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文档简介

药敏实验目的要求了解药物敏感试验的方法和实际意义掌握试管稀释法和纸片扩散法的原理、操作方法及结果判读方法试管稀释法纸片扩散法原理以液体培养基将抗生素作不同浓度的稀释，然后接入待检菌，定量测定抗菌药物对被测菌的最低抑菌浓度（MIC）。材料水解酪蛋白（M-H）液体培养基1.9ml×1管、1ml×9管葡萄球菌菌液100U/ml青霉素溶液移液管2支方法1.菌液准备：葡萄球菌稀释液2.抗菌药物稀释：倍比稀释1-9号管3.接种：0.05ml/管，接种至1-10号管4.培养：置37℃生化培养箱，培养18-24小时5.结果判读：肉眼观察，以不出现肉眼可见生长(浑浊现象）的最低药物浓度为该药对测试菌的MIC菌液准备将待测菌的单个菌落接种于2毫升MH液体培养基中，37度培养4-5小时，校正浓度，使其相当于0.5麦氏管的浊度。再按1:200稀释后备用。培养置37℃生化培养箱，培养18-24h纸片扩散法试验程序材料普通琼脂平皿培养基，葡萄球菌12-16小时液体培养物。含抗生素的干燥滤纸片（直径6mm，每个纸片的药物含量：青霉素2U/片，链霉素、氯霉素、庆大霉素均为10ug/片）。涂布棒、镊子、量尺。操作方法取琼脂平皿，进行如下操作：1.标记分区2.涂布接种3.贴片4.培养5.结果观察1.标记分区青链庆氯反面观2.涂布接种4.培养置37℃生化培养箱，倒置培养18-24小时5.结果观察抗生素纸片纸片法抑菌圈直径（单位：mm）敏感标准青霉素（5U/片）<10抗药10-20中度敏感>20高度敏感链霉素（10U/片）<10抗药10-15中度敏感>15高度敏感氯霉素（10U/片）<10抗药10-17中度敏感>17高度敏感庆大霉素（10U/片）<10抗药10-15中度敏感>15高度敏感试管法和纸片法优缺点优点缺点试管法纸片法1.操作简单2.省时、省力3.经济实惠1.不能定量2.影响结果的因素较多，如纸片质量、培养基类型等1.能精确测定MIC值2.培养过程不易污染1.操作繁琐2.费时、费力、费材意义可预测抗菌治疗的效果指导抗菌药物的临床应用

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