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文档简介

实验六病毒的鸡胚培养及效价测定目的意义：

了解动物病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理：

鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种，主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等，应根据需要选择适当的途径。卵黄囊胚体羊膜囊绒毛尿囊腔气室鸡胚结构模式图器材及试剂:病毒：鸡新城疫病毒弱毒疫苗株；鸡胚：9-11日龄白壳受精卵；孵化器、检卵灯、钢针、注射器、2.5%碘酒、75%乙醇、固体石蜡、眼科剪、眼科镊等。（3）接种病毒：用18mm针头的1ml注射器吸取鸡新城疫病毒，针头通过打出的孔进针，刺入尿囊腔，注入0.1ml。（4）用融化的石蜡封闭小孔，39℃孵化器中孵化72h。3收获：接种后每4小时照蛋一次，弃去24h内死亡胚。（1）鸡胚放入普通冰箱内冷藏12h，使胎血凝固。（2）分别用碘酒和酒精消毒卵壳，用灭菌剪刀除去气室卵壳及壳膜，撕开下面的尿囊膜。（3）将鸡胚稍倾向一侧，用灭菌吸管吸出尿囊液待检。（4）观察鸡胚的发育及是否有无病变。血凝试验目的意义：掌握血凝试验（HA）与血凝抑制试验（HAI）的基本方法；体会HA与HAI在病毒鉴定及疾病诊断中的应用。基本原理：

许多病毒表面具血凝素，具有凝集某些动物或人红细胞的特性，称为血凝现象，可用于鉴定病毒。血凝现象可以被特异性抗体所抑制，称为血凝抑制现象，利用这种特性可进行血清学试验，称为血凝抑制试验。器材及试剂:待检病毒:鸡新城疫病毒鸡胚尿囊液；待检血清：抗鸡新城疫病病毒阳性血清；生理盐水、1%鸡红细胞、96孔V形微量血凝板、加样器等。3、第一排1-12孔及第二排1-12孔各加1%鸡红细胞50ul，微型震荡器震荡2min混匀。4、室温静置10-30分，观察结果。5、结果判定：红细胞对照组红细胞完全沉降，以试验

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