肝炎实验室检查课件

肝炎实验室检查杭州迪安医学检验中心张孝永

2009.4.14肝炎种类根据病因，肝炎可以分为五大类：1病毒性肝炎最常见也是危害最大的一类肝炎，传染性强。病毒性肝炎种类较多，在诊断、治疗前宜先明确分类。现已明确的肝炎病毒有甲、乙、丙、丁、戊（即A、B、C、D、E型）。1995年又分报告了庚型（G型）肝炎，目前国际上通称为HGV。甲型和戊型肝炎病毒通过肠道传染，病毒污染水源或食物后可形成大流行，不会发展为慢性，也不会引起肝硬化，并且患病后有终身免疫力。乙、丙、丁型病毒性肝炎均通过血液传播，少数也可因密切接触病人的唾液、精液、乳汁等感染，如夫妻之间、母婴之间的相互传染。乙、丙型肝炎可转为慢性，并可能演变为肝硬化甚至肝癌。2非肝炎病毒感染：如巨细胞病毒、EB病毒感染后所致的肝脏损害，预后良好。

3酒精性肝损害：大量和长期喝酒，肝脏负担过重，会导致肝细胞损伤，发生肝细胞的坏死和炎症。4药物性肝损害

药物引起的肝损害有两种情况：一种是药物的毒性作用，如多种抗癌药可能直接或间接损伤肝细胞。另一种与病人的特异性体质有关，也就是说，某一类人用某种药后会发生肝损害，发生率较低，但无法预测。有青霉素过敏、哮喘、过敏性鼻炎等过敏性体质的病人应慎用或避免使用磺胺、对氨基水杨酸等药物，以免发生肝损害。

5自身免疫性肝炎：比较少见，多与其它自身免疫性疾病相伴。病毒性肝炎的诊断1.有流行病学史如密切接触病毒性肝炎患者或近期有输血史，输血制品或不洁注射史以及既往肝炎病史等。

2.有临床症状：食欲不振、恶心、厌油、乏力、腹胀、巩膜黄染，茶色尿、肝区痛、肝大或脾大体征。3.生化指标：血清ALT（丙氨酸转氨酶）活力升高，有黄疸者血清胆红素升高。

4.病原学检查甲型：抗HAV－IgM阳性，即可确诊。乙型：HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗HBc－IgM阳性）或HBVDNA阳性。丙型：抗HCV-IgG、HCV-IgM阳性，HCV－RNA阳性。丁型：抗HDV－IgM阳性或HDV－RNA阳性。戊型：抗HEV－IgM阳性。庚型：抗HGV－IgM阳性。HAV的检查a.检测抗原：

双抗体夹心法,HAV抗原性很强,且只有一个抗原型别,对检测十分有利,但是缺乏商品化的试剂,难应用于临床病例的确诊b.检测核酸：分子杂交和PCR法,敏感度更高,同时对标本要求也更高,要求无菌血清,血浆不能用肝素抗凝,采集的标本应尽快分离出血清或血浆,4-6h内冷藏或冻存c.检测抗体：检测IgM抗体和IgG抗体,前者常采用捕获法,表明机体存在近期感染;后者须检测双份血清,抗体效价明显升高,表明近期感染,单份血清抗体阳性,仅提示既往感染HBV的检查乙肝流行性现状：

全世界有人口半数以上曾经被乙肝病毒感染过，迄今为止，尚未发现无HBsAg阳性携带者地区。全世界有将近2亿人为HBsAg携带者，其中78%分布在亚太地区我国作为世界第一的乙肝大国，约有1．2亿人携带乙肝病毒，其中慢性乙肝病人3000万乙肝病毒的特性１）顽强的抵抗力：对热、对低温、对干燥、对紫外线及一般浓度的化学消毒剂，都能耐受；在零下20度时可存活20年；在37度时可存活7天，在55度时仍然能存活6小时；酒精、来苏儿、碘酒等对它不起作用。但是，加热到100度10分钟可使其失去传染活性，对0.5％过氧乙酸、3％漂白粉、0.2％新洁尔灭敏感

４）慢性化：特别是胎儿期及幼儿期感染，多为慢性化过程，长期携带HBV，体内呈“免疫耐受”状态，不能将病毒清除，这个过程可长达10-30年或更久，是重要的传染源

５）致癌性：HBV是肝癌的重要病因，约80％-90％的肝癌有乙肝背景。癌变的原因是HBV的X基因整合到肝细胞基因上，发生突变，导致肝癌。ＨＢＶ结构乙肝病毒的形态在电子显微镜下可以观察到乙肝病毒3种不同的形态：大球形颗粒、小球形颗粒和管形颗粒。大球形颗粒就是Dano颗粒。小形球颗粒，是乙肝病毒感染后血液中最多见的一种。它由表面抗原组成，并不含有乙肝病毒的DNA以及DNA聚合酶。管形颗粒实际上是由几个小球形颗粒聚合在一起而成。不管是小球还是管形颗粒都不是完整的乙肝病毒颗粒，它们是乙肝病毒在感染肝细胞时合成过剩的囊膜，游离在人体的血循环中复制效果图ＨＢＶ复制的基本要素催化剂：乙肝病毒DNA聚合酶模板：在感染肝细胞之后，半环状的DNA正链就会以负链为模板，在催化剂──乙肝病毒DNA聚合酶的作用下延长，最终形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因组就形成了一个完全环状的双股DNA.称做共价闭合环状DNA（即cccDNA），这就是乙肝病毒复制的原始模板cccDNA是乙肝病毒复制中重要的中间产物，一旦它在肝细胞核内形成，就具有了高度的稳定性，可长期存在于肝细胞内，很难完全清除。只要肝细胞内有很少量的cccDNA，当停药后，核内的cccDNA又可以再次成为病毒复制的“模型”，继续复制乙肝病毒的DNA，这也是乙肝很难根治的原因。

乙肝六项１）HBsAg：感染后４-７周出项，ALT上升前数周，急性自限性感染者，HBsAg在血清中存在时间不超过６个月。Ｓ基因发生变异，导致HBsAg多肽氨基酸序列改变的ＨＢＶ感染，现行的HBsAg检测试剂无法检出，即HBsAg阴性的ＨＢＶ感染２）HBsAb：中和性抗体，对同型病毒的再感染有保护作用，可持续存在数年，是乙肝痊愈及HBsAg疫苗免疫成功的标志３）HBeAg:HBV复制的指标之一在潜伏期与HBsAg同时或在HBsAg出现数天后可在血清中检出，存在时间一般不超过10周，如超过则提示感染转为慢性化４）HBeAb：出现于HBeAg转阴后，出现比HBcAb晚但消失较早常见模式１）大三阳２）小三阳３）１、５４）２、４、５或２、５５）单独HBsAg６）单独HBcAb乙型肝炎血清学乙肝模式及临床意义.xls标志物常见

和少见

模式及其临床意义

丙型肝炎的实验室诊断丙型肝炎(HepatitisC，HC)：

是丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus，HCV)引起的世界范围内流行、且严重危害人们身心健康的传染病之一,尤其在亚洲、非洲等一些发展中国家,流行率、发病率均较高。感染率：全世界约1.7亿以上HCV感染者,我国将近4000万,为丙肝的高流行区,感染率在0.9-5.1%之间,平均3.1%；暴露于HCV后的1～3周即可在感染者外周血检测到HCV

RNA。感染者出现临床症状时,血清中已经可以检测到HCV

RNA.仅50～70%的患者抗-HCV阳性,3个月后90%患者抗-HCV阳性。慢性HCV

RNA持续阳性6个月以上为慢性感染。一旦慢性丙型肝炎发生,HCV

RNA滴度开始稳定,感染6～12个月后自发痊愈的病例很少见。HCV

RNA很少发生自发清除,除非进行有效的抗病毒治疗。1抗-HCVIgG检测2抗-HCVIgM检测3HCV特异性抗原的检测4HCVRNA的检测5HCV基因型、亚型的检测：6HCV的血清学分型：3母婴传播：HCV感染母亲所生婴儿HCV的筛查和诊断不能依赖抗HCV检测,而是HCVRNA。由于抗-HCVIgG可以通过胎盘,不管是否传播,抗-HCV分娩后几个月至半年内仍为阳性;HCV的母婴传播(23～40%)一旦发生,在分娩后几天或稍晚即可在新生儿血清中测到HCV-RNA4医务人员机会性感染的诊断:医务人员一旦感染了HCV,在暴露1-2周后即可检测到HCVRNA,首次检测时间在暴露后1周,第二次在第周。HCVRNA阳性是急性感染的标志,但并不一定立即给予治疗,仅在ALT升高和出现症状时开始治疗。HDV检测a.检测抗原:用于研究或急性丁肝的诊断b.检测核酸:敏感性和特异性均高c.检测抗体:IgM(存在数周)和IgG(效价升高)同步感染:HBV、HDV-IgM抗体阳性重叠感染:HBV-IgG抗体阳性,及HDV-IgM抗体阳性,HDVRNA阳性或HDV-IgG抗体水平升高HEV检测a.检测核酸:

诊断急性戊肝特异性最好,胆汁和粪便也可用于检测,由于技术上的难度,难以常规应用b.检测抗体:

IgM型为近