专题十一选修三课件

5、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A、可以制成诊断盒，用于疾病的珍断

B、可以利用基因工程技术生产

C、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗D、可以在生物体内生产，不能体外生产D6.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是A.特异性强、灵敏度高B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C.体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D.由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌C35．下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)

技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于

培养基。(1)动物细胞培养(微生物培养)(2)选择(3)特异性强，灵敏度高

(4)灭活的病毒(5)在体外大量增殖

分泌特异性抗体．(6)骨髓

造血干(7)主动运输(主动吸收)39.本题为分叉题。A适用于《生命科学》教材，B适用于《生物》教材。A和B中任选一题，若两题都做以A给分。A.下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题。(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异__________；从免疫学角度看，这种凝集原是____________。(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的__________细胞，这种细胞具有产生__________________的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能__________，但不会产生抗体。(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使这两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为__________，把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为__________。(4)过程①的主要目的是________。通过过程②或③的培养方法能产生大量________抗体。B.水和无机盐是由植物木质部的导管输送的。且32P标记的矿质营养液培养某植物幼苗一段时间后，在根细胞中检测32P的累积量和运输量，结果如下图。(1)根细胞吸收矿质离子的主要形式是____________。(2)在与a、b、c、d四点相对应的细胞中：1)累积量最高的是__________点处的细胞，这是因为根尖该部位没有__________结构。2)吸收量大小依次为

>

>

>

。A.(1)糖蛋白抗原

(2)免疫B淋巴

单一的抗A抗体(或单一的特异性抗体)快速大量增殖

(3)杂交瘤细胞单克隆

(4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞抗A单克隆

B.(1)主动转运

(2)1)a

导管

2)c>d>a>b

3)渗透

D

4)b

(3)D(4)核酸、ATP

39.（1）空间结构氨基酸序列（2）农杆菌介导的转化法外源植酸酶基因→农杆菌→大豆细胞→大豆植株再生→鉴定（3）显微注射法胚胎分割（4）减少环境中磷的污染，但基因可能扩散到环境中。（2）过程②构建A基因表达载体时，必须使用____________和____________两种工具酶。（3）过程③采用的实验技术是____________，获得的X是____________。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的____________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行____________比较；或用图中的____________进行特异性结合检测。2（1）逆（反）转录（2）限制性核酸内切酶（限制性内切酶、限制酶）DNA连接酶（注：两空顺序可颠倒）（3）细胞融合杂交瘤细胞（4）A蛋白核酸（基因）序列抗A蛋白的单克隆抗体下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答：(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至________期的内细胞团或胎儿的________中分离得到的一类细胞。(2)图中分化程度最低的干细胞是________。在体外培养条件下，培养液中加入________因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。(3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________的结果。(4)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的。骨髓移植的实质是将上图中的________________细胞移植到患者体内。(5)若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、皮肤细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的________，其原因是________________________________。(6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留于细胞周期的________________期。(7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用________细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选最终得到能分泌________的杂交瘤细胞。2(1)囊胚原始性腺细胞(2)胚胎干细胞分化诱导(3)选择性表达(4)造血干(5)红细胞细胞中无细胞核(6)间(7)B淋巴特异性抗体C2000年6月26日，经过美、英、法、德、日、中六国科学家的共同努力，人类基因组的工作草图已经绘制完毕，并于当天向全世界公布。此次基因技术领域的突破性进展，愈发使世人相信，基因工程等生物高科技的广泛应用将推动21世纪经济和社会的发展。12.植物基因工程往往需要接受外来DNA的细胞经有丝分裂形成植株。细胞每次分裂时DNA都复制一次，每次复制都是…（）A.母链和母链，子链和子链，各组成一条子代DNAB.每条子链和它的母链组成子代DNAC.每条子链随机地和两条母链之一组成子代DNAD.母链降解，重新形成两个子代DNA13.从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状…………………（）A.难以预测

B.像甲

C.像乙

D.像丙BD17.基因工程等生物高科技的广泛应用，引发了许多关于科技与伦理的争论。有人欢呼，科学技术的发展将改变一切；有人惊呼，它将引发道德危机。对此，我们应持的正确态度是………………（）①摒弃现有道德规范，推动科技发展②发挥道德规范的作用，限制科技的负面效应③科技的发展必须以现有道德规范为准绳④调整现有道德规范，适应科技发展A.①②

B.②③

C.③④

D.②④DA24.下图为果蝇染色体图，若要对此果蝇进行染色体的脱氧核苷酸序列的测定，那么需要测定的染色体是…（）A.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、YB.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、XC.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、X、YD.Ⅱ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅳ、X、YC6.在大肠杆菌的DNA分子上，与乳糖分解代谢有关的核苷酸序列中，如果操纵基因发生了使阻抑物不能与之结合的改变，则在不含葡萄糖的培养基中，这种大肠杆菌…………（）A.有乳糖存在时合成半乳糖苷酶，无乳糖存在时不合成半乳糖苷酶B.无乳糖存在时合成半乳糖苷酶，有乳糖存在时不合成半乳糖苷酶C.不论有无乳糖存在，都不合成半乳糖苷酶D.不论有无乳糖存在，都合成半乳糖苷酶D7.“人类基因组计划”中的基因测序工作是指测定…（）A.DNA的碱基对排列顺序B.mRNA的碱基排列顺序C.蛋白质的氨基酸排列顺序D.DNA的基因排列顺序A7.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是（）①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵A.①②

B.②③

C.③④

D.①④C31.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，需要…（）（不定项选择）A.具有完整细胞核的细胞

B.离体状态C.导入外源基因

D.一定的营养物质和激素ABD3.“试管婴儿”技术属于…………………（）A.胚胎移植

B.组织培养C.克隆技术

D.基因工程A25.下列关于基因工程的叙述，正确的是……………（）A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B.细菌质粒是基因工程常用的运载体C.通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的NDA，用另一种处理运载体DNAD.为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体B29.乳腺细胞和唾液腺细胞都来自外胚层。乳腺细胞能够合成乳蛋白，不能合成唾液淀粉酶，而唾液腺细胞正相反。对这一现象的解释是……（

）（不定项选择）A.唾液腺细胞没有合成乳蛋白的基因B.乳腺细胞没有合成唾液淀粉酶的基因C.两种细胞都有合成乳蛋白、唾液淀粉酶的基因D.两种细胞中相关基因选择性地表达CD1.下列技术依据DNA分子杂交原理的是………………（）①用DNA分子探针诊断疾病②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交③快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子A.②③

B.①③

C.③④

D.①④B4.自然界中，一种生物某一基因及其三种突变基因决定的蛋白质的部分氨基酸序列如下：正常基因

精氨酸苯丙氨酸

亮氨酸

苏氨酸

脯氨酸突变基因1

精氨酸

苯丙氨酸

亮氨酸

苏氨酸

脯氨酸突变基因2

精氨酸

亮氨酸

亮氨酸

苏氨酸

脯氨酸突变基因3

精氨酸

苯丙氨酸

苏氨酸

酪氨酸

丙氨酸根据上述氨基酸序列确定这三种突变基因DNA分子的改变是（

）A.突变基因1和2为一个碱基的替换，突变基因3为一个碱基的增添B.突变基因2和3为一个碱基的替换，突变基因1为一个碱基的增添C.突变基因1为一个碱基的替换，突变基因2和3为一个碱基的增添D.突变基因2为一个碱基的替换，突变基因1和3为一个碱基的增添A22、以下有关基因工程的叙述，正确的是A、基因工程是细胞水平上的生物工程

B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变

D、基因工程育种的优点之一是目的性强D5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D.用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子A3.镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是A.解旋酶

B.DNA连接酶C.限制性内切酶

D.RNA聚合酶C26.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是A.具有完整细胞核的细胞

B.一定的营养物质和植物激素C.离体状态

D.导入指定基因D15．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可避过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的D4.用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是A.常用相同的限制性内切酶处理目的的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达B5.采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C.在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAB23.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒D.植皮基因不能用来进行真核生物的遗传改良B26.在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是A.用mRNA为模板逆转录合成DNAB.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C.将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选D.由蛋白质的氨基酸序列推测mRNAB1.以下不能说明细胞全能性的实验是A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B.紫色糯性玉米种子培育出植株C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株B7.现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnⅠ单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是D4.下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B.限制性内切酶的活性受温度影响C.限制性内切酶能识别和切割RNAD.限制性内切酶可从原核生物中提取C16.下图为一个真核基因的结构示意图，根据图中所示，对该基因特点叙述正确的是（

）A.非编码区是外显子，编码区是内含子

B.非编码区对该基因转录不发挥作用C.编码区是不连续的

D.有三个外显子和四个内含子C2.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白D阻止病人的致病基因传给子代的方法通常是将正常基因导入病人（

）A.体细胞的细胞质

B.生殖细胞的细胞质C.体细胞的细胞核

D.生殖细胞的细胞核D已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是A.3

B.4

C.9

D.12C钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（

）A.该生物的基因型是杂合的B.该生物与水母有很近的亲缘关系C.绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达D.改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光C下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是(

)A.利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种B.不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程C.两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所得F1的表现型一致D.两个不同品种的紫茉莉杂交，F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的C科学家运用基因工程技术将人的胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内获得成功表达。图示a处为胰岛素基因与大肠杆菌质粒DNA结合的位置，它们彼此能结合的依据是（

）A.基因自由组合定律

B.半保留复制原则C.基因分离定律

D.碱基互补配对原则D2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是(

)A.追踪目的基因在细胞内的复制过程B.追踪目的基因插入到染色体上的位置C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构C下列关于基因工程的叙述，错误的是（

）A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达D24.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂，应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长、培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市，请回答：（1）促进果实成熟的重要激素是

，它能够发生的化学反应类型有：

、

、和

。（2）在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是

基因的“针线”是

，基因的“运输工具”是

。（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是

和

。24.（1）乙烯，加成，氧化，聚合（2）限制性内切酶、DNA连接酶、运载体（3）目的性强、育种周期短、克服远缘杂交的障碍（答出其中两点得满分）22.科学家应用生物技术培育出了一种抗虫棉，它能产生毒素，杀死害虫，目前正在大面积推广种植。科学家还研究了害虫的遗传基础，发现不抗毒素对抗毒素为显性（此处分别用B和b表示）。据此回答：（1）种植抗虫棉，有利于生态环境保护，这是因为

。（2）棉田不抗毒素害虫的基因型为

；抗毒素害虫的基因型为

。（3）不抗毒素害虫与抗毒素害虫杂交，则子代的基因型为

。22.（1）可以不用或少用农药

（2）BB，Bb；bb

（3）bb，Bb38、在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体.把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。(1)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种

分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过

而黏合。(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的

，原因是

。(3)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是

。38、(1)限制性内切酶碱基互补配对(2)3／4

雌雄配子各有1／2含抗除草剂基因；受精时，雌雄配于随机结合(3)叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递丽在下一代中显现出来41．基因工程又叫基因拼接技术。(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的

为模板，

成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成

。(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、

。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是

。(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与且的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有

种环状DNA分子，它们分别是

。(1)信使RNA(mRNA)

逆转录(反转录)

双链DNA(目的基因)(2)动植物细胞

除去内含子(3)3

运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子30.在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan′）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：（1）A过程需要的酶有

。（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是

。（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

。（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用

作为探针。（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。①将转基因植株与

杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为

。③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占

%。（1）限制性内切酶和DNA连接酶（2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存（3）卡那霉素（4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株②3：1③100继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是________________。（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入______________中，原因是______________。（3）通常采用______________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________________细胞中特异表达。（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的________________转入_______________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为_________________。（1）显微注射（2）受精卵（或早期胚胎）

受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达（3）DNA分子杂交（核酸探针）（4）膀胱上皮（5）细胞核

去核的卵

核移植（或克隆）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_______注入B品种牛的_________卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_______，将该胚胎移入代孕母牛的_______中，通过培育可达到目的。（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量______，为解决这一问题，可以用______激素处理B品种母牛。（3）克隆牛的产生说明_____具有全能性。克隆牛的性状主要表现____品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自______个亲本，细胞质来自______性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成______（相同，不同）。（1）细胞核去核重组胚胎子宫（2）不足促性腺（3）动物体细胞核A两雌不同41.香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。请根据上述材料，回答下列问题：（1）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。（2）脱毒香蕉苗的获得，可采用_________的方法，此方法的依据是_________和_________。（3）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法检测病毒的存在？（列举两种方法）（4）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。试述在提取和纯化DNA时影响提纯效果的因素及其依据。（列举两点）（5）如何利用afp基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题？（列举两点）（6）从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。另外，抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期，请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。（1）选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。（2）茎尖（分生组织）组织培养

茎尖不带病毒（或病毒在植物体内分布不均匀），植物细胞全能性。（3）①BBTV病毒基因的检测（DNA分子杂交技术）；②BBTV病毒蛋白的检测（获得抗血清，利用抗原—抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。（4）①选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其他杂质在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，达到分离目的；②加入一定量酒精，使部分蛋白质杂质溶解于酒精，与DNA分离；③加入蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；④控制DNA提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。（5）将afp基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。生态安全问题包括：①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响。（6）体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种（或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品种）。蛋白质工程方法的步骤为：①果胶裂解酶蛋白的功能分析，②果胶裂解酶蛋白的结构预测和设计，③果胶裂解酶基因的改造。B题.很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代．美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程。(1)获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外，还可以

。将目的基因与运载体结合时必须用

酶和DNA连接酶，在基因工程中，常用的运载体有

等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如，应具有

以便进行筛选。(2)由转基因玉米细胞经过

形成愈伤组织，然后发育成胚状体和试管苗。若要制备转基因玉米的人工种子，可选择上述实验过程中的

再包裹合适的

等。B题(1)人工合成

同种限制

质粒(或动植物病毒或噬菌体等)

标记基因(2)脱分化(或去分化)

胚状体

人造种皮将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是____________________________。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_______________________（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？____（4）为将外源基因转入马铃薯，图l步骤⑥转基因所用的细菌B通常为_________________。（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。①采用EcoRI和PstI酶切，得到_________________种DNA片断。

②采用EcoRI和SmaI酶切，得到________________种DNA片断。（l）耐高温（2）引物对B（3）否（4）农杆菌（5）①

2

②

l下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有

、

、

三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行

。（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是

；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是

。（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是

，其后合成的产物是

。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是

。（1）目的基因-载体连接物

载体-载体连接物目的基因-目的基因连接物分离纯化（其他合理答案也可）（2）载体-载体连接物；目的基因-载体连接物、载体-载体连接物（3）启动子

mRNA（4）EcoRI和BamHI（只答一个酶不可）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是

，用

将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子

，以完成工程菌的构建。（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是

；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酵，可采用

检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？（1）限制性核酸内切酶

DNA连接酶

导入酿酒母菌（2）DNA分子杂交

抗原—抗体杂交或淀粉酶活性

该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈。（3）测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量。（4）①工具酶主要来自微生物；②最重要的目的基因供体库之一；③目的基因的载体之一；④作为受体细胞；⑤提供用于发酵的工程菌。为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的

处，DNA连接酶作用于

处。（填“a”或“b”）（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和

法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用

技术，该技术的核心是

和

。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

作探针进行分子杂交检测，又要用

方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。（1）a

a（2）基因枪法（花粉管通道法）（3）植物组织培养

脱分化（去分化）

再分化（4）耐盐基因（目的基因）

一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_________，对_________进行切割。（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有_________，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有_________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_______________。(1)PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA、质粒（2）抗卡那霉素基因（3）全能性脱分化、再分化苏云金杆菌（Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。（2）图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________。（4）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中对________T-DNA的降解。（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________________。（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________________基因频率的增长速率。（1）4

（2）21

（3）复制

（4）DNA水解酶（5）表面无相应的特异性受体

（6）抗性人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括___________和___________。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为___________。（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成___________个片段；而患者的则被切割成长度为________对碱基和___________对碱基的两种片段。（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________（以P+表示正常基因，P-表示异常基因）。（1）从细胞中分离通过化学方法人工合成（2）见下图基因碱基对的替换（基因突变）（3）3460220（4）P+P-21.胚胎移植技术目前主要应用于…………………（）（不定项选择）A.解决某些不孕症者的生育问题

B.治疗某些遗传病C.提高良种家畜的繁殖力

D.提高动物的抗病力AC30.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（）（不定项选择）A.B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖B.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C.骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体D.骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖AC5.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（

）A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体B27.下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是………（

）（不定项选择）A.叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞B.叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C.融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜D.叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性AD18.下列关于细胞工程的叙述中，错误的是………………（

）A.植物细胞融合必须先制备原生质体B.试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面C.经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状D.用于培养的植物器官或组织属于外植体C3.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B.培养中的人B细胞能够无限地增殖C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D7．下列不属于动物细胞工程应用的是A．大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C．大规模生产食品添加剂、香料等

D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖C5.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者D29.动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有（

）A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B.有无血清对正常细胞培养的影响不同C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大BCD13.下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是(

)A.花药、胚不能作为组织培养的材料

B.植物细胞具有全能性C.外植体是指用于培养的植物组织或器官

D.外杭体可诱导出愈伤组织A下列关于细胞工程的叙述，错误的是A.

电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.

去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.

小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.

某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同D制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（

）①细胞培养

②细胞融合

③胚胎移植

④细胞核移植A.①②

B.①③

C.②③

D.③④A用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（

）A.都需用CO2培养箱

B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行

D.都可体现细胞的全能性C30.将发芽率相同的甲、乙两种植物的种子，分别种在含有不同浓度(质量分数)钠盐的全营养液中，并用珍珠砂通气、吸水和固定种子。种子萌发一段时间后，测定幼苗平均重量，结果如下图。请据图回答问题：(1)甲、乙两种植物相比，更适宜在盐碱地种植的是_______。(2)导致甲种植物的种子不能萌发的最低钠盐浓度为_______%。(3)在钠盐浓度为0.2%的全营养液中，甲、乙两种植物根尖细胞吸收矿质元素的方式均为_______。(4)将钠盐浓度为0.1%的全营养液中的甲种植物幼苗，移栽到钠盐浓度为0.8%的全营养液中，其根尖成熟区表皮细胞逐渐表现出质壁分离现象，原因是______________________________________________________________________________________________________。(5)取若干生长状况相同并能够进行光合作用的乙种植物的幼苗，平均分成A、B两组。A组移栽到钠盐浓度为0.8%的全营养液中，B组移栽到钠盐浓度为1.0%的全营养液中，在相同条件下，给予适宜的光照。培养一段时间后，A组幼苗长势将_______B组。从物质转化角度分析，其原因是_____________________________________________________________。(6)通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势，培育高产、耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：①A是___________酶。B是______________。C是具有_________性状的幼芽。②若目的植株丢失1条染色体，不能产生正常配子而高度不育，则可用___________(试剂)处理幼芽，以获得可育的植株。(1)乙种植物(2)0.8(3)主动运输(4)细胞外溶液浓度高于细胞液的浓度，细胞通过渗透作用失水(5)好于

A组有机物的光合作用(同化作用)合成量与呼吸作用(异化作用)消耗量的差值大于B组的差值(6)①纤维素酶和果胶；融