从杂交育种到基因工程

从杂杂交交育育种种到到基基因因工工程程第6章欢迎迎光光临临指指导导！！单倍倍体体育育种种多倍倍体体育育种种杂交交育育种种诱变变育育种种生物物育育种种能合合成成水水母母荧荧光光蛋蛋白白的的荧荧光光兔兔普通通棉棉能产产生生苏苏云云金金芽芽孢孢杆杆菌菌毒毒蛋蛋白白的的抗抗虫虫棉棉能合合成成人人胰胰岛岛素素的的大大肠肠杆杆菌菌第2节节基基因因工工程程及及其其应应用用●什么是基因工程●基因工程的原理●基因工程的操作工具及其作用您将学习③人人类类基基因因实实际际上上被被““嫁嫁接接””至至何何种种物物质质上上了了？？①该菌菌能能合合成成人人类类胰胰岛岛素素，，根根本本原原因因是是什什么么？？②这这种种性性状状变变异异的的来来源源是是什什么么？？能能否否运运用用杂杂交交育育种种实实现现？？④人人类类基基因因为为什什么么能能独独立立地地被被““嫁嫁出出””并并能能““拼拼接接””到到另另一一物物种种DNA上上？？⑤此此例例中中，，同同种种基基因因在在不不同同生生物物体体内内表表达达的的结结果果是是否否一一致致？？为为什什么么？？⑥这这种种对对性性状状的的改改良良有有何何特特点点？？探讨能合合成成人人胰胰岛岛素素的的大大肠肠杆杆菌菌一基基因因工工程程的的原原理理（一一））基基因因工工程程的的概概念念别名基因拼接或DNA重组技术操作环境操作对象过程摘要结果特点操作水平原理生物体外目的基因提取→拼接→导入→表达特定基因产物定向改造生物性状DNA分子水平基因重组1、、基基因因的的剪剪刀刀————限限制制性性核核酸酸内内切切酶酶（（限限制制酶酶））（1））分分布布：：主主要要在在原原核核生生物物中中（3））实实例例：：大大肠肠杆杆菌菌EcoRI（2））种种类类：：约约4000种种（二二））基基因因工工程程中中最最基基本本的的工工具具

望文生义由酶的名称，你能推测出哪些内容？识别区EcoRI识别别的的DNA序序列列和和剪剪切切的的位位置置GAATTCCTTAAG切点切点探讨识别别：：一一种种特特定定双双链链DNA序序列列（4-8对对））切断：两两主链中中特定的的磷酸二二酯键(4)工作原理(6)结结果：：切断DNA并并可产生生黏性未未端(5)特特点：：高度专专一性黏性末端黏性末端几种限制制性内切切酶作用用示意CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAA模拟体验验甲DNA（环形形）乙DNA片段乙1乙2乙3EcoRI剪剪切甲、、乙这两两个DNA分子子GAATTCCTTAAG2、基因因的针线线——DNA连连接酶（1）连连接的部部位：DNA主主链上的的缺口（2）结结果：把把具有相相同黏性性未端的的DNA连接起起来GAATTCCTTAAG用限制酶酶切下的的胰岛素素基因能能否直接接导入大大肠杆菌菌？为什什么？思考3、基因因的运输输工具———运载载体（1）作作用：将将外源基基因送入入受体细细胞（2）具具备特点点①能在在宿主细细胞内复复制和稳稳定保存存②具有有1或多多个限制制酶切点点③具有有某些标标记基因因（3）种种类：质质粒、病病毒等①质粒粒本质：独独立于拟拟核或细细胞核之之外的DNA分布：许许多细菌菌、酵母母菌等生生物特点：自自主复制制、环状状、裸露露、双链链、小型型②最常常用：大大肠杆菌菌质粒地主还还赤裸裸着一双小脚模拟体验小组内：模拟DNA连连接酶的的连接作作用，把把乙2DNA片片段段装载到到甲DNA上小组间：2个甲甲和2个个乙2混在一起起仅考虑虑两两随随意连接接，可以以得到几几种类型型的产物物？连接酶同种限制制酶工具限制酶DNA连接酶运载体本质蛋白质蛋白质DNA

（质粒）功能识别内切DNA连接DNA片段装载基因、导入细胞结果切断DNA重组DNA——工具酶小结4、检测测与表达达3、导入入受体细细胞2、构建建重组质质粒1、提取取目的基基因（三））基基因工程程的操作作程序——“四四步曲””1．下列列关于限限制性核核酸内切切酶的叙叙述中，，错误的的是（））A．它它能在特特殊位点点切割DNA分分子B．同同一种酶酶切割不不同的DNA产产生的黏黏性末端端能够很很好地进行碱碱基配对对C．它它能任意意切割DNA，，从而产产生大量量DNA片段D．每每一种限限制性核核酸内切切酶只能能识别特特定的核核苷酸序序列√练一练2．在在基因因工程程中，，切割割质粒粒和含含有目目的基基因的的DNA片片段，，需要要使用用（（））A．．同种种限制制性核核酸内内切酶酶B．．两种种限制制性核核酸内内切酶酶C．．同种种DNA连连接酶酶D．．两种种DNA连连接酶酶√练一练3．DNA连接接酶的的作用用是（（））A．．使DNA子链链和母母链之之间形形成氢氢键B．．使黏黏性末末端之之间形形成氢氢键而而相连连C．．连接接DNA分分子中中脱氧氧核苷苷酸和和磷酸酸之间间的化学键键D．．以上上都不不对√练一练4．下下列各各项中中，在在基因因工程程中常常可作作为基基因运运载体体的一一组是是（））A．．质粒粒、线线粒体体、噬噬菌体体B．．染色色体、、叶绿绿体、、线粒粒体C．．质粒粒、噬噬菌体体、动动植物物病毒毒D．．细菌菌