模块1-2：超声波提取香菇多糖课件

1、模块1-2 超声波提取香菇多糖提取情景视野拓展视野拓展超声波提取技术 超声波提取技术是近年来应用到中草药有效成份提取分离的一种最新的较为成熟的手段提取情景超声波提取技术超声波在溶剂和样品之间产生声波空化作用，使固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率。 提取情景超声波提取的原理 超声波在物质介质中的相互作用效应可分为热效应、空化效应和机械传质效应。超声波的热效应、机械传质作用及空化作用成为超声技术在提取应用中的三大理论依据。 1 超声波的热 效 应 2超声波的机械 效 应 3超声波的空化 效 应 提取情景超声波萃取对溶剂和目标萃取物的性质（如极性）关

2、系不大。因此，可供选择的萃取溶剂种类多、目标萃取物范围广泛。 减少能耗，由于超声萃取无需加热或加热温度低，萃取时间短，因此大大降低能耗。 药材原料处理量大，成倍或数倍提高，且杂质少，有效成分易于分离、净化。 萃取工艺成本低，综合经济效益显著 超声波具有一定的杀菌作用，保证萃取液不易变质。 提取情景真菌多糖生产技术提取情景多糖来源大致分为植物来源多糖、动物来源多糖、海藻来源多糖和微生物来源多糖 即细菌产生的多糖和真菌产生的多糖。三、超声波法提取香菇多糖材料准备操作流程记录要点超声波法提取香菇多糖 关键技术教师讲解 提取情景材料准备 干香菇，蒸馏水； 电热恒温鼓风干燥箱 组织粉碎机 圆底烧瓶，铁架

3、台，温度计 超声波发生器（带加热功能） 真空泵，漏斗，滤纸，滤布，烧杯，量筒，玻璃棒等提取情景操作流程香菇预先烘干称取干香菇15克粉碎圆底烧瓶200ml热水70超声波发生器（水预热在60左右）提取45min（中间停顿2次，每次5min）过滤滤渣等滤液体积热水70提取30min（中间超声波停2次，每次5min）过滤合并滤液抽滤滤液量体积标识贮藏备用提取情景多糖提取液中蛋白质的脱去方法 天然多糖提取后，往往提取液中含有大量杂物，其中蛋白质所占份额较大，必须首先去除，常用方法有Sevag法、三氯乙酸法、氯化钠法、氯化钙法、盐酸法、木瓜蛋白酶法以及两种方法之间的联合方法。实验研究时常以糖保留率和蛋白去

4、除率为观测指标，各种参数因糖的来源不同需要适当调整。教师讲解提取情景Sevag法 1利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，向香菇多糖浓缩液中加入其体积1/4的氯仿和 1/20的正丁醇，在分液漏斗中振荡20min，静置分层，将下层的氯仿和正丁醇放出，取上清液重复以上操作2次，得脱蛋白多糖液。 三氯乙酸法 2多糖溶液加入1/5体积10的三氯乙酸溶液，磁力搅拌30min，离心去除沉淀物，用3倍体积的95的乙醇沉淀，5000r/min离心15min，沉淀加原来多糖溶液体积的1/5水溶解，加入1/5体积 10三氯乙酸溶液，重复处理 3次，得脱蛋白多糖液。 提取情景低温酸碱法 6将多糖水浸提液的温度

5、降至4，然后加入有机酸，调整料液的酸碱度pH值为3.5-4.6，混均，再此4温度下作用1.5小时，5 000r/min离心15min，离心取上清液，再用NaOH调整pH值为7.0，再将料液浓缩，得脱蛋白多糖液。 木瓜蛋白酶法 7取10mg/mL多糖溶液100mL，加入 0.01g木瓜蛋白酶，在 pH6.4条件下，于 60酶解 2h，沸水浴5min灭酶，冷却后，5 000r/min离心去变性酶沉淀。滤液浓缩至33mL左右，加 95%乙醇100mL，沉淀 24h后离心，弃上层清液，醇沉物水溶，得脱蛋白多糖液。 提取情景氯化钙法 8将多糖浓缩液的pH值调至89，加热至85，加入氯化钙使浓度达5%(w

6、/v)，搅拌，冷却，过滤，得脱蛋白多糖液。酶法-Sevag联合法 9多糖溶液中加入1%的木瓜蛋白酶(w/w多糖量)，在 pH6.4条件下，于 60酶解2h，5000r/min离心 20min，取上清液，再采用上述Sevag法脱蛋白。 三氯乙酸-Sevag联合法 10多糖溶液中加入一定体积三氯乙酸，使其终浓度为0.5%，混匀后于4冰箱静置过夜，次日5000r/min离心15min，取上清液，再采用上述Sevag法脱蛋白。 提取情景水溶性多糖与脂溶性多糖区别，以及存在原料举例？香菇多糖的主要成分是什么，如何脱蛋白？如何将实验室的提取装置与企业生产相衔接？提取情景课后问题讨论视野拓展 实训操作是理论

7、联系实际的重要环节，是衡量实训效果的重要依据。实训报告必须在科学实训的基础上进行，撰写应该体现完整性、规范性、正确性、有效性。 报告的结构实训报告汇报注意事项 如何撰写实训任务完成汇报提取情景报告的结构1）题目及署名 强调实训题目，要求用一句话点明所要研究问题，可以对实训指导书上的题目进行修改。题目下面署上操作者姓名、班级和专业，以示文责自负。2）前言 要求学生通过查阅相关资料和文献写出此次实训验的背景、目的和意义，以及要解决的问题。明确实训关键操作技能，文字力求简明扼要，只要说明问题即行，不必多加铺叙。3）材料及方法 要求学生掌握相关实训材料的配制方法和预处理技术。简明扼要地写出实验技术流程

8、路线，既尊重实训指导内容，又参考自己查阅的相关文献作相应的修改，力求达到最佳的实训目的与实验成果。 提取情景4）结果与分析 按照上述的实验技术流程图路线，得出的实验结果，力求做到有理有据，准确可靠。并且，通过查阅资料对自己的实验结果加以分析（即使实验失败，也要说明失败原因，为下次实验总结经验教训），在对实验结果进行分析后，还有必要进行更为深人的讨论，如对实验结果的理论分析，对操作方法的科学性与局限性，实验结果的可靠程度与适用范围等等作进一步阐述， 同时，大胆地提出对实验的改进意见和质疑等。 另外，可以对实训课的组织与安排提出建议，以便老师在同类实训教学中改进。5）致谢 致谢对象应是对整个实训操

9、作过程有实质性帮助的人，主要是实训合作伙伴，以及实训教辅人员，并应写出被致谢者。提取情景汇报注意事项 1）可读性 为了便于传播和交流，报告的表述应具有可读性。语言阐述必须精确、通俗，在不损害规范性的前提下，尽可能使用简洁的语言。专门的名词术语，可以用，但不能故弄玄虚。文字切忌带个人色彩。一般不采用比喻、拟人、夸张等修辞手法；不可把日常概念当作科学概念，不宜采用工作经验总结式的文字。2）操作路线流程图 实训时操作路线一般最好以流程图的形式进行书写，这样在操作时看起来比较方便，一般文字不要太详细，但也不能过于笼统，让别人无法“照方抓药”，但关键点最好越详细越好。 提取情景通常实训流程图可以参考下面格式：姜辣素产品工艺根据不同的用途，姜辣素的生产工艺略有不同，但总的路线如下： 提取液处理（低压浓缩回收乙醇，水稀释浓缩物，低温静置待分层，取下层沉淀浸膏，用-CD包络）提取前处理（生姜净洗、去皮、切片、烘干）挥发油去除（4倍体积水（ml/