有核红细胞专题报告2300字

有核红细胞专题报告2300字

外周血检出有核红细胞3例结果分析1.前言成熟的红细胞是无细胞核的，成分是蛋白质和铁，有运输氧的功能。但是人体内细胞生长不可能没有细胞核，所以有核红细胞（nucleatedredbloodcellNRBC）实际上是未成熟的红细胞即幼红细胞。除一周内婴幼儿外，正常成人血涂片中不会出现有核红细胞[1],但由于某些疾病的原因，常发生有核红细胞出现在外周血或静脉血的现象[2].有核红细胞主要出现在以下血液系统疾病中：（1）溶血性贫血：RBC被大量破坏，机体相对缺氧，RBC生成素水平增高，骨髓红系增生，网织红细胞和部分幼稚红细胞提前释放入血，说明骨髓有良好的调节功能。（2）、造血系统恶性疾病：骨髓充满大量白血病细胞使幼红细胞提前释放，有核红细胞以中幼晚幼为主。（3）、慢性骨髓增生疾病：骨髓纤维化使有核红细胞来自髓外造血和纤维化的骨髓。（4）、脾切除：骨髓中有个别有核红细胞能达到髓窦，当脾被切除后，不能被脾脏扣留从而释放入血2.现状分析虽然有核红细胞基本上都出现在血液科疾病中，但是在其他科室住院的病人血涂片中也会发现有核红细胞。但血涂片的复检率却不容乐观，使得不少检验人员过分依赖仪器的结果而忽视了对血涂片细胞形态的观察。在国外发达国家的调查结果显示，在大型医疗机构中，血细胞分分析仪分析后涂片复查率约为30%，维持在较高的比率，而在国内医疗结构的调查结果显示，血涂片复查率不足15%，甚至在部分医疗机构中血涂片的复查率为0%，说明我国对血涂片复查的重要意义尚缺乏足够的重视。因此，准确计数外周血ＮＲＢＣ对于某些疾病的。，诊断及鉴别诊断具有重要的临床意义［３］这就要求我们在日常工作中做好血涂片的复检工作，以防漏诊和误诊3.问题确立和解决办法本人搜集了三例血液科以外科室血涂片中发现有核红细胞的病例，现将发现过程报告如下：3.1仪器提示有核红细胞三份病例中有2份为静脉血，一份为末梢血。静脉血在COULTERGENS上检测，末梢血在ABX仪器上检测。GENS散点图报警一例提示为“NRBCs（有核红细胞）”一例提示为“VariantLymphs(异淋)”，提示异淋因为有核红细胞在形态上与淋巴细胞相似，仪器不易区分。白细胞直方图“两峰一谷”变化为“三峰”中间峰较小，提示有幼稚细胞存在。ABX直接提示“有核红细胞“。3.2.涂片镜检将标本涂片瑞姬氏染色，油镜下观察，均发现有有核红细胞.NRBC的出现对WBC计数会造成干扰，因为其不能被WBC稀释液破坏，计数时和WBC一同被计数而使WBC计数结果假性偏高。因此WBC需经公式校正。分类也要进行手工校正（因为大部分有核红细胞被误认为淋巴细胞），但COULTERLH750血细胞分析仪有自动修正功能，仪器报出的WBC数为修正后结果，此时可以手工涂片分类以校验仪器的修正结果是否正确。三例标本有核红比例（100个白细胞中有核细胞的个数），仪器计数和校正后的WBC数，仪器分类和校正后的中性粒细胞百分比，仪器分类和校正后的淋巴细胞百分比列表如下表1标本NRBC比例仪器计数WBC数校正后WBC仪器N%校正后N%仪器L%校正L%标本12066.755.3685.5948.24标本2547.845.588.291.311.27.9标本353850.07.014.562.580323.3报告方式报告单上一律报告校正后的计数与分类结果，同时要注明此结果为校正后结果，并报告有核红细胞比例，有无发现其他异常细胞。同时建议骨穿确诊。4.讨论我室发现的3例有核红细胞，均为血液科以外的病例，一例为心内科病人，一例为ICU病人，一例为小儿科病人。前两例病人WBC总数均明显增多但均以成熟的中性粒细胞增多为主，未见有幼稚WBC。后一例病人为出生一天的幼儿。有核红细胞的出现，除一周以内的婴幼儿外，往往表明有血液性疾病潜在的可能性，无论外周血中出现有核红细胞的多少，都应建议临床骨穿，追踪观察。仪器检测提示有核红细胞时一定要进行血涂片复检，因为再高档的仪器也代替不了人工显微镜检查，仪器检测提示有核红细胞有一定的假阳性，也由一定的假阴性。究其原因,可能是因为仪器辨别误差,将NRBC误认为淋巴细胞[4];或是由于仪器计数的细胞数量远远大于人工镜检,发现NRBC的几率相对较高[5]。由于显微镜镜检仅分类100个白细胞,加之血涂片上细胞分布的差异,NRBC数量较少的标本有可能出现漏检。因而NRBC数量较少的标本,人工分类200个白细胞,以减少NRBC漏检的可能。5.参考文献[1]叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程[M].南京：东南大学出版社，1993.13[2]何晓莲，曲斌，朱以勇，等.小儿血象有核红细胞临床分析[J].黑龙江医学杂志，1999,7（7）：33［３］邢辉，郭学霖．血液分析仪避免有核红细胞影响血液分析［Ｊ］．中国误诊学杂志，２００８，８（１５）：３５６６－３５６７．[4]孙瑞雪,钱定良1LH750对有核红细胞分析的应用评价[J]1检验医学与临床,2006,3(9):4249~4251[5]王欣,高晓莉1XE-2100全自动血细胞分析仪检测有核红细胞的评估[J]1中国卫生检验杂志,2007,17(1):106~1071

第二篇：论著母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系7100字现代妇产科进展20xx年9月第12卷第5期ProgObstetGynecol,Sep.2003,Vol.12,No.5?论著?母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系祝琳1,陈汉平2,张玉洁1,邓玲红1,康佳丽1(1.广州市第一人民医院妇产科,广州510010;2.华中科技大学同济医学院妇产科)【摘要】目的:探讨母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系,为将它用于无创性产前诊断提供实验依据。方法:对孕6～40周的86例妇女(包括胎儿正常组68例、胎儿异常组18例)的外周血进行单密度梯度离心、瑞氏染色和细胞计数,分析母血中胎儿有核红细胞数量与孕周、胎儿异常及胎儿性别的关系。结果:胎儿正常组,母血中胎儿有核红细胞平均数量为14.23±12.01/ml,与妊娠周数呈直线相关(R>R0.05)。胎儿异常组中,母血中胎儿有核红细胞平均数量较正常胎儿组显著增加,约为38.73±24.97/ml,且与妊娠周数无明显直线相关性。母体外周血中胎儿有核红细胞数量与胎儿性别无统计学相关性。结论:胎儿发生异常时母血中胎儿有核红细胞数量较正常妊娠时增加。母血中胎儿有核红细胞数量在胎儿正常时随孕周而增加,且不受胎儿性别的影响。母血中胎儿有核红细胞计数可以辅助用于产前筛查胎儿异常的发生。【关键词】胎儿血红细胞;细胞计数;产前诊断;胎儿免疫,母源获得性:R714.2:A文章编号:1004-7379(2003)05-0333-03Therelationshipbetweenthequantityoffetalnuclearredbloodcellsandabnormalfetus.ZhuLin1,ChengHanping2,ZhangYujie1,etal.1.DepartmentofObstetricsandGynecologyofGuangzhouFirstPeople’sHospital,Guangzhou510010;2.DepartmentofObstetricsandGynecology,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology【Abstract】Objective:Toexplorethequantityoffetalnuclearredbloodcells(FNRBC)inmaternalperipheralbloodanditsrelationshipwithabnormalfetus,providingexperimentalsupporttotheutilityofFNRBCinthenon2traumaticprenataldiagnosis.Methods:ThequantityofFNRBCwascountedafterdistinguishingitbysingledensitycentrifugationandWright’sstainingin86pregnantwomenin8～40weeks.Therelationshipamongpregnantweeks,abnormalfetusandfetalsexwasanalysed.Results:TheaveragequantityofFNRBCinnormalfetusgroupwas14.23±12.01/mlandhadasignificantrelativitywithpregnantweek.Inabnormalfetusgroup,thequantityofFNRBCwassignificantlyhigherthanthatinnormalfetusgroupandhadnodirectrelativitywithpregnantweek.ThequantityofFNRBChadnostatisticrelativitywithfetussex.Conclusion:Whenthefetusisab2normal,thequantityofFNRBCinmaternalperipheralbloodbecomesabsolutelyhigherthanthatinnormalfetus.ThequantityofFNRBCinmaternalperipheralbloodincreaseswiththepregnantweekandisnotaffectedbyfetussex.TheaccountoftheFNRBCinmaternalperipheralbloodcanhelpscreenoutabnormalfetusinprenataldiagnosis.【Keywords】Fetalhemoglobin;Cellscount;Prenataldiagnosis;Fetalimmunity,maternally2acquired产前利用母血中胎儿细胞筛查胎儿遗传疾病,是近年新发展起来的一项无创性产前诊断技术。与羊膜腔穿刺、绒毛取材等传统方法相比,它仅需少量母血,对胎盘、胎儿无创伤,安全度高,对母儿的伤害小。母血中胎儿有核红细胞(fetalnuclearredbloodcells,FNRBC)是目前最适合产前诊断的胎儿细胞1。我们通过单密度梯度离心,瑞氏染色鉴别细胞形态,通过显微镜下计数,统计了母血中胎儿有核红细胞数量在不同孕周时的变化,探讨母血中胎儿有核红细胞数量在胎儿畸形或(和)染色体异常时的333现代妇产科进展20xx年9月第12卷第5期ProgObstetGynecol,Sep.2003,Vol.12,No.5变化情况,为母血中胎儿有核红细胞计数辅助应用于产前筛查胎儿畸形和(或)染色体异常提供理论基础和实验依据。1资料与方法1.1临床资料随机选择在同济医院产科就诊的孕妇86例,孕6～40周,18～40岁。正常妊娠68例,胎儿异常18例,正常胎儿组和异常胎儿组的孕妇年龄、孕周、产次无统计学差异(P>0.05)。胎儿异常的诊断参照产前B超诊断及染色体检查结果。所有病例均在有创性检查前采取血样,并排除病理妊娠。每个病例取外周静脉血5ml,置于EDTA抗凝管,室温保存备用。此外,取脐血和正常未育未孕女性外周血标本作阳性和阴性对照。1.2方法1.2.1细胞分离制片标本采集后6h内室温下检测。以PBS溶液1:1稀释后铺于2ml淋巴细胞分离液上,3000r/min离心30min,取单个核细胞层,PBS离心洗涤,制成细胞悬液。用细胞计数仪读数并调整细胞浓度至约1×105/ml后,制成细胞甩片。1.2.2瑞氏染色和细胞计数常规瑞氏染色。在高倍镜下观察靶区,根据形态学特征辨别胎儿有核红细胞。母血中胎儿有核红细胞的形态学特征为瑞氏染色后细胞呈圆形或椭圆形,直径15～18μm,胞核圆形,染色质深紫红色,粗颗粒或碎墨状,胞浆量多,呈蓝紫色或蓝色,核周淡染区明显,胞核与胞浆比约为1:2。记录每例样本有核红细胞总数。母血中胎儿有核红细胞数以平均每毫升母血中的有核红细胞数表示。1.3胎儿核型分析和性别判定孕早期自然流产者行绒毛细胞核型分析,孕中期和晚期取脐血或胎儿心脏血进行染色体分析,分娩后取新生儿血进行染色体分析,以判断核型和婴儿性别。正常病例根据产后第二性征判定性别。1.4统计学处理采用t检验及直线相关和回归分析,数据分析应用SAS软件。2结果2.1胎儿异常的分布见表1。在正常妊娠中,3例母血中未发现有核红细胞,占4.41%。脐血标本中,有核红细胞数量为342/ml,正常未孕未育妇女外周血中未发现有核红细胞。表1胎儿异常的分布B超染色体分析n外观无异常47,XY,+211巨肠畸形无异常1脑积水无异常4脐膨出无异常2死胎47,XY,+211死胎无异常2小头畸形无异常1肢体畸形46,XY,Add(5)(pter)1肢体畸形无异常5总计182.2正常胎儿组和异常胎儿组的母体外周血中胎334儿有核红细胞计数胎儿异常组母血中胎儿有核红细胞数量与正常胎儿组相比,在各孕期差异均有高度显著性(P<0.01)。见表2。表2母血中胎儿有核红细胞计数结果(?x±s,V/ml)孕期正常妊娠胎儿异常nRnR早中孕4212.56±8.85644.42±16.7233晚孕2619.88±14.401239.53±26.5133总数6814.23±12.011838.73±24.973333P<0.01vs正常妊娠2.3母体外周血中胎儿有核红细胞数量与孕周的关系胎儿正常组母血中胎儿有核红细胞数量与孕周显著相关,相关系数为R1=0.491(R1>R0.05)。胎儿异常组母血中胎儿有核红细胞数量与孕周无显著相关性,相关系数为R2=0.283(R2<R0.05)。2.4不同胎儿性别母体外周血中胎儿有核红细胞数量比较两组差异无显著性(P>0.05)。见表3。表3不同胎儿性别母血FNRBC数量的比较(?x±s,V/ml)孕期男胎女胎nRnR早孕45.28±7.0975.00±1.41中孕1614.31±9.511511.27±6.87晚孕1519.80±10.731120.04±20.44总计3516.26±11.543313.77±19.58P>0.05vs组间同孕期比较3讨论3.1母血中胎儿有核红细胞数量及其影响因素正常成人外周血中不存在有核红细胞,但妊娠后由于母体与胎儿之间有母胎输血,胎儿细胞有可能通过胎盘,进入母体循环,所以,在排除血液系统疾病后,妊娠妇女外周血中如果发现有核红细胞,应来自胎儿。胎儿有核红细胞在孕期中持续存在于母血中,寿命较短(≤90d),不受既往妊娠影响;易通过形态学及特殊的血红蛋白反应进行鉴别;属单个核细胞,含胎儿全部基因组,且含量在1:105～1:109之间,只要有适当的方法便足能作遗传学和分子生物学分析。在母体循环中胎儿细胞的数量与胎儿本身产生红细胞的多寡,胎盘的完整性以及母体全身免疫和对胎儿的局部免疫状态密切相关。孕妇年龄、孕次、产次及孕周对母血中胎儿有核红细胞计数均有影响。母血中胎儿有核红细胞还可能因实验方法的不同而有差异。本实验结果表明,正常妊娠时,母血中胎儿有核红细胞约为14.23±12.01/ml,稍高于以往报道2,可能是因为我们采用了单密度梯度离心法及瑞氏染色,操作步骤少,减少了细胞丢失,保持了细胞形态完整,而且应用赖氨酸包片,从而提高了样现代妇产科进展20xx年9月第12卷第5期ProgObstetGynecol,Sep.2003,Vol.12,No.5品检出率。3.2母血中胎儿有核红细胞数量与孕周及胎儿性别的关系母血中胎儿有核红细胞数量在孕12～14周最多3,其后随孕周增长逐渐减少,但也有母血中胎儿有核红细胞数量与孕周无关的报道4。本实验结果表明,正常胎儿组母血中胎儿有核红细胞数量与孕周有显著直线相关性,母体循环中胎母细胞的比例随孕龄增加。我们推测,随着胎儿发育成熟,虽然胎儿血液中有核红细胞在全血细胞中所占比例逐渐降低,但与此同时,胎儿的血容量逐渐增加,与母体交换加快;而且,细胞滋养层外壳在胚胎及胎儿发育过程中迅速增殖,使母体循环和胎儿循环间的物质交换面积大大增加。此外,胎盘血流量随妊娠进展逐渐增加。这些可能是母血中胎儿有核红细胞数量随孕周显著增加的主要原因5。Sekizawa等6报道,从孕男性胎儿与女性胎儿的母体外周血中用流式细胞术分离获得的胎儿细胞,男胎组细胞数量高于女胎组。但本实验中,男胎组母体外周血中在各孕期胎儿有核红细胞虽较女胎组高,但差异无显著性,可能与检测方法不同有关。正常胎儿组有3例未发现有核红细胞,占此组病例数的4.41%,可能与样本个体差异,以及实验中的各种影响因素有关。3.3母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系胎儿异常时,母血中胎儿有核红细胞数量明显增多,约为38.73±24.97/ml。已有报道1,PCR定量分析表明,非整倍体妊娠母血中胎儿DNA含量明显增加,与本实验结果一致。此外,本实验显示,在胎儿异常时,母血中平均有核红细胞的数量约为孕正常胎儿组的3倍,2例孕21三体胎儿患者为正常妊娠的6～9倍。这可能与胎儿异常时,胎儿和胎盘的免疫损伤重,导致母胎血液交换明显增加有关,还与畸形或三体患儿本身可产生更多胎儿有核红细胞且寿命更长有关。此外,有报道指出,染色体异常的胎儿细胞可自前次自然流产或妊娠持续存在至本次妊娠,持续存在率为50%～60%,这也可能是异常胎儿时母血中胎儿有核红细胞数量增多的原因之一。异常胎儿组母血中胎儿有核红细胞数量与孕周无明显相关性,可能与胎儿、胎盘发育异常,或样本数量较少,致差异不显著有关。3.4母血中胎儿有核红细胞计数的应用本方法操作简便、易掌握,无需昂贵器材及复杂的试验程序。但正常和异常胎儿组之间的母血中胎儿有核红细胞数量,有待经过大量调查,统计出临界值。对血中胎儿有核红细胞的鉴别和计数方法也需进一步改进,以提高试验的特异性。参考文献123456DaneSC,RonaldJ,BruchS,etal.Prenataldiagnosisusingfetalcellsisolatedfrommaternalperipheralblood:AreviewJ.ClinObstetGynecol,1996,39:8012813辜士扬,张颖,任晨春.用荧光原位杂交从母血中检测胎儿细胞J.中华医学遗传学杂志,2000,4:64267马旭,王毅,王琳.经母血采集胎儿细胞进行产前诊断的最佳时间探讨J.中华妇产科杂志,1997,5:2932295LimTH,TanAS,GohVH.Relationshipbetweengestationalageandquantityoffetaltrophoblastsandnucleatederythro2cytesinmaternalperipheralbloodJ.PrenatDiagn,2001,21:14221罗丽兰,主编.生殖免疫学M.武汉:湖北科技出版社,1998.47259SekizawaA,SamuraO,BiachiDW,etal.Fetalcellrecycling:diagnosisofgenderandRhDgenotypeinthesamefetalcellretrievedfrommaternalbloodJ.AmJObstetGynecol,1996,181:1