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文档简介

1、试验（HA）和测血液或卵黄中禽流感和新城疫等抗体的血凝抑制试验写出来，以供朋友参考，不当之处，尚请斧正。血凝试验一、血凝原理：正粘病毒（流感）和副粘病毒（新城疫）EDS病毒等有血凝素，能够使家禽的血细胞凝集。冠状病毒得经胰蛋白酶处理才能较好地凝集。二、抗体监测原理：血凝抑制（）试验。抗体监测。利用抗体来中和病毒使血凝能力不断下降。三、凝和不凝的判断。病毒与家禽的（有核）红细胞结合后产生凝集，红细胞带作用下沉淀下去，是为不凝集。（最后都沉）的是凝）五、血凝试验的作用：1、判断有无病毒。（4 2 为 一标准）2、疫苗的凝集价。六、对血细胞要求：SPF 鸡血最好，健康未免疫鸡次之，免疫健康鸡最差（大

2、量用），病鸡坚决不用。大量使用的免疫健康鸡血应多洗几遍。芬兰七、采血方法：心脏采血 1、垂直采血 2、水平采血（鸡采不死）八、采血洗血步骤：1、取无菌10ml注射器加入几粒到十几粒枸橼酸钠（防凝血） ，抽取56ml生理盐水2、垂直或水平采血，针头能碰到跳动的心脏后再向前进几毫米，出现回血，轻抽注射器即可3、将血放入离心管，放入离心机中，加另一全是水的起平衡作用的离心管，使离心机从 0 逐渐加到 15002000 转，10 15 分钟，停机，取出离心管，用吸管吸取上清液及一层薄薄的白细胞再加生理盐水并利用吸管的水流将红细胞配成 0.5 备用。九、血凝测定步骤：在 96（812）孔微量板上以 12

3、 排（828 个）为单位，用 8 道（芬兰产18002400 元每个）或单道微量移液器每孔加 25 微升生理盐水，在每组的第一孔加 25 微升待测液体，然后向后倍比稀释，弃去最后一滴于盛废液的容器中。再每孔中加入配好的红细胞液 25 微升，在振荡器上作用2 分钟。放入37恒温 2530 5 加液要压到底）更换吸头)4 个病毒单位（注意体积换算）例 1ml2的 10 方抗原就需加生理盐水 256ml。以用和需要的。十一、采血制血清：1、翅静脉、皮肤上的口要与静脉上的口要一致，否则出血包。（与兔耳静脉不一样）2、输液管 、接血自流，然后封口，血清自出（需要时挤一下），也可用离心机低速离心一下。测血

4、清中的抗体和测卵黄中的抗体原理一样，这是测的卵黄抗体十二、抗体监测步骤：1、在 96 孔板上每孔加入 25 微升生理盐水2、加入 4 单位的标准抗原或相近品3、在第一孔加入待测血清或卵黄液，倍比稀释弃去最后一滴4、各加入一滴配好的红细胞液5、振荡 2 分钟放入 37恒温箱中6、2530 分看结果，从左始，以完全沉淀为准计数，即 2 的几次方。另外有的专家将 3 和 2 对调，结果一样。同时要做对照。抗体监测十三、数据分析：2 的 8 次方为一个标准，小鸡可 5 或 ，但大鸡不行，就是该做苗了。如果数相差大，如 2 的 3 次方与 2 的 11 次方同在，就有可能是野毒感染了。有的抗体为，可能原因是苗没有发挥作用、鸡不行或苗有问题的。十四、抗体监测一是准确，提升自己水平，提升门市档次；二种鸡场大量

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