）定容于1升的容量瓶中，配成350 mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液母液（可保留半年），用前需稀释100倍，即 取20ml母液于2升的淋洗瓶中。注意：淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。二、样品前处理过滤：r m, R m过滤膜稀释：未知样品稀释100倍基体消除：去除样品中所包含的，有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分（如：重金属离子、有机大分子）去除样品中所包含的，有可

10、能干扰目标离子测定的成分（如：高离子强度基体）三、SRS使用注意事项淋洗液中含有机溶剂时，使用外接水或者化学抑制；尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命；抑制器与泵同时开关；或当泵压1000psi以上在开抑制器每周至少开机一次，保持抑制器活性；长期不用应封存抑制器；重新启用前需要水化抑制器，具体操作如下：ASRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGEN IN 处注入 5mL H2OCSRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGEN IN 处注入 5mL H2O完成上述操作后，将抑制器平放30分钟。四、阴、阳离子色谱柱的更换：准备

11、工作：要在换柱之前开泵和抑制器洗柱，至少30min，直到仪器稳定为止，因为 仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。更换系统：更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器；接通电源，停泵，设置淋洗液存 量；打开保护柱进口的接头，开泵；排气泡，调节流速；清洗管路，用试纸检验流出 溶液的pH值，与分离柱要求的淋洗液一致后停泵；拧紧保护柱进口的接头，进行正 常操作。注意：每个接口的正确对应，保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向，保护柱箭头向 下、色谱柱箭头向上。抑制器连接时注意阴阳离子的不同，阴离子的regen in/out 均为平头接口，而阳离子则只有regen out为平头接口，注意更换。换下来的柱子及 抑制器一

12、定要密封好，已保持内部有溶液，防止内部溶液干掉，阴离子的抑制器regen in/out用专用堵头密封。柱子装好后先开泵看是否漏水（气），再装上外面的两块面板。五、排气泡：如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。具体操作：首先开泵，将注射器插入右侧主泵，旋松主泵的旋钮，此时有液体从泵中 流出，流到8ml左右关闭泵，拧紧主泵旋钮，取出注射器，弹出注射器内气泡，然后 将注射器插回主泵，打开左侧副泵旋钮后，再缓慢打开主泵旋钮，慢慢将注射器内液 体推入泵内，从副泵流出，旋紧两个泵的旋钮。六、测柱头压：要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。正常的柱头压力值：过六通阀到保护柱前正常压力100psi以

13、下；过保护柱后压力小于500-600psi ；过分析柱后压力小于1500psi；系统正常压力1300-1500psi以下。七、分离柱的存储与清洗分离柱的储存：在存储前用淋洗液正常运行至少10min，取下保护柱和分离柱，用死接头将分离柱/保护柱两端封堵 分离柱的清洗：按清洗液一色谱柱一保护柱的流路进行清洗，流速为min；清洗程序 及时间为：去离子水-15min，清洗液-60min，去离子水-15min，淋洗液-30min 清洗液的类型阴离子柱：低价态亲水离子污染(常用一一X10倍淋洗液高价态疏水离子污染 80%乙腈/20% 200mM NaCl(用HCl调节pH=金属离子污染一一草酸阳离子柱高价阳离子/酸溶性污染一一 10mM HCl(15min)1M HCl(60min)10mM HCl(15min)疏水性阳离子/有机污染 10% 100mM HCl/ 90%乙腈(30min)八、抑制器的存储与清洗抑制器的存储：抑制器的清洗：以min的流速，按清洗液-ELUENT IN-ELUENTOUT-REGEN