t-fixation-补体结合(共14张PPT)

Chapter20

LaboratoryDiagnosisandprevention、treatment病毒感染的诊断和防治1第1页，共14页。Section1Diagnosis

Ⅰ、collectionofsample标本的采集Blood,Urine,Stool,nasalswab鼻拭,throatswab咽拭,saliva唾液,sputum,rectalswab直肠拭,vesiclefluid囊泡液,

tissuebiopsy活组织检查,cerebrospinalfluid,etal.Asepsis无菌操作含杂菌的应加入高浓度抗生素2第2页，共14页。Ⅱ、Cultureandidentify

病毒的培养与鉴定（一）※病毒的培养Culture：用活细胞动物（Animals）接种鸡胚（Embryonatedeggs）接种组织细胞培养（tissuecellculture）

Primarycultures原代细胞

Diploidcellcultures传代细胞

Continuouscultures二倍体细胞3第3页，共14页。常用的细胞培养4第4页，共14页。（二）病毒的鉴定identify1、细胞形态学改变：microscopyCytopathiceffect（CPE）致细胞病变效应

5第5页，共14页。InclusionBodies：狂犬病毒包涵体（Negribody）6第6页，共14页。巨细胞病毒包涵体7第7页，共14页。PCR(Polymerasechainreaction)（一）※病毒的培养Culture：用活细胞Enzymeactivities(reversetranscriptase逆转录酶)Hemagglutinationandhemadsorption血细胞吸附Antigendetection(ELISA,Westernblot)鸡胚（Embryonatedeggs）接种Directdetection:Cytopathiceffect（CPE）致细胞病变效应5、Detectionofviralproteins

(antigensandenzymes)Neutralization中和试验ImmuneElectronmicroscopy免疫电镜技术:

Humanrotavirus;HAV;病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。Proteinpatterns(electrophoresis电泳)2、病毒数量和感染性测定（1）、空斑形成单位（plaqueformingunits）病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起50%发生死亡或病变的最小量。

病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。（2）、LD50或TCID50

(50%致死量或50%组织细胞感染量）8第8页，共14页。TCID50

(50%Tissuecellinfectivedose)TCID50isdefinedasthatdilution稀释ofviruswhichwillcauseCPEin50%ofagivenbatch批ofcellculture3、电子显微镜检查ElectronmicroscopyDirectdetection:Humanrotavirus轮状病毒;HAV;HBV;

Smallpoxvirus天花病毒;Herpesvirus.ImmuneElectronmicroscopy免疫电镜技术:

Humanrotavirus;HAV;9第9页，共14页。4、serologydiagnosis血清学诊断Complementfixation补体结合试验Hemagglutinationinhibition血凝与血凝抑制试验Neutralization中和试验Immunofluorescence(directorindirect)

免疫荧光试验Latexagglutination乳胶凝集试验ELISA10第10页，共14页。5、Detectionofviralproteins

(antigensandenzymes)Antigendetection(ELISA,Westernblot)Hemagglutinationandhemadsorption血细胞吸附Enzymeactivities(reversetranscriptase逆转录酶)Proteinpatterns(electrophoresis电泳)11第11页，共14页。6、DetectionofviralgeneticmaterialPCR(Polymerasechainreaction)RT-PCR(Reversetranscriptasepolymerasechainreaction)Southern（DNA),Northern(RNA),anddotblotsDNAgenomehybridizationinsitu(cytochemistry)ElectrophoreticmobilitiesofRNAforsegmentedRNAviruses(Electrophoresis)Restrictionendonucleasecleavagepatterns12第12页，共14页。Proteinpatterns(electrophoresis电泳)鸡胚（Embryonatedeggs）接种1、细胞形态学改变：microscopyNeutralization中和试验Humanrotavirus轮状病毒;HAV;HBV;

Smallpoxvirus天花病毒;Herpesvirus.ImmuneElectronmicroscopy免疫电镜技术:

Humanrotavirus;HAV;Antigendetection(ELISA,Westernblot)TCID50isdefinedasthatdilution稀释ofviruswhichwillcauseCPEin50%ofagivenbatch批ofcellcultureGeneengineeredvaccine基因工程疫苗Hemagglutinationandhemadsorption血细胞吸附Enzymeactivities(reversetranscriptase逆转录酶)组织细胞培养（tissuecellculture）（一）※病毒的培养Culture：用活细胞Directdetection:（一）※病毒的培养Culture：用活细胞Section2

preventionandtreatment

病毒感染的防治（一）Activeimmunization主动免疫Attenuatedlivevaccine减毒活疫苗Inactivatedvaccine灭活疫苗Subunitvaccine亚单位疫苗Geneengineered