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1、 /7cdRE饥康堪因DMA片眄细苗A阳】转皐因撫作流程图威純复制获得冥駅旖巩阳选亓件轆R的顶越马怜翼cdRE饥康堪因DMA片眄细苗A阳】转皐因撫作流程图威純复制获得冥駅旖巩阳选亓件轆R的顶越马怜翼wij旦申.一”引雷对DNA引物对A.PiAACTGAAATGTAGCTATCP2TTAAGTCCATTACTCTXG引物对BGTCCGACTAGTGGCTGTGAGCTGGCGTTTAGCCTCG表1引物对序列表lllMUlllllilLlLllililUlllMilMLm-:“厲舟T一仰膘讯祁IWiiililllIIIIIIHI舸卩1亠換板掃律-Itillllllllll.lll州山!1血!壯山

2、0JMW:N图艺引物对与摸板结合示意图表2几种限制酶识别序列及切割位点表限制酶AluIa?KIPstTSmaI切割位点AGiCTTCtGAG;AATTCCTTAAfGCTGCAIGGtACGTCCCCJGGGGGGfCCC请根据以上图表回答下列问题。(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物TOC o 1-5 h z体内的DNA聚合酶,其最主要的特点。(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度?。(3)图1步骤所用的DNA连接酶对

3、所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?。(4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤转基因所用的细菌B通常为(5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。采用EcoRI和PstI酶切,得到种DNA片断。采用EcoRI和SmaI酶切,得到种DNA片断。【解析】此题信息量特别大,学生看懂所有信息所花的时间比较长,有相当一部分考生往往看到一半心里就犯怵,感觉题目肯定很难,结果就没耐心看题干直接就开始答题了,还有一些不肯轻易放弃的学生把题干中的图、表看了2、3遍,还是没有把握住真正有用、关键的信息。

4、其实这个题看似庞大,如果把握住了关键的有用信息,还是能够一一解决的。EcoRI酶、AluI酶把目的基因切出了一个黏性末端和一个平末端,SmaI酶、EcoRI酶把制粒切出一个相同的粘性末端和一个平末端,把质粒切成了一长一短两个片段,丢失了一个短的片段,剩下的长片段与目的基因形成了一个重组质粒,在重组质粒中保存了EcoRI酶的识别序列,SmaI酶的识别序列已经被破坏,不存在了,而PstI酶的特定序列在切割和拼接过程中保存完整,因此采用EcoRI和PstI酶切,得到2种DNA片断。采用EcoRI和SmaI酶切,只能得到1种DNA片断。(答案:(1)耐高温2)引物对B(3)否(4)农杆菌(5)21)Inthemoderntime,mainlyinsmallandmedium-sizedenterprises,Foshansteelindustryisthespeeddevelopmentbyleapsandbounds,andhavemaderemarkableachievementsinupstream,butalsofacefactorsofproductionsuchasenergy,ra

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