基于Amplex UltraRed和HRP的新型葡萄糖生物传感器课件

基于AmplexUltraRed和HRP的新型葡萄糖生物传感器汇报人：陈泽川＋＋010203背景及原理实验内容结果与讨论目录01背景及原理ONE葡萄糖是生命活动中不可缺少的一种物质，它参与人体的新陈代谢，提供能量来源，补充血糖，强心利尿，还能促进肝的解毒作用；我国是成年人糖尿病患者占全球糖尿病患者的1/4，目前只能通过控制血糖浓度的方法来控制发病率，继续快速、稳定、精确的血糖浓度测定方法葡萄糖与糖尿病应糖尿病人群数量的飞速增长，对葡萄糖浓度的监控技术也在飞速的发展；本文试图利用壳聚糖用于基于酶的生物传感器的研发，以期望研究出一种新型葡萄糖生物传感器。葡萄糖传感器的研究背景葡萄糖生物传感器的4大指标1.高灵敏度2.良好的抗干扰能力3.简单且稳定4,响应时间短原理葡萄糖氧化酶催化溶液中葡萄糖发生氧化反应生成H2O2；溶液中的辣根过氧化酶催化生成的H2O2分解成羟基自由基，羟基自由基不可逆的氧化非活性的壳聚糖生成水和具有电活性的resorufin（7-羟基-3H-吩噁-3-嗪酮），resorufin在大约-0.1V发生一个可逆的电子还原反应从而生成可被检测到的产物；葡萄糖生物传感器壳聚糖有很好的生物相容性，对酶有很好的亲和力壳聚糖和葡萄糖氧化酶固定在电极表面02实验内容TWO实验内容仪器与试剂试剂：壳聚糖、HRP、过氧化氢、葡萄糖、多巴胺、抗坏血酸等仪器：CHI832B电化学分析仪1.将玻碳电极分别用金相砂纸，氧化铝粉末打磨抛光成镜面之后用二次去离子水冲洗，然后在硝酸，氢氧化钠溶液丙酮以及去离子水中超声波洗涤5min2.称取0.1g壳聚糖置于小烧杯中，加入1%的醋酸溶液10ml搅拌2h，得到粘稠的壳聚糖溶液，取等量的葡萄糖氧化酶溶液混合，去2微升滴加到玻碳电极上，自然晾干01葡萄糖传感器的制备02极致无岸，

向天而歌壳聚糖和HRP对H2O2的电催化性质研究壳聚糖和HRP催化H2O2的催化机理探讨新型GOD/CHIT葡萄糖传感器的选择性新型葡萄糖传感器对葡萄糖检测的重现性和稳定性1.壳聚糖和HRP对H2O2的电催化性质研究运用i-t法考察壳聚糖和HRP对H2O2的催化作用。在右图中，由于还原峰电流是根据传感器在不同时间点进行测定，所以出现类似与波段形状，但总体而言，还原峰电流还是与H2O2浓度呈现良好的线性关系。3、新型GOD/CHIT葡萄糖传感器的选择性在实际样本中可能会存在许多能够产生干扰的物质，比如：抗坏血酸（AA），多巴胺（DA）等；由于该工作电极的电位为-0.1V，这些干扰物质很难被还原，从而可以大大降低干扰。4、新型葡萄糖传感器对葡萄糖检测的重现性和稳定性将GOD/CHIT修饰电极放在含0.2U/mlHRP和50μmol/L壳聚糖的醋酸缓冲液中重复实验6次，所得的响应电流相对标准偏差为4.85%，相同条件下制备4根电极对1*10-6mol/L葡萄糖响应标准偏差为3.85%。说明该方法制得的修饰电极性质稳定，重现性较好。5、结论

这篇文章使用生物兼容性好的壳聚糖固定葡萄糖氧化酶于玻碳电极上，使用本身无电活性的壳聚糖，利用被葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖时产生的H2O2催化生成具有电化学活性的物质-resorufin，从而间接的检测葡萄糖。由于工作电极在-0.1V，避免了大多数还原性物质的干扰，从而提高该电极的选择性，同时该电极具有响应速度快，稳定性