《分子生物学实验》实验教学大纲

PAGE2页/10页《分子生物学实验》实验教学大纲课程名称：分子生物学实验 课程类别：专业选修考核方式：考查适用专业：园艺专业 所属实验室：分子生物学实实验学时、学分：32学时1学分一、实验教学目的二、实验教学要求开设分子生物学实验，旨在使学生掌握分子生物学实验的基本知识、原理、常用技术和操作技能。培养学生分析问题、解决问题的能的研究、教学等工作奠定基础三、对学生的指导和要求（一）在实验教学过程中，要求学生实验前认真预习实验讲义（二）实验中亲自动手操作，善于观察，作好实验记录（三）实验结束后详细整理、统计、分析实验结果，写出规范的实验报告四、实验考核方式考查70%平时（包括习惯、结果、操作、实验报告）+20%笔试+10%开放实验室。五、实验教学内容一)分子生物学预备实验4学时：项目类别：必√ 选做□项目性质：演示□ 验证性√设计性□ 综合性□项目主要目的要求：①实验要求通过介绍实验室规则，规范学生在实验室的行为；讲解个相关仪器的名称，用途，简单原理和使用方法，让学生学会对它们的操作方法。②实验内容学习实验室规则；学习离心机的使用方法；学习PCR学习电泳仪的使用方法；学习紫外透射仪的使用方法；学习微量加样器的使用方法；学习恒温摇床的使用方法；学习电子天平的使用方法；学习凝胶成像分析系统的使用方法。主要仪器：第3页/共10页PCR瓶、三角瓶、试剂瓶、高压灭菌锅。二)基因组DNA提取4学时：(1)项目类别：必√ 选做□(2)项目性质：演示√ 验证性□设计性□综合性□(3)①项目主要目的要求：实验要求通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。②实验内容匀浆；酶解细胞过夜。酚/氯仿/无水乙醇抽提冷乙醇洗涤；第4页/共10页缓冲液溶解；电泳；观察分析DNA。(4)主要仪器：玻璃匀浆器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、低温冰箱普通冰箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。二)聚合酶链式反应扩增4学时：(1)项目类别：必√ 选做□(2)项目性质：演示□ 验证性√设计性□综合性□(3)①项目主要目的要求：实验要求学会PCR反应的基本原理与实验技术。②实验内容配制反应体系及设置PCR仪的各项参数；利用特定引物，扩增目的DNA片段MTHFR667位点琼脂糖凝胶电泳检测分析。第5页/共10页(4)主要仪器：超净工作台（间PCR凝胶电泳系统、紫外线透射仪。说明：1.以上项目为基本实验项目，实际授课过程中选做其中30学时。有些实验在下表分配的学时内可能不能完成，需酌情而定。因学科的发展或其他原因，实际所上内容必定有所变动。三)质粒DNA的提取（4学时：(1)项目类别：必做√选做□(2)项目性质：演示□ 验证性√设计性□综合性□(3)项目主要目的要求：①实验要求通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。②实验内容提取质粒；溶解保存；第6页/共10页酶切；电泳、染色、检测质粒DNA。(4)主要仪器：微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。五)琼脂糖凝胶电泳检测DN（4学时：(1)项目类别：必√ 选做□(2)项目性质：演示√ 验证性■设计性□综合性□(3)①项目主要目的要求：实验要求通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术。②实验内容加样；电泳；观察分析DNA。第7页/共10页第第10页/共10页(4)主要仪器：糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。六)重组质粒的构建4学时：(1)项目类别：必√ 选做□(2)项目性质：演示√ 验证性□设计性□综合性□(3)①项目主要目的要求：实验要求通过实验掌握重组DNA连接的方法。②实验内容制备重组DNA；(4)主要仪器：器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。七大肠杆菌的遗传转化及筛选4学时：(1)项目类别：必√ 选做□(2)项目性质：演示□ 验证性□设计性□综合性√(3)①项目主要目的要求：实验要求通过实验掌握遗传转化及筛选重组子的方法。②实验内容重组质粒的转化(4)主要仪器：台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。八)生物大分子遗传信息分析4学时：项目类别：必√ 选做□项目性质：演示□ 验证性□ 设计性□ 综合性六、实验学时分配序号序号12实验项目DNA的提取课时443聚合酶链式反应扩增44质粒DNA的提取45琼脂糖凝胶电泳检测DNA46重组质粒的构建47大肠杆菌的遗传转化及筛选48生