实验动物质量控制课件

实验动物质量控制Tel:82805273实验动物质量营养控制遗传控制微生物控制环境控制实验动物质量控制怎样才能养好实验动物

作好动物实验？*从种子中心引种*拥有合格的饲养管理人员*执行标准操作规范（SOP）*实验动物种群饲养在合格的实验动物繁育、生产设施（普通环境、屏障环境、隔离环境）内。*使用合格的饲料*使用合格的实验动物（遗传学分类和按微生物控制分类）*合格的实验动物饲养在合格动物实验设施（普通环境、屏障环境、隔离环境）内。*科技人员要持证上岗*特殊实验需在特殊环境（感染、放射、转基因、GLP等）中进行操作，确保实验人员及周围环境不受伤害。近交系封闭群（远交群）杂交群近交系（InbredStrain)定义在一个动物群体中，任何个体基因组中99%以上的等位位点为纯合时定义为近交系。经连续20代以上的全同胞兄妹交配或亲子交配，近交系数大于99%，品系内所有个体都可追溯到第20代或以后代数的一对共同祖先。近交系数：群体中某个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。近交系（InbredStrain)命名一般以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名。BALB,DBA,TA1,C3H等。一些历史较长，已经广泛使用并获得认可的品系除外，如129等。亚系（Substrain)定义一个近交系内各个分支的动物之间，因遗传分化而产生差异，成为近交系的亚系。亚系的形成兄妹交配20-40代时形成的分支；主要原因是残留杂合某分支与其他分支分开繁殖超过100代；主要原因是突变发现一个分支与其他分支的差异。原因为残留杂合、突变或遗传污染亚系（Substrain)亚系命名当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时，可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示亚系。如：C57BL/6J，C57BL/10J分别表示由美国杰克逊研究所保持的C57BL近交系的两个亚系。作为以上命名方法的例外情况是一些建立及命名较早，并为人们所熟知的近交系，亚系名称可用小写英文字母表示，如BALB/c、C57BR/cd等。

由于遗传污染形成的亚系，通常与原品系之间遗传差异较大，因此对这样形成的亚系应重新命名。例如由GLaxo保持的A近交系在发生遗传污染后，重新命名为A2G。

近交系的名称缩写

近交系名称缩写名称C57BL/6B6BALB/cCDBA/2D2C3HC3常用亚系符号N或NIH:美国国立卫生研究院J或Jax:TheJacksonLaboratoryHe:美国NCI的W.E.Heston博士An:美国国立肿瘤研究所（NCI)Jie:日本实验动物中央研究所Ola:英国牛津郡实验动物场近交系动物命名实例DBA/1fC57BL/6JDBA:小鼠品系名1：亚系名f：表示代乳C57BL:代乳母鼠品系名称6：亚系名J：亚系名特殊类型的近交系重组近交系（RecombinantInbredStrain)重组同类系（RecombinantCongenicStrain)同源突变系（CoisogenicInbredstrain)同源导入系（CongenicInbredStrain)重组近交系(RI)定义：由两个近交系杂交后，经连续20代以上兄妹交配育成的近交系。命名：由两个亲代近交系的缩写名称中间加大写英文字母X。重组同类系(RC)定义：由两个近交系杂交后，子代与两个亲代中的一个进行数次回交（通常2次），再经不对特殊基因选择的近亲交配（通常大于14代）而育成的近交系。命名：两个亲代近交系缩写名称中间加小写字母c。同源导入系定义：通过回交（backcross)方式形成的一个与原来的近交系只是在一个很小的染色体片段上有所新的近不同的新的近交系。要求至少回交10个世代，供体品系的基因组占基因组总量在0.01以下。同源导入系命名：由以下三部分组成：a.接受导入近交系缩写名称；b.提供导入基因的近交系缩写名称并与a之间用英文句号分开；c.导入基因符号（英文斜体），与b之间用连字符分开。如：B10.129-H-12b,表示该同类系背景为C57BL/10,导入基因为H-12b,基因提供者为129。封闭群（ClosedColony)N:NIH美国卫生研究院（N)保持的NIH封闭群小鼠Lac:LACA英国实验动物中心（Lac)保持的LACA封闭群小鼠某些命名较早，又广为人知的封闭群动物，名称与上述规则不一致时，仍可沿用其原来的名称。如：Wistar大鼠，日本的ddy小鼠等把保持者的缩写名称放在种群名称的前面，二者之间用冒号分开，是封闭群动物与近交系动物命名中最显著的区别近交系命名规则中的一些符号也适用于封闭群动物的命名封闭群动物的特点遗传组成具有很高的杂合性具有类似于人类群体遗传异质性的遗传组成具有较强的繁殖力、生活力和抵抗力突变种所携带的突变基因通常导致动物在某方面的异常，从而成为生命科学研究的模型杂交群（Hybrids)定义由不同品系或种群之间杂交产生的后代杂交一代动物（F1代)：两个不同近交系或种群杂交所生的第一代动物命名

雌性亲代名称在前，雄性亲代名称居后，二者之间以大写英文字母“X”相连，将以上部分用括号括起，再在其后标明杂交的代数（如F1、F2等）

品系或种群的名称可使用通用的缩写名称

例如：

（C57BL/6XDBA/2）F1=B6D2F1

表示以C57BL/6为母系,

DBA/2为父系杂交后生育的杂交一代,可简写为

B6D2F1.

F1动物的特征和应用遗传和表型上的一致性：表型变异率低，对周围环境变化适应性较强，实验反应高度均一；杂交优势：具较强的生命力和对疾病的抵抗能力，寿命较长，适合于保存某些有害基因和长期慢性致死实验，也可作为代乳动物以及卵、胚胎和卵巢移植的受体；杂合的遗传组成：同时具有两个亲本品系的特点，可接受两个亲本品系的细胞、组织、器官和肿瘤移植。如何保持实验动物遗传稳定？严格的繁育制度按期进行遗传监测

实验动物微生物与寄生虫控制

前言实验动物传染病、寄生虫质量控制是实验动物标准化的重要内容之一。因为：1、实验动物感染的某些人兽共患微生物、寄生虫能够导致我们实验工作者感染其共患疾病；2、直接导致实验动物的大量死亡；3、结果不真实。前言

国家标准要求总共排除20种以上细菌、25种以上病毒，8种以上寄生虫。

第一节按微生物学和寄生虫学质量控制分类

按微生物和寄生虫的控制程度，将实验动物划分为1.普通级动物(ConventionalAnimal,C.V)2.清洁动物(CleanAnimal,C.L)3.无特定病原体动物(SpecificPathogenFree,SPF)4.无菌动物(GermfreeAnimal,G.F)四个等级，后者包括悉生动物。饲养在普通环境中，不携带人畜共患病和动物烈性传染病病原体的动物。如鼠痘病毒、流行性出血热病毒、弓形虫。（ConventionalAnimal,CV)

饲养在屏障环境，除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。如鼠肝炎病毒、仙台病毒、体内、外寄生虫等。无特定病原体动物

（SpecificPathogen-freeAnimal,SPF）饲养在屏障环境，无特定病原体的动物。如绿脓杆菌等。无菌动物

(GermfreeAnimal,GF)

饲养在隔离环境，体内外无任何可检出的生命体已知菌动物动物体内外所携带的生命体是已知的,也可叫已知菌动物。悉生动物悉生动物是由无细菌动物植入已知细菌而得到的。广义的悉生动物包括：

无菌动物（GermfreeAnimal）单菌动物（MonognoxenicAnimal）双菌动物（DignoxenicAnimal）多菌动物（PolygnoxenicAnimal）VAF(virusantibodiesfree)plus概念各种实验动物具有的等级：1、小鼠和大鼠只有清洁级、SPF级和无菌级动物；没有普通级动物。2、豚鼠、地鼠和家兔则有普通级、清洁级、SPF级和无菌级四个等级动物。3、犬和猴只有普通级和SPF级动物；没有清洁级和无菌级动物。第二节微生物和寄生虫感染的危害性一、影响实验结果：鼠肝炎二、影响动物生产：动物死亡三、威胁人类健康：人兽共患病四、污染实验材料：微生物污染细胞培养物五、寄生虫对实验动物的影响：影响实验结果第三节实验动物常见感染性疾病一、传染病的分类（一）人兽共患病原——狂犬病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、沙门氏菌、志贺氏菌、结核分枝杆菌、致病性皮肤真菌以及弓形体（虫）等。（二）主要对人致病性强的人兽共患病原——猴疱疹病毒（B病毒）、流行性出血热病毒。（三）动物烈性传染病病原——鼠痘病毒、兔出血症病毒、多杀性巴氏杆菌、鼠棒状杆菌、泰泽氏菌等。（四）主要对宿主以外动物致病性强的动物烈性传染病病原——松鼠猴疱疹病毒。（五）一般传染病病原——小鼠肝炎病毒、仙台病毒、鼠支原体等。（六）污染生物制剂、细胞培养物的病原——鸡白血病病毒、猴病毒40。二、重要的人兽共患病（一）流行性出血热(肾综合征出血热)—流行性出血热病毒（汉坦病毒）感染1.传染源：携带流行性出血热病毒的黑线姬鼠、褐家鼠、实验大鼠。2.传播途径：接触传染源及其排泄物、气溶胶传播。3.易感者：人。动物感染无症状表现。4.症状表现：高热、头痛、肌肉痛、结膜水肿、充血（点状），最后肾衰竭、尿毒症、死亡。（二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎——淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒感染1.传染源：携带淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒的小家鼠、金黄仓鼠。2.传播途径：传染源经唾液、鼻分泌物和尿液传播，也可经子宫和乳汁传给后代。3.易感者：人、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、犬、猴、鸡、马、兔、棉鼠。4.症状表现：①大脑型：脑脊髓炎；②内脏型：被毛粗乱、结膜炎、消瘦、腹水、昏睡、死亡；③迟发型：被毛粗乱、行动异常、蛋白尿、发育不良、生长缓慢。（三）狂犬病——狂犬病毒感染1.传染源：携带狂犬病毒的犬、狐、山狗、郊狼、豺、狼、袋鼠、棉鼠。2.传播途径：被传染源动物咬伤。3.易感者：人，几乎所有温血动物。最易感犬、狐、山狗、郊狼、豺、狼、袋鼠、棉鼠；次易感仓鼠、臭鼬、浣熊、猫、蝙蝠、猫鼬、豚鼠、兔、啮齿类动物。4.症状表现：①前驱期或沉郁期：举止异常、瞳孔散大、反射功能亢进、咬伤处发痒；②兴奋期或狂暴期：病犬狂躁不安、攻击性强、自咬、奔走、流涎、声音嘶哑、下颌下垂；③麻痹期：精神高度迟钝、四肢麻痹、中枢衰竭死亡。（四）猴B病毒病——猴B病毒感染1.传染源：携带猴B病毒（疱疹病毒）的恒河猴。2.传播途径：猴性交，人被猴咬伤。3.易感者：人、恒河猴、帽猴、食蟹猴、台湾猴、日本猕猴、红面猴、家兔。4.症状表现：①人——伤口疼痛、红肿、出现疱疹并有渗出物，出现脊髓炎或脑脊髓炎，最终麻痹、死亡。②猴——舌表面和口腔黏膜出现小疱疹，7－14天自愈，鼻腔常有黏液或脓性分泌物，常并发结膜炎和腹泻。③兔——最易感，表现感觉过敏、斜颈、呼吸困难、流涎、眼鼻分泌物增多、结膜炎和角膜浑浊、死亡。（五）弓形虫病——弓形虫（体）感染1.传染源：携带弓形虫（体）的猫。2.传播途径：人和动物吞食侵袭性卵囊。3.易感者；猫为终末宿主。人、小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、犬、猴为中间宿主。4.症状表现：在人或动物的内脏器官进行无性生殖，形成包囊，随包囊位置引起相应症状，妇女子宫存在包囊容易导致流产。（六）沙门氏菌病——沙门氏菌感染1.传染源：携带沙门氏菌的人和动物。2.传播途径：消化道传播。人食用被沙门氏菌污染的食物和饮水，动物吃了被沙门氏菌污染的动物饲料、饮水和垫料。3.易感者：人、豚鼠、小鼠、大鼠、兔、猴、猪、犬。主要经消化道传播。4.症状表现：腹泻和失水的相应症状，严重的休克、死亡。（七）钩端螺旋体病——钩端螺旋体感染1.传染源：携带钩端螺旋体的几乎所有的温血动物，鼠类是最重要的储存宿主。2.传播途径：从传染源尿排出的钩端螺旋体遍布水田、池塘、沼泽及淤泥，生存数月或更长。通过皮肤、黏膜或经食入消化道感染。3.易感者：人，鼠类，几乎所有的温血动物。4.症状表现：发热、黄疸、肌肉酸痛（人）、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和黏膜坏死及水肿。（八）结核分枝杆菌病——结核分枝杆菌感染1.传染源：携带结核分枝杆菌的人、猴，还有犬、豚鼠、兔、猫。2.传播途径：人－呼吸道（人型结核）、猴——消化道和呼吸道（人型和牛型结核）3.易感者：人、猴、犬、豚鼠、兔、猫。4.症状表现：咳嗽、咯血、消瘦、低热，后期呼吸困难、皮肤结核、淋巴结肿大。（九）志贺菌病——志贺菌感染1.传染源：携带志贺菌的人和猴。2.传播途径：苍蝇和蟑螂传播，人和猴经口食入被志贺菌污染的食物和饮水。3.易感者：人和猴。4.症状表现：人和猴主要表现为细菌性痢疾和急性胃肠炎。三、主要的动物烈性传染病（一）鼠痘—鼠痘（传染性脱脚病）病毒感染1.传染源：携带鼠痘病毒的野小鼠、病小鼠和带毒小鼠。2.传播途径：经呼吸道、消化道、皮肤伤口传播。3.易感者：实验小鼠，主要是DBA、CBA、BALB/C、A、C3H等近交系小鼠。4.症状表现：①急性型：绝食、昏睡、被毛逆立、松乱、头颈肿胀、结膜炎、死亡；②亚急性型：典型脱脚表现；③慢性型：疾病后期转慢性，影响生长发育、繁殖。（二）兔出血症——兔出血症病毒感染1.传染源：携带兔出血症（兔瘟）病毒的家兔。2.传播途径：直接接触，通过接触病兔排泄物、分泌物污染的饲料、饮水和物品传染。3.易感者：家兔。4.症状表现：①超急性型；突然兴奋、挣扎、抽搐、惨叫，死亡。②慢性型：多见3月龄兔，精神欠佳、食欲减退、喜饮水、被毛无光、消瘦、体温升高。四、常见的微生物和寄生虫感染（一）仙台病毒感染1.传染源：携带仙台病毒的小鼠和大鼠。2.传播途径：直接接触和空气传播。3.易感者：未感染过仙台病毒的小鼠，新生乳鼠、未成年小鼠。大鼠、仓鼠、豚鼠。4.症状表现：类似感冒症状，打“呼噜”、被毛粗乱、发育迟钝、体重下降、易诱发支原体感染。（二）小鼠肝炎——小鼠肝炎病毒感染1.传染源：携带小鼠肝炎病毒的小鼠。2.传播途径：经口和呼吸道传播。3.易感者：小鼠。4.症状表现：①急性型：乳鼠精神沉郁、食欲废绝、被毛粗乱、腹泻、消瘦、脱水，甚至死亡；②神经型：两后肢松弛性麻痹，结膜炎，全身抽搐，转圈运动，2－4天内死亡。（三）支原体病——支原体感染1.传染源：携带支原体的大鼠和小鼠。2.传播途径：病鼠呼吸道分泌物污染饲料、饮水、垫料、用具和环境。经直接接触和空气传播。3.易感者：大鼠、小鼠。4.症状表现：肺炎支原体致大鼠、小鼠肺炎及雌性生殖器炎症。（四）巴氏杆菌病——巴斯德杆菌感染1.传染源：携带多杀性巴斯德杆菌或嗜肺巴斯德杆菌的兔或啮齿类动物。2.传播途径：传染源的排泄物、分泌物污染饲料、饮水、用具和环境，经消化道传播。或飞沫经空气传播。3.易感者：兔或啮齿类动物等。4.症状表现：①：家兔感染多杀巴斯德杆菌后鼻腔充满黏液、被毛逆乱、食欲差、呼吸困难、头偏向一侧、结膜充血、流泪、眼睑肿胀；②：嗜肺巴斯德杆菌为隐性感染，可引起呼吸道以外器官化脓性病变。（五）呼肠弧病毒Ⅲ型病毒——呼肠弧病毒Ⅲ型病毒感染1.传染源：携带病毒的小鼠、豚鼠、仓鼠等。2.易感者：主要有小鼠、豚鼠、仓鼠。还有猴、牛、犬、鸡等。3.症状表现：成年鼠呈阴性感染，幼鼠感染后呈脂肪性下痢。（六）球虫病——艾美尔球虫感染1.传染源：携带艾美尔球虫的家兔。2.传播途径：家兔食入带有侵袭性卵囊的饲料和饮水。3.易感者：家兔。4.症状表现：①肠球虫病：精神沉郁、行动迟缓、食欲减退、腹泻与便秘交替，常因消瘦和衰竭死亡；②肝球虫病：黏膜黄染、腹部膨大。后期出现四肢痉挛或麻痹，死亡。（七）犬瘟热——犬瘟热病毒感染1.传染源：携带病原的犬。2.传播途径：接触传播、空气传播。3.易感者：主要是犬（特别幼犬），及狼、丛林狼、豺、狐、貂、雪貂、白鼬、臭鼬、伶鼬、南美鼬鼠、黄鼠狼、獾、水獭、浣熊、密熊、白鼻熊、小熊猫。4.症状表现：高热2-3天死亡。急性鼻卡他，支气管炎、卡他性肺炎、胃肠炎、神经症状。（八）传染性犬肝炎——犬腺病毒Ⅰ型感染1.传染源：携带病原的病犬和康复犬排出尿液携带病毒。2.传播途径：经直接接触病犬或接触被病原污染的用具传播。3.易感者：犬、狐狸、山狗、狼、浣熊、黑熊。4.症状表现：①最急性型：潜伏期6－9天，在呕吐、腹痛和腹泻后数小时死亡；②急性型：怕冷、高热、精神抑郁、食欲废绝、喜饮水、呕吐、腹泻、粪中带血；③亚急性性：角膜水肿——“蓝眼”病（特征）、咽炎、喉炎、头颈部水肿。（九）犬细小病毒病——犬细小病毒感染1.传染源：携带病原的病犬。2.传播途径：直接接触病犬或间接接触病犬污染的饲料、饮水和用具。3.易感者：主要有犬。还有郊狼、丛林犬、食蟹狐、鬣狗。4.症状表现：急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎。

肠炎病犬初期精神沉郁，厌食，偶见发热，软便或轻微呕吐，随后发展成为频繁呕吐和剧烈腹泻。起初粪便呈灰色，黄色或乳白色，带果冻状粘液，其后排出恶臭的酱油样或番茄汁样血便。病犬迅速脱水，消瘦，眼窝深陷，被毛凌乱，皮肤无弹性，耳鼻，四肢发凉，精神高度沉郁，休克，死亡。从病初症状轻微到严重一般不超过2天，整个病程一般不超过一周。

心肌炎型多见于4-6周龄幼犬，常无先兆性症状，或仅表现轻微腹泻，继而突然衰弱，呻吟，粘膜发绀，呼吸极度困难，脉搏快而弱，心脏听诊出现杂音，常在数小时内死亡。第四节实验动物的微生物和寄生虫控制国家标准按照国家实验动物标准要求：1、清洁级小鼠应排除10种细菌和5种病毒。2、SPF级小鼠应排除16种细菌和11种病毒。3、清洁级大鼠应排除10种细菌和2种病毒。4、SPF级大鼠应排除16种细菌和7种病毒。5、清洁级兔应排除7种细菌和1种病毒。6、SPF级兔应排除13种细菌和3种病毒。7、清洁级豚鼠应排除9种细菌和2种病毒。8、SPF级豚鼠应排除15种细菌和4种病毒。

请学员按照上述举例，完成表格中动物应排除的微生物的统计分类。第五节实验动物的卫生防疫与隔离措施一、实验动物的防疫原则（一）隔离饲养：各种动物要分开饲养。（二）引进动物严格检疫。（三）坚持卫生制度。（四）从业人员每年体检一次。（五）保种单位要定期对动物进行质量检查。（六）定期对大动物进行免疫接种。（七）隔离和无害化处理：严防野生动物进入实验室，死亡动物实施无害化处理。二、平时的预防措施严格执行饲养管理、卫生防疫制度及操作规程。做好各项记录。三、发生疫情时的扑灭措施及时发现、诊断和上报疫情（鼠痘、流行性出血热等），并通知邻近单位做好预防工作。四、消毒措施（一）预防性消毒：定期消毒动物房、笼架具、饮水。（二）随时消毒：发生传染病时，随时和定期消毒动物房、隔离场所，患病动物的分泌物、排泄物及被其污染的场所和笼器具。（三）终末消毒—物理和化学消毒法1、物理消毒法：高压蒸汽、高热煮沸、干烤消毒、火焰消毒、X射线或r射线、过滤消毒。2、化学消毒法：（1）液体消毒剂：石碳酸、过氧乙酸、来苏水、次氯酸。（2）蒸汽消毒：福尔马林、三聚甲醛。五、隔离措施隔离患病和可疑感染动物。第六节实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测一、检测要求：1、检测实验动物外观健康无异常；2、按国标对实验动物进行微生物学和寄生虫学检测。二、检测程序：1、寄生虫检测：取被毛、血液、皮肤检测体外寄生虫，取内脏、肠内容物和粪便检测体内寄生虫。2、微生物检测：取皮肤检测真菌，取血清检测病毒或其它病原的抗体，取脏器、肠内容物和气管分泌物分离细菌。

三、检测方法：参照相关实验动物国标进行。四、检测规则：1、检测频率（动物生产单位自检）普通级动物、清洁动物、SPF动物每3个月至少检测1次，无菌动物每年检测1次。每2-4周检查1次动物的生活环境标本和粪便标本。2、动物检测的采样数量：小于100只的群体，取样不少于5只；100-500只的群体，取样不少于10只；大于500只的群体，取样不少于20只。一般应选择成年动物。3、判定标准：如有1只动物的1项指标不合格，即判定该群动物不符合该等级标准。

实验动物环境设施控制

一、实验动物设施概念实验动物繁育、生产设施(ProductionAnimalFacility)

指用于实验动物繁育、生产的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。2.动物实验设施(AnimalexperimentalFacility)

指以研究、试验、教学、生物制品、药品生产等为目的进行实验动物饲育、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。3.特殊动物实验设施包括感染动物实验设施和应用放射性物质或其他特殊化学物质等进行动物实验的设施。

二实验动物环境设施分类

按照“实验动物环境与设施”GB14925-2001规定，实验动物环境设施分为三级，控制程度从低到高，依次为普通环境(opencondition)、屏障环境(barriercondition)和隔离环境(Isolationcondition)。1.普通环境(opencondition)：该环境设施符合动物居住的基本要求，不能完全控制传染因子，适用于饲养教学等用途的普通级实验动物(conventionalanimal)。

2.屏障环境(barriercondition)该环境设施适用于饲育清洁实验动物(Cleananimal)及无特定病原体实验动物（SPFspecificpathogenfreeanimal），该环境严格控制人员、物品和环境空气的进出。

屏障区内物品准备间

屏障区内饲育员更换笼具

屏障区内饲育员更换动物饮用水屏障区内育成动物观察1

屏障区内育成动物观察2

屏障区内育成动物观察3

工作人员每日工作完毕清洁工作(亚清洁走廊)

屏障区内日常维持消毒1

屏障环境设施图一屏障环境设施图二屏障环境设施图三

屏障区动物实验室的管理规范动物实验申请资料：1《动物实验申请表》一份。《北京市实验动物从业人员上岗证》。动物实验人员须知到过其他饲养场的人员,两周内不得再到一层饲养区工作。实验动物不得带出实验室，动物一旦离开，本实验室不再接收。禁止在洁净区内解开工作服暴露身体，严禁在操作中用手摸口、鼻、眼睛和头发的习惯，手更不得接触暴露部位。实验完毕后应自觉清理实验台及地面，并对实验区域进行消毒。动物实验人员须知实验人员在实验过程中不能乱串房间，不能随意调换动物的饲养位置。本动物实验室禁止携带书本进入，如需实验数据，仅允许单张记录纸经紫外照射传入实验室内。严禁自带笔支，本实验室已配备了各类常用笔以供使用。当实验人员因为某种原因无法亲自进入动物实验室实验或需要动物实验室人员辅助实验时，需填写《委托动物实验记录登记表》进行委托实验申请动物实验人员须知当发生动物逃逸时，应尽早捉住，单独放置，同时查明逃逸原因，判断所属笼盒并与实验人员确认，若核实未有结果，则将动物处死，按医疗废弃物处理。对其所经过的地方做彻底消毒。发生安全事故后，应主动向负责人员汇报，填写登记表。动物实验人员须知当实验操作时被刺伤和切伤或动物抓伤咬伤时，应及时出屏障区摘掉手套，挤出伤口出血液，在流动水下冲洗伤口，如小伤口用75%酒精、2%碘酒处理；伤口如血流不止、应用无菌纱布止血、并到医院作进一步处理。当发生停电情况时应采用备用电源并通知相关人员。使用备用电源期间，设施外人员不得进入，设施内人员不得开启任何屋门并站立不动等待处理。如果停电超过备用电源的控制时间，须与供电局联系。动物实验人员须知实验人员违反本实验室管理细则、操作规程者，视其情节轻重给予暂停或取消在实验室进行实验的处罚，造成的损失由课题组长（责任人）负责。据《北京市实验动物管理条理》的规定：禁止在非实验动物设施使用清洁级大小鼠进行科学研究。本人已知此规定，并对所造成的一切后果负责。当出现违规事故后，应主动到登记处填写事故通报单。否则加倍处罚。处罚分类：口头警告、警告批评、严重警告、记过处分、记大过处分、吊扣操作合格证，并全公司通报。人员进出程序（门斗）进门后需先在门口的“药水脚垫”上停留片刻。以达到消毒杀菌的目的。在门斗更衣柜处脱去大衣，将贵重物品存放于更衣柜内。在门斗鞋柜处更换洁净拖鞋。注意：屏障系统内严禁携带手机、首饰等物品进入。如发现将视为严重违纪行为。人员进出程序（登记处）向工作人员出示《北京市实验动物从业人员上岗证》。在登记处填写《动物实验室进出登记》表。如实填写进出时间及操作内容。填写《N95口罩使用记录表》，领取口罩。领取门禁卡。注意：实验人员第一次进入屏障系统必须在动物中心工作人员的带领、监督下进行，并且严格执行《实验人员隔离制度》。人员进出程序（过渡走廊）进入人员应在过渡走廊处进行手部消毒。如有涂抹香水应尽量洗去。洗后仍有香气者禁止入内.长发者应在此处把头发盘起。留长指甲者应在此处把指甲剪短。进入屏障之前将所带物品、药品进行有效消毒。注意：进入屏障系统不得散发、留指甲、喷香水等。嗜酒、吸烟者也不得进入。违反者将视为严重违纪。

人员进入正压屏障系统程序（一更）

在一更处脱去所穿拖鞋。刷卡进入二更。

人员进入正压屏障系统程序（二更）穿上二更专用拖鞋。戴乳胶手套。戴口罩。穿隔离服从衣架底部抽取隔离服小心打开牛皮纸避免撕破穿隔离服自检：１口鼻、头发（尤其头发帘）不得暴露。２袖口需塞进手套内。３衣链、帽绳需系牢。注意：如果以上任意一条未做到便进入屏障系统者视为严重违纪。人员出正压屏障系统程序在一更脱去衣物用一只手套包裹着另一只手套脱掉。脱下的手套扔到指定的垃圾桶中。脱下的隔离服与牛皮纸一同放入一更的不锈钢桶中。最后摘下口罩。物品进入屏障系统高压消毒(推荐方法)物品经过121度，20分钟高压灭菌后传入。从缓冲间传出。适用物品：耐高温、耐高压物品。如动物笼具，手术器械等金属物品。物品进入屏障系统紫外照射消毒物品从传递仓进入，紫外照射20分钟。紫外照射前需要用消毒液擦拭物体表面。物品从缓冲间传出。适用物品：表面无或少许褶皱隆起并且能直接使用的物品。如瓶装药品、注射器、手术器械、物品进入屏障系统渡槽消毒物品从渡槽传入。在渡槽中浸泡30分钟。物品从缓冲间传出。适用物品：不怕湿、耐腐蚀物品。如SPF包装饲料，手术器械，桶、盆等塑料制品。物品进入屏障系统防紫外消毒适用物品：怕紫外照射的物品（如DNA等生物制剂）将物品用酒精擦拭后用高压灭菌的锡箔纸包裹。经传递仓紫外照射20分钟后传入。从缓冲间传出。物品进入屏障系统冰紫外消毒适用物品：不耐高温、怕紫外照射物品（如病毒、细胞等生物制剂）将物品用酒精擦拭后用高压灭菌的锡箔纸包裹。放入盛有冰的消毒药水中。经传递仓紫外照射20分钟后传入。(冰自带)从缓冲间传出。物品进入屏障系统适用物品：相机、摄像机等拍摄物品。用无菌透明塑料袋密封包裹，经过传递仓20分钟紫外照射后方进入，但使用时不得摘去、弄破塑料袋。从缓冲间传出。注意:可以将镜头的头露在外边,但周围需要严格密封。物品进入屏障系统适用物品：显微镜、离心机等精密实验仪器。物品经过还氧乙烷或钴60处理，密封包装经过传递仓或渡槽传入。从缓冲间传出。本项设备使用需与外单位联系。因此需要提前预约。注意：如物品没有按规定进入，将视为严重违纪动物进入屏障系统屏障区动物实验室仅接受清洁级以上（含）级别的啮齿类实验动物。必要时需在检疫隔离室进行检疫隔离,检测合格后动物方可传入屏障系统。不需要检测的动物，用新洁尔灭或酒精擦拭符合级别要求的包装箱，经传递仓紫外照射30分钟后传入。动物进入屏障区操作全方面消毒运输包装盒紫外照射30分钟屏障内取出包装盒3.隔离环境(Isolationcondition)该环境设施采用无菌隔离装置以保存无菌或无外来污染动物。隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。该环境设施适用于饲育无特定病原体（SPF）、悉生（Gnotobioticanimal）及无菌实验动物(germfree

animal)

。无菌动物

(GermfreeAnimal,GF)无菌动物包括已知菌动物饲养在隔离环境内，体内外无任何可检出的生命体手术隔离器（operatingIsolator)

三实验动物饲养常用的

辅助设施(assistedfacility

)

这是指在动物房舍设施内使用于动物饲养的器具和材料，主要包括笼具、笼架、饮水装置、运输笼和垫料等。这些器具和物品与动物直接接触，产生的影响最直接，务必予以重视。

1.饮水设备和灭菌设备

普通实验动物饮水应符合GB5749的要求

。

屏障和隔离环境内饲养的实验动物饮用水须经灭菌处理。大型的实验动物设施，往往装设无菌水生产设备，用过滤系统和紫外线照射，来清除细菌、真菌和病毒。实验动物的饮水一般无需作蒸溜、离子交换或反渗透等处理，有助于动物对微量元素的利用。

2.笼具(cage)和笼架(rack)

笼具要求能对动物提供足够的活动空间，通风和采光良好;坚固耐用，里面的动物不会逃逸，外面的动物不会闯进;操作方便，适合于消毒、清洗和储运;成本低廉，经济实用。现在国内已有多家厂商，生产各种式样和质量档次的笼具。笼架是承托笼具的支架，使笼具的放置合理，有些还设有动物粪便自动冲洗和自动饮水器。要注意笼具和笼架的匹配，方便移动和清洗消毒。3.动物运输

(transportofanimal)

动物运输应符合安全和微生物控制等级要求，不同品种、品系和等级的动物不得混合装运。

动物运输应配置专用车辆，专人负责，定期消毒、保洁，车辆应装有空调设备。

运输笼具(carryingcage)须经消毒、灭菌后方可回收使用。运输笼具(carryingcage)

高等级啮齿类实验动物运输笼

4.垫料（bedding)

垫料应选用吸湿性好、尘埃少、无异味、无毒性、无油脂的材料。垫料须经消毒、灭菌后方可使用。

第二节环境因素对实验动物的影响

◎实验动物外环境。是指实验动物设施或动物实验设施以外的周边环境。如气候或其他自然因素、邻近的民居或厂矿单位、交通和水电资源等。◎实验动物内环境。指实验动物设施或动物实验设施内部的环境。内环境又细分为大环境和小环境。前者是指实验动物的饲养间或实验间的整体环境状况;后者是指在动物笼具内，包围着每个动物个体的环境状况，如，温度、湿度，气流速度，氨及其他气体的浓度，光照，噪音等等。

一实验动物设施选址1.实验动物繁育、生产及实验场所应避开自然疫源地。2.宜选在环境空气质量及自然环境条件较好的区域。3.宜远离铁路、码头、飞机场、交通要道以及散发大量粉尘和有害气体的工厂、贮仓、堆场等有严重空气污染、振动或噪声干扰的区域。4.实验动物繁育、生产、实验设施应与生活区保持大于50m的距离。二实验动物环境设施建筑要求

1.建筑物门、窗应有良好的密封性。2.走廊宽度不应少于1.5m，门宽度不少于1.0m。3.动物繁育、生产及实验室通风空调系统保持正压操作，应合理组织气流布置送排风口的位置，避免死角，避免断流，避免短路。4.各类环境控制设备应定期维修保养。5.动物繁育、生产、实验室的电力负荷等级，应根据工艺要求确定。应备有应急电源。6.室内的配电设备，应选择不易积尘的设备，并应暗装。电气管线应暗敷，由非洁净区进入洁净区的电气管线管口，应采取可靠的密封措施。三实验动物环境设施建筑卫生要求

动物繁育、生产、实验场所所有围护结构材料均应无毒、无放射性。2.

内墙表面应光滑平整，阴阳角均为圆弧形，易于清洗、消毒。墙面应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面应防滑、耐磨无渗漏。天花板应耐水、耐腐蚀。

四实验动物环境设施

技术指标要求

1

实验动物繁育、生产设施环境指标应符合表1所列要求。2动物实验设施环境指标应符合表2所列要求。表１实验动物繁育、生产设施环境指标

项目小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、兔、小型猪鸡

普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境温度，℃18～2920～2616～2820～2616～28日温差，℃≤-4-44相对湿度，%40～70换气次数，次／ｈ≥8b15a208b15a2015a气流速度,m/s≤0.2压强梯度，Pa≥-1050c-1050c10落下菌数，个／皿≤3无检出3无检出3续表１实验动物繁育、生产设施环境指标

项目小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、兔、小型猪鸡

普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境氨浓度，mg/m3≤14噪声，DB≤

60照度工作照度(Lx)≥动物照度20015～20100～2005～10昼夜明暗交替时间，h12/12或10/14空气洁净度，75或7d

7

5或7d级5或7

注1：—表示不作要求注2：表中氨浓度指标为动态指标。注3：温度、相对湿度压差是日常性检测指标；日温差、噪声、气流速度、照度、氨气浓度为监督性检测指标;空气洁净度、换气次数、沉降菌最大平均浓度、昼夜明暗交替为必要时检测指标。a为降低能耗，非工作时间艾尼克降低换气次数，但不应低于10次/h.b可根据动物种类和饲养密度适当增加c指隔离设备内外静压差d根据设备的要求选择参数。用于饲养无菌动物和免疫缺陷动物时，洁净度应达到5级。五、工艺对设施区域设置的要求

1区域布局1.1前区的设置:包括办公室、维修室、库房、饲料室、一般走廊。1.2饲育区的设置1.2.1繁育、生产区：包括隔离检疫室、缓冲间、育种室、扩大群饲育室、生产群饲育室、待发室、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。1.2.2动物实验区：包括缓冲间、实验饲育间、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。1.2.3辅助区：包括仓库、洗刷间、废弃物品存放处理间（设备）、密闭式实验动物尸体冷藏存放间（设备）、机械设备室、淋浴间、工作人员休息室。2其他设施设备2.1屏障环境和隔离环境均应在压强变化相交处设有缓冲设置。2.2动物实验区的设施应与饲养繁育系统分开设置。2.3有关放射性实验操作应参照GB4792实施。2.4带烈性传染性、致癌、使用剧毒物质的动物实验，均应在负压隔离设施或有严格防护的设备内操作。此类设施（设备）须具有特殊的传递系统，确保在动态传递过程中与外界环境的绝对隔离，排出气体和废物须经无害化处理。应体现“人、动物、环境”

的三保护原则。3设施与设备3.1在实验环境中设置设备时，其设备性能和指标，均须与环境设施指标要求相一致(表1、表2)。3.2不同实验要求的正压、负压设备，必须达到环境设施的指标，方能取得相应的证书。六、废弃物及动物尸体处理

废弃物应作无害化处理并应达到GB8978的要求。

动物尸体应立即焚烧处理，其排放物应达到医院污物焚烧排放规定要求。

1七实验动物环境对实验动物

及动物实验的影响实验动物环境条件对动物的健康和质量以及对动物实验结果有直接的影响，清洁级以上的实验动物，环境条件要求严格，环境指标要求恒定，动物质量有保证。动物实验结果会出现一致性、可靠性和可重复性，也使同类型的实验数据具有可比较的意义。影响实验动物的环境因素很多，这里主要阐述实验动物饲养室内的环境因素对实验动物的影响，例如温度、湿度、气流和速度、噪声、光照度、空气中的微生物和颗粒物等。（一）温度(Temperature)

环境温度缓慢地变化，在一定范围内机体可以自行调节而适应。但气温变化过大或过急对动物的健康将产生不良影响。温度对实验动物的影响表现在生殖、泌乳、机体抵抗力、形态、新陈代谢、实验反应性等方面。温度对生殖的影响一般哺乳类实验动物，当温度过低时，常导致性周期的推迟,而当温度超过30℃时，雄性动物出现睾丸萎缩或形成精子的能力下降;雌性动物出现性周期的紊乱,泌乳能力降低或拒绝哺乳等。如金黄地鼠，当温度低于18℃时,可发生吃仔现象；13℃时，可引起幼鼠死亡；临近4℃时，经短时间即可进入冬眠。

温度对机体抵抗力的影响温度过高或过低都能导致机体抵抗力降低，而患病。大鼠在31℃、鸡在35℃高温应激作用下,出现需氧菌(葡萄球菌属、链球菌属、肠杆菌属、棒状杆菌属)菌群的增加,鸡还出现厌氧菌的消化道链球菌、梭状芽胞杆菌属增加的现象。将BALB/c小鼠从22℃环境移到12℃环境内，其白细胞数发生变化，与免疫反应有关的血液及脾脏中Ｂ和Ｔ细胞的比率亦出现明显变动，免疫功能的异常与疾病发生关系很大。温度对动物形态方面的影响

低温环境下繁殖饲养的小鼠其尾长明显缩短；大鼠在10℃繁殖时其尾长比在30℃条件下约短2cm;喜玛拉雅兔在20℃时,耳、尾、鼻和四肢尖端长白毛,10℃时则长黑毛。温度对动物实验的影响

环境温度不同常使同种动物实验出现不同结果:如不同温度下饲养的小鼠对药物的半数致死量LD50可产生显著差异。环境温度还对药物的急性毒性试验,致癌、致畸、致突变试验，微生物感染试验和免疫试验等动物实验结果产生影响。温度对动物行为和生理机能的影响

温度可使动物的姿式、摄食量、饮水量、母性行为、心跳、呼吸、新陈代谢等出现相应改变。在4℃以下,单饲小鼠摄食量比同样温度下5只一组群饲小鼠高30％。寒冷环境,动物出现立毛寒颤，蜷缩成团。炎热天气,动物饮水量增加,地鼠呈“大”字型睡眠，狗张口伸舌，呼吸加快，喘气明显。小鼠发生流涎现象。（二）湿度(Humidity)

湿度是指大气中的水分含量。按每立方米空气中实际含水量(克)表示时称为绝对湿度；空气中实有含水量占同等温度下饱和含水量的百分比值则称为相对湿度。实验动物相对湿度国标要求在40～70％之间。空气相对湿度对动物机体热调节有密切关系。高温、高湿的环境对动物的热调节极为不利，同时相对湿度过高，微生物易于繁殖，饲料和垫料易霉变，动物室空气中的细菌数与氨浓度也明显增加,容易引起动物的呼吸系统疾病。湿度过低,可导致尘土飞扬，对动物健康不利。在温度为27℃，湿度在40％以下时，大鼠可发生尾部的环状坏死症(ringtail)。有的报道认为在笼中加入垫料或在饲料中添加一定量的脂肪可以防止此病发生。在低湿的环境下，大鼠和小鼠的摄食量、饮水量都略有增加。有时还发生乳母咬仔现象，仔鼠发育不良，体重增长停滞。

（三）气流、速度及换气次数

(Aircurrent、speedandventilation)

1.人类一般可感觉的气流速度为0.2-0.25m/s,而实验动物的气流以0.1-0.2m/s为最佳。在饲养室内保持一定的气流和速度，不仅可使温度、湿度及化学物质组成保持一致,而且有利于将污浊气体排出室外。2.气流和速度与动物体热的扩散有很大关系。气流、速度、温度、湿度均不是各自以单一的因素对动物产生影响，而是在互相关联状态下影响动物。当室内气温较高时，气流有利于对流散热，对动物有良好作用。当室温较低时，气流使动物的散热量增加，加剧寒冷的影响。由于大多数实验动物体型较小，体重与体表面积的比值较大，因此对气流和风速更加敏感。气流速度过小,空气流通不良,动物缺氧,室内臭气充斥，散热困难,造成不舒适感，甚至发生疾病和窒息。气流速度过大，动物体表散热量大，动物摄食量增加。3.适当的换气次数可以为动物提供充足的新鲜空气。但换气次数过多，则会让动物大量消耗体能以弥补因空气快速流动引起的热量损失。国家标准规定：屏障环境换气次数≥15次/小时，隔离环境≥50次/小时。4.病原微生物随空气流动而四处散播。动物设施内各区域的静压状况决定了空气流动方向。在屏障系统中，因静压不同，空气流动方向是从清洁区向污染区流动，动物室内处于正压高于室外；而在污染或放射性实验室，为了不让室内微生物或放射性物质扩散出去，室内处于负压，低于室外。

（四）噪声(noise)

1.噪声一般是指频率高、声压大，带有冲击性或具有复杂波形，给人或动物带来心理或生理不利影响的声音。一般标准要求控制在60分贝以下。2.噪声的来源主要有施工噪声、交通噪声、动物房空调及通风设备产生的噪声和动物自身产生的噪声等。3.噪声可对实验动物产生许多影响：噪声可妨碍受精卵着床，使动物繁殖率下降；突然的噪声可引起豚鼠流产，噪声过强或持续不断诱使母鼠咬死仔鼠或吃掉幼仔；噪声使动物兴奋和控制失去平衡及部分神经细胞受损，实验小鼠在持续性噪声的环境中可产生烦躁不安和食欲减退,DBA小鼠可发生听源性痉挛；噪声可使小鼠的血糖、肾上腺素、心跳数、呼吸数和血压明显增加。有人试验发现，在给小鼠抽血化验血糖时，在电钻打孔发出的强噪声下，前后采血，其血糖值有明显差异。

（五）照明(Illumination)

可见光线对动物机体有多种功能。但照度过强或过暗，时间过长或过短，对实验动物都不利。1.大鼠在2000lx，照射几小时就出现视网膜障碍，连续暴露2天尚有恢复的可能，如果暴露8天以上就不能恢复，即使在60lx照度下，连续照射13周,大鼠也会出现视网膜的退行性变化。国标规定大小鼠的动物照度15~20lx。2.波长和灯光颜色可影响小鼠的自发行为,在蓝、绿、白色光下最低，而在红色与黑暗中最大。大鼠的阴道开口以蓝色照明比红色照明要早3天。3.照明时间,以12小时照明、12小时黑暗大鼠的发情实验可呈现最稳定的4日性周期。如以16小时照明，8小时黑暗则呈现5日性周期或更长。若以22小时照明,2小时黑暗，则性周期长短不一，极不规律，或连续发情或不能繁殖。

第三节实验动物环境监测

和设施的维护

(一）环境检测的项目新建或改建的实验动物设施竣工启用前，须向所属的实验动物管理部门申请进行环境设施的检测，检测合格方能投入使用。实验动物设施是连续运行的，各种环境因素一直处在变动之中，也需要经常性的监测和维护。对实验动物设施的环境条件，国家有标准化的规定，检测项目包括温度、相对湿度、气流速度、梯度压差、空气洁净度、空气落菌数、氨浓度、噪声、照度和换气量等。

空气落菌数，是检测空气生物洁净度的指标，用血琼培养基，置于被检房舍的空间，暴露30分钟后，计算培养基上的落菌数尘埃粒子测定，是空气洁净级别的指标，10-20平米的房间布点3-5个，用专用仪器测定，数据作统计分析。温度、湿度测定，包括日温差、温湿度的均匀性等。气流速度测定，使动物处在合理的风速区域。换气次数，测定送风口或出风口的风速，然后参照风口面积和房间容积计算。(二)实验动物设施的维护1.空气过滤系统的维护，系统中有初效（efficiencyparticulateairfilter)、中效(middleefficiencyparticulateairfilter)和高效三级过滤(highefficiencyparticulateairfilter)，过滤材料在工作时会沾染粉尘，逐渐造成堵塞，而影响设施内的空气质量。初效过滤材料应2至3个月更换一次，过滤材料经清洗、干燥，可重复使用;中效材料3至18个月更换一次，经清洗、干燥也可重复使用;高效材料一般1—3年更换一次，一般不重复使用。材料更换的次数取决于空气使用量和周围空气的质量。勤换初效和中效材料，可减少对高效材料的更换，因为更换高效过滤材料会在一定时间内造成设施内环境因素的不稳定。空调系统的维护，空调系统主要控制温、湿度两个重要的环境指标，空调的热交换部件要经常清洗，并要经常检查制冷剂有否泄漏，自动控温装置是否有效。灭菌系统的维护，注意高压灭菌装置和饮水灭菌系统是否有效，要经常监测。此外，还有传递窗的紫外线灭菌是否有效，传递渡槽的消毒液要及时更换等一些日常的维护工作也不能忽视。总之做好设施的维护工作，反映了设施的管理工作水平，要健全制度，建立岗位责任，在管理上下功夫。

北京大学医学部实验动物科学部周淑佩饲料营养的重要性饲料营养是实验动物生长、繁殖、以及遗传和各种生物学特性得以充分表达的最直接、最重要的影响因素。饲料的质量对实验动物的质量和保证动物实验结果的准确性及再现性都是至关重要的。主要内容

饲料营养成分及其作用影响营养需求的因素实验动物的营养需要与饲养标准饲料的分类及其营养价值的评定

生物从外界摄取维持自身生命所必需的物质及其消化、吸收和排泄过程称为营养(nutrition);动物自发地从外界寻求到的营养物质称为食物(food);人类饲喂给动物的营养物质称为饲料(feedstuff);食物或饲料中所包含的各种营养物质统称为营养素（nutrients）。

动物机体需要的营养物质达50余种，可以概括为七大类蛋白质脂肪碳水化合物矿物质维生素纤维素和水水的营养作用动物体重要组成部分运送各种营养物质和代谢物的载体参与体温调节直接参加生化反应，促进各种生理活动动物对水的需要量

受多种因素制约动物种类年龄生理状态、生长阶段环境温湿度等动物对水的摄取饲料中（不推荐用青饲料作为水源，可能会伴随潜在寄生虫感染）饮水蛋白质及其营养功能

粗蛋白：蛋白质：

由氨基酸组成非蛋白氮：

未结合成蛋白质分子的个别氨基酸、植物体中由无机氮合成蛋白质的中间产物和植物蛋白质经酶类和细菌分解后的产物等蛋白质的作用构造机体组织、细胞修补机体组织代替碳水化合物及脂肪的产热作用维持机体正常生化反应及新陈代谢必需氨基酸在动物机体内不能合成或合成的速度及数量不能满足动物正常生长需要，必须由饲料来供给，它包括精氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、色氨酸。在饲料学中，赖氨酸被称为第一限制性氨基酸，蛋氨酸则被称为第二限制性氨基酸。但对于家兔及豚鼠第一限制性氨基酸是精氨酸非必需氨基酸指动物体内能够合成，不依赖饲料供给的氨基酸，包括丙氨酸、丝氨酸、门冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、胱氨酸、甘氨酸等。

必需氨基酸(Essentialaminoacid)

和非必需氨基酸(No-essentialaminoacid)

氨基酸平衡：指日粮氨基酸组分之间的相对含量与动物机体氨基酸需要量之间比值较为一致的相互比例关系。氨基酸失衡：一种或几种必需氨基酸过多或过少，相互间比例与动物的需要不一致，从而造成饲料利用率降低，生长迟缓、繁殖力下降的现象。

用多种饲料搭配或添加部分必需氨基酸，来提高饲料蛋白质的营养价值，即为蛋白质的互补作用。

所谓蛋白质的互补作用实际上是必需氨基酸的互相补充。热能的主要来源构成动物组织的重要组成部分，如神经、肌肉及血液等均含有脂肪保证动物对脂溶性维生素的消化、吸收和利用

亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸在动物体内不能合成，称为必需脂肪酸。必需脂肪酸是构成组织的组成成分，对维持细胞及亚细胞结构的功能和完整性很重要。必需脂肪酸参与类脂代谢，在调节胆固醇的代谢，特别是输送、分解和排泄方面有重要意义。亚油酸是合成前列腺素的原料。通常分为粗纤维和可溶性碳水化合物两大类。粗纤维由纤维素、半纤维素、木质素等所组成。一般动物难以利用粗纤维，但对草食性动物，粗纤维是必不可少的。在草食动物饲料中，如粗纤维不足，可造成消化机能紊乱，消化道疾病等。在反刍动物和马属动物，粗纤维在瘤胃及盲肠中经发酵形成挥发性脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸），参与碳水化合物代谢，通过三羧酸循环，形成高能磷酸化合物，产生热能。可溶性碳水化合物，包括单糖、二糖、多糖和淀粉等，是动物机体能量物质的主要来源。除主要供给热能外，多余部分可转化为体脂和糖原，贮存在机体中。常量元素（占动物体重的0.01％以上）包括钙、磷、钠、氯、硫、镁、钾等微量元素（不足体重的0.01％）包括铁、铜、锌、锰、碘等元素。是动物体的重要组成部分（如钙、磷是构成骨骼的主要成分）在各种生理过程起重要作用（如铁参与血液对氧的运送过程），供给不足会出现一系列缺乏症，过量则会出现中毒症。

常量元素的营养含量最多，占机体矿物质总量的70％以上是骨骼的主要组成部分.钙还对维持神经、肌肉的正常功能，正常凝血过程有重要作用;磷是某些酶的重要组成部分，在脂类代谢和运输、能量代谢中起重要作用钙、磷或维生素D缺乏时，在生长期动物可形成软骨病，成年动物则造成骨质疏松。血钙过低，会引起钙痉挛，缺磷时动物食欲不良，有异食癖钙过多可引起骨硬化症、软组织钙化并影响其他矿物元素的吸收。磷过多可使钙不足，引起严重骨重吸收，发生肋骨软化，影响正常呼吸。因此，既要保证适量的钙磷数量又要保持两者适宜的比例在维持渗透压以及机体酸碱平衡方面起协同作用钾促进细胞对中性氨基酸的吸收及蛋白质的合成，维持心脏、肾脏、肌肉正常活动。还参与丙酮酸盐激酶的活化、肌酸磷酸化作用，影响细胞对葡萄糖的吸收。钠大量存在于肌肉中，使肌肉兴奋性加强，对心肌活动起调节作用氯是胃液中的主要阴离子，形成盐酸使胃蛋白酶活化，并保持胃内酸性，有杀菌作用动物可以通过肾脏调节钾、钠、氯的排出量。食盐过多，饮水受限或肾功能异常时，也会出现中毒症状电解质镁是构成骨骼和牙齿的成分,还分布于软组织细胞中，是焦磷酸酶、胆碱脂酶、三磷酸腺苷等多种酶的活化剂，在糖与蛋白质代谢中起重要作用硫分布于全身每个细胞中，是蛋氨酸、胱氨酸、生物素的重要成分微量元素的营养

微量元素参与动物机体的生长发育、繁殖等主要机能和维持机体的健康。当缺乏或过剩时，会引起动物疾病的发生微量元素铁大部存在于血红蛋白和肌红蛋白中，部分与蛋白质结合形成铁蛋白存在于肝、脾和骨髓之中，少量存在于色素和多种氧化酶中。铁对保证机体组织内氧的输送有重要作用并与细胞内生物氧化过程密切相关。铜

主要分布于肝、脑、肾、心的色素部分以及毛发之中，是多种酶的成分和激活剂，红细胞的生成、骨骼的构成，被毛色素的沉着等均需要适当的铜。硒分布于全身所有细胞，以肝脏、肾脏、肌肉中含量最高。是谷胱甘肽过氧化物酶的主要成分，对保护细胞膜的完整性起重要作用并为保护胰腺细胞的正常功能所需，还有助于维生素E的吸收和存留。其他微量元素

锰、锌、碘、钴、铬等同样为动物所必需，缺乏上述元素能引起某些组织的及机能异常。维生素

大多数在动物体内不能合成，必须由饲料或肠道寄生的细菌合成后提供。正常情况下,水溶性维生素和维生素K不会缺乏，但在高温灭菌时应当给予补充。豚鼠和灵长类动物体内不能合成维生素C，必须在饲料中供给。脂溶性维生素

包括维生素A、D、E、K，可溶于脂肪和脂肪溶剂中，不溶于水。吸收后可在体内贮存，短期供给不足不会对生长发育和健康产生不良影响。主要贮存于动物的肝脏中，其余贮存于脂肪中，需要时释放入血中细胞和亚细胞结构必不可少的重要成分，有促进生长发育，维护骨骼正常生长、修补，维护上皮组织完整，促进结缔组织中粘多糖合成、增强疾病抵抗力，维持正常视觉等作用。还与繁殖机能和免疫机能有关缺乏将对机体产生广泛影响：机体不能合成视紫红质,产生夜盲症；上皮组织增生、角质化、易被细菌感染。尤其对眼、呼吸道和消化道、泌尿及生殖器官的影响最明显；影响幼龄动物生长和骨骼的正常生长发育主要作用为调节钙和磷的代谢，维持骨骼牙齿的正常发育，还参与柠檬酸的代谢等缺乏严重影响钙磷代谢，影响骨骼生长发育。幼龄动物出现佝偻病，成年动物出现骨质疏松,特别是妊娠、哺乳和老年期的动物易出现骨质疏松。此外,血中钙、磷含量降低还影响肌肉和神经系统的正常功能。保持细胞和细胞内结构的完整，防止某些酶和细胞内成分遭到破坏抗氧化作用可抵制组织膜内多价不饱和脂肪酸的氧化，稳定细胞脂类，保证红细胞完整是细胞呼吸的必需因子，参与体内DNA、维生素C和辅酶Q的合成与动物的生殖机能、免疫机能密切相关缺乏可使动物发生肌营养不良，急性表现为心肌变性，亚急性表现为骨骼肌变性。长期缺乏可使红细胞膜溶解，出现溶血性贫血；严重影响动物的繁殖机能，雄性动物精细胞形成受阻，精液品质不佳，精子数减少。雌性动物受胎率下降，产生死胎或胎儿被吸收。是一组化合物的总称，最重要的是K1、K2、K3三种。维生素K1存在于绿色植物中，K2由微生物合成。促进肝脏合成凝血酶元增强胃肠道蠕动和分泌机能，参与体内的氧化还原过程一般不会缺乏，因广泛存在于饲料中，且大肠内的细菌也能合成，但无菌动物可发生维生素K缺乏。水溶性维生素主要有维生素B族和维生素C。由于很少或几乎不在体内贮存，水溶性维生素短时间缺乏或不足均会引起体内某些酶活性的改变，阻抑相应的代谢过程，从而影响动物生长发育和抗病力反刍动物瘤胃微生物可合成足够需要的B族维生素。单胃动物虽肠道微生物也可合成，但可以利用的较少，多数随粪排出体外具有食粪癖的动物如兔，可从粪中得到维生素B族的补充

动物机体内贮存量在所有维生素中最少，应经常供应参与碳水化合物代谢，在能量代谢和葡萄糖转变成脂肪的过程中作为一种辅酶。另外，对维持神经组织及心肌的正常功能、维持正常的肠蠕动及脂肪在消化道的吸收均起一定作用缺乏将影响生长，可引起食欲减退、消化不良、胃部松弛等消化障碍，还会影响神经活动性能，继续缺乏会造成神经炎，使神经系统进一步退化，导致瘫痪和肌萎缩

肝和肾含有较高浓度的核黄素，但机体的贮存能力有限参与能量代谢，是生物氧化过程中不可缺少的重要物质，对促进生长，维护皮肤和粘膜的完整性，对眼睛感光过程、晶体的角膜呼吸过程具有重要作用缺乏通常无明显的和特异的病变，甚至在严重缺乏时也只表现若干非特异性症状，如幼龄动物表现为生长停滞，食欲减退，被毛粗乱，眼角分泌物增多等存在于一切组织之中它是辅酶A的成分，还是形成乙酰胆碱所必需的物质参与碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢，特别是对脂肪的合成与代谢起十分重要的作用缺乏可使动物生长速度下降，皮肤受损，神经系统紊乱，抗体形成受阻是卵磷脂结构中的一个关键部分，在体内有重要的生理功能作为某些磷脂类物质的一种成分，通过脂肪代谢防止脂肪肝作为乙酰胆碱的成分，在神经传导方面起作用作为不稳定甲基来源，用于肌酸的生成及几种激素的合成缺乏可引起动物生长缓慢，脂肪代谢障碍在生物氧化过程中起重要作用，对维护神经系统、消化系统和皮肤的正常功能，扩张末梢血管和降低血清胆固醇水平也有作用缺乏可使动物生长减缓、食欲丧失、鳞状皮炎、神经反射紊乱、运动失调、骨骼发育异常