4789.30单增李斯特检测课件

食品安全国家标准

食品微生物学检验

单核细胞增生李斯特氏菌检验

Nationalfoodsafetystandard

Foodmicrobiologicalexamination:Listeriamonocytogenes

张秀丽河南省CDC概述李斯特氏菌的发现1926年由MurrayWebb和Swann从患有大单核白细胞增多症的病兔体内分离，命名为单核细胞增多杆菌（Bacteriummonocytogenes）。1940年Pine将本菌改为李斯特氏菌（listeria）。归属原核生物界乳杆菌科李斯特氏菌属，共有8个种：单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）英诺克李斯特氏菌（L.Innocua）绵羊李斯特氏菌（L.Ivanovii）威尔斯李斯特氏菌（L.Welshimeri）西尔李斯特氏菌（L.Seeligeri）格氏李斯特氏菌（L.Grayi）默氏李斯特氏菌（L.Murrayi）脱氮李斯特氏菌（L.Denitrificans）

流行病学分布状况

WHO1988年调查结果：

30%以上的肉及肉制品，15%的家禽，5%～15%的奶及奶制品，4%～8%的水产品均受到不同程度的污染。

流行病学传播途径垂直传播传播途径-接触传播

流行病学流行特征易感人群：孕妇、胎儿、新生儿、老人及免疫力低下者

季节性：多散在发病，无明显的季节性临床表现病人初起常有胃肠炎的症状，继尔出现脑膜炎症候群，发热，剧烈头痛、恶心、呕吐和颈部强直等，部分患者有惊厥，多在发病后24～48小时内出现昏迷。少数病人起病缓慢，病程中症状可有暂时缓解。个别病人可表现为脑炎或脑脓肿，出现抽搐、偏瘫、脑疝或其它局限性征象。感染本菌的孕妇会发生死胎、流产、产期败血症等，即使是活胎，婴儿也常在分娩后短时间内死亡。如果能够幸存，也易患脑膜炎，导致智力缺陷或死亡。新生儿感染李斯特氏菌后，主要表现为呼吸急促、粘膜紫绀、呕吐、尖叫或抽搐等。体温多低于正常。皮肤常有出血性皮疹和化脓性结膜炎等。患脑膜炎的病人多同时存在败血症。孕妇、新生儿、免疫系统有缺陷的人易发病。病死率高达20%～50%，一般达30%。

检验称取25g待检样品加到225ml的LB1增菌液里，30℃培养24小时。检验取LB2增菌液1环划线接种于CHROMagor李斯特氏菌显色培养基和PALCAM培养基上，36℃培养24小时。初筛微生物菌落颜色灵敏度单核增生李斯特菌蓝色,有白色晕环近100%英诺克李斯特菌蓝色---其它无色或被抑制---检验挑取可疑菌落，接种鼠李糖，木糖，同时划线TSA-YE检验鼠李糖阳性(变黄)，木糖阴性(不变)者，为可疑单增李斯特菌。检验进行革兰氏染色和动力观察，李斯特氏菌为革兰氏阳性小杆菌，镜下翻滚样运动或旋转样运动。检验将培养物接种下列生化反应管和血平板，36℃培养24小时。生化反应触酶阳性，氧化酶阴性，七叶苷阳性；种的生化特征见下表：菌种溶血反应硝酸盐还原尿素酶MR/VP甘露醇鼠李糖木糖单核细胞增生李斯特氏菌绵羊李斯特氏菌英诺克李斯特氏菌威尔斯李斯特氏菌西尔李斯特氏菌格氏李斯特氏菌默尔李斯特氏菌++--+--------+-------+/++/++/++/++/++/+