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文档简介
1、1The copy number拷贝数:在一个细菌细胞中通常能够找到的 某个质粒的分子数.2Plasmid incompatibility 质粒的不相容性:在没有选择压力的 情况下,两种质粒不能共存于同一个宿主细胞内。3 Prophage 前噬菌体:噬菌体DNA整合到染色体上的一种形 式。4 Lysogen溶源菌:携带有前噬菌体的细菌。the cos sites 柯斯位点:噬菌体DNA分子两5末端互补的由12个核苷酸组成的单链粘性末端序列。Klenow fragment: E.coli DNA聚合酶I经部分水解生成的,位 于其C末端的,保留了 DNA聚合酶I的5 -3 聚合酶和3 -5 外切酶
2、活性,但缺少完整酶的5Z-3Z外切酶活8性的片段。7Isoschizomers (同裂酶):来源于不同物种,但能识别相同DNA序列的限制性内切酶,切割位点可以相同也可以不同。8Neoschizomers (异功酶,新裂酶):来源于不同物种,能识别相 同DNA序列,但切割方式不同的限制性内切酶。9Star activity (星号活性):在极端条件,如pH值升高或低离子 强度,限制性内切酶能够切割那些与定义识别序列相似但不完全 相同的序列的能力。10Restriction map (限制性图谱):描述染色体上各种不同限制 性内切酶识别位点之间距离和顺序的图谱。 11 Linkers (接头):指
3、用化学方法合成的一段平末端的双链寡核苷酸短片段,具有一个或数个限制性内切酶识别位点。12 Adapters (衔接体):是一类人工合成的一头具某种限制性内切 酶粘性末端,另一头为平末端的双链寡核苷酸短片段。当它的平 末端与平末端的外源 DNA 片段连接之后,使后者成为具粘性末 端的新的 DNA 分子,易于重组连接。13 transformation (转化):细菌捕获外源DNA而获得新的遗传信息的过程。凡外源DNA导入细胞的过程都可泛称为转化。14 transduction (转导):以病毒为载体(对细菌而言则是噬菌体) 把遗传物质从一种细胞转移到另一种细胞的过程。15 transfectio
4、n (转染):真核细胞捕获外源DNA而获得新的遗传 信息的过程。16competent (感受态细胞):经过某种形式的物理和(或)化学 处理,以提高其吸收DNA能力的细胞。17Blue / white screening (蓝/白斑筛选):有的载体中有大肠 杆菌B -半乳糖苷酶的基因片段lacZ,携带有lacZ啲载体转化 进入到lacZ-的宿主细胞后,在含有底物5-溴-4-氯3-吲哚-B -D- 半乳糖苷(X-gal )和诱导物异丙基硫代半乳糖苷(IPTG )的培 养基平板上形成蓝色的菌落或菌斑。有外源DNA插入的重组载 体转化后,在平板上则形成白色的菌落或菌斑。该筛选方法称为 蓝/白斑筛选。
5、18 Spi phenotype Selection (Spi表型筛选):九噬菌体通常不能感染拥有整合形式P2噬菌体的大肠杆菌,而有些九克隆载体上,因为有新的DNA插入导致九噬菌体从Spi+变成Spi-,使得重组 子能够感染携带有P2前噬菌体的细胞因此,利用这个原理来筛 选重组子和非重组子。19 Phagemids (噬菌体质粒):将M13基因组的一部分和质粒DNA结合在一起构建的一种新型载体。20 multiple cloning sites (MCS)/polylinkers: 段短的 DNA 序 列,带有许多不同的限制性内切酶的识别序列,方便外源基因的 克隆。21入Insertion v
6、ectors(X插入载体):去掉九噬菌体基因组中 非必需片段而再连接起来构建的载体,载体上至少包含一个单酶 切位点,方便外源基因的克隆。22九Replacement vectors (X置换载体):X噬菌体载体上具有被某种克隆所需的限制性内切酶识别的两个位点,而在这两个位点 之间的DNA片段将会被外源的DNA所置换,从而实现外源基 因的克隆。23cosmid (柯斯质粒):人工构建的带有入噬菌体粘性末端cos位 点的一类质粒。这类质粒兼具入噬菌体和质粒的优越性,又具有 高容量的克隆能力。24genomic library (基因组文库):某一特定生物的很多克隆的 集合,其中克隆的数目足够大,使
7、该生物的每一个基因都可能包 含进去。 25yeast episomal plasmids(YEps,酵母游离型质粒):从2um质粒中获得的载体 26shuttle vectors (穿梭载体).含有真核和原核细胞中的信号(如复制信号),能在两种不同类型的的细胞中复制的载体 27 Yeast integrative plasmids (YIps, 酵母整合型质粒):携带一个酵母基因,可以整合到酵母染色体上的细菌质粒。 28Yeast replicative plasmids (YRps, 酵母复制型质粒):携带有包含一个复制起始位点的染色体DNA序列,可以作为一个独立的质粒进行复制扩增的质粒载体
8、。 29YAC (酵母人工染色体):利用酿酒酵母的染色体的复制元件构建的,包含着丝粒 端粒 复制起始位点的,可以克隆大片段DNA 序列的载体。 30 Ti质粒:根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的,含有毒性区T-DNA序列和宿主特异性序列的,其中T-DNA 可以重组到宿主染色体上的环形双链DNA分子。31 ES cells (胚胎干细胞):胚胎干细胞是早期胚胎(原肠胚期 之前)或原始性腺种分离出来的一类具有体外培养无限增殖、自 我更新和多向分化的特性及形成各种组织器官的潜能的细胞。32 cDNA libraries ( cDNA 文库):以 mRNA 为模板,经反转录酶催化,在体外反
9、转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质 粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的 cDNA 文库。 34 shotgun approach (鸟枪法):先将DNA分子处理成随即机小片段,再对各小片段逐一测序,然后进行序列组装以得到完整的DNA 序列的方法。 35 clone contig approach (克隆重叠群法):构建 DNA 片段的克隆重叠系列,组装成染色体的特定重叠群,建立起完整的 DNA序列。 36 chromosome walking (染色体步查):用于组装克隆重叠群的技术。从
10、克隆文库中随机选择一个克隆,进行标记后,将它作为杂交探针测试文库中其他克隆,与探针有重叠序列的克隆能够给出杂交信号。从这些重叠克隆中挑选一个,并进行标记,开始第二轮的探测筛选。逐渐地,克隆重叠群被一点点地扩展出来。 36 Restriction fragment length polymorphisms (RFLPs, 限制性片段长度多态性):用限制性内切酶特异性切割 DNA 链,由于DNA 的一个“点”上的变异所造成的能切与不能切两种状况,可产生不同长度的片段(等位片段)。37 Short tandem repeats (STRs,短串联重复序列)/microsatellite(DNA):由
11、较短的重复序列组成,重复序列的长度从1到13个 核苷酸不等,通常重复 520 次。38 Open reading frame (ORF, 开放阅读框/可译框):一系列三联 体核苷酸,从起始密码子(通常是ATG,但并不总是)开始,结束于终止密码子(在大多数基因组中是 TAA、TAG、TGA)。 39 Northern hybridization:它是将RNA电泳后转移到特定的膜 上,并利用探针,通过核酸杂交检测特异mRNA的表达情况及 其分子大小的技术方法。Rapid amplification of cDNA ends (RACE) :通过 PCR 进行 cDNA末端快速克隆,可以鉴定RNA分
12、子5 and 3末端 的 技术。Gel retardation of DNA-protein complexes(DNA-蛋白质复合物的凝胶阻滞):利用限制性内切酶对DNA分子进行处理,再将 处理后的小片段与调节蛋白混合,由于调节蛋白和相应DNA序 列间的特异性结合使得序列在凝胶电泳上运动速度变慢而得到分离的技术。Reporter genes (报告基因):RepoBeHBIBnoWnil screenable marker genes是一种编码可用简单经济的方法就可 进行检测的蛋白质或酶的基因。expression vectors (表达载体):在克隆载体基本骨架的基 础上增加启动子、RBS、终止子等表达元件,使目的基因能够表达出重组蛋白的的载体。44fusi on protei n:在目的蛋白基因上游或下游连接上一段核苷!
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