SPF屏障系统饲养工作人员操作规程(SOP)

SPF屏障系统饲养工作人员操作规程（SOP）1.所有工作人员严格按照进出SPF动物房流程图所标示的程序进出屏障系统2．屏障系统内准备工作1）配置消毒液：进入屏障系统后，首先配制适量的0.2%的过氧乙酸或2%的苯扎溴铵两份2）分别浸泡各个房间的抹布和拖布，备用3）酸性水的配制：用盐酸调配冷却后的高压灭菌水，PH试纸测定酸度，保证其酸度在2.0-3.0之间，配好后备用；4）小鼠饮用水装瓶：取水瓶在灭菌水容器中取水，尽量保证手不要碰到灭菌水，装水后平放时尽量使水平面达到瓶颈部，盖好瓶塞，瓶塞松紧要合适。5）笼盒的准备：将灭菌后的笼盒冷却干燥，放适量高压灭菌垫料，垫料不超过3cm，垫料超过一定量会接触到水瓶嘴，吸水造成笼盒垫料完全湿掉，不适合小鼠生活，易造成小鼠死亡。笼盒换取（请尽量在操作间更换笼盒，若操作间被占用，可以使用手术台或者双层车更换笼盒）1）打开超净台紫外灯照射15min2）把准备好的笼盒、水瓶、铁网、盒盖放在超净台旁以备用3）从IVC笼架上取笼盒：稍稍上抬笼盒后外抽，顺利取出放在超净台上。4）抽出笼盒后，用浸泡过的抹布擦拭IVC笼架5）之后75%酒精消毒双手后，打开笼盖，用浸泡在0.2%的过氧乙酸溶液或2%苯扎溴铵中的镊子将老鼠逐个放入备用的干净的笼盒中（注意在此过程中严禁夹取小鼠背部），然后将辐照饲料放在饲料糟中，放置饲料时不宜放置过多，请注意摸索不同数量小鼠的食量，所放饲料尽可能恰好满足笼内小鼠一周所需，以防止饲料变质或者减少中途撤笼的浪费，接着将使用过的水瓶更换为新准备好的水瓶，然后将笼盖盖好（此处要特别注意的是保证笼盒边缘密封），之后放回擦拭过IVC笼架上（注意此处要放到位，保证气流循环畅通），并确保其标牌的正确性4）笼盒、水瓶等一周至少更换一次，铁网、笼盖每三个周至少更换一次，IVC架的送风嘴和回风嘴保证每月至少清洗一次；更换笼盖、铁网前请饲养员及时和灭菌师傅沟通，请师傅灭菌足够的笼盖、铁网备用。5）每换完一盒老鼠，所有镊子要在0.2%过氧乙酸溶液或2%苯扎溴铵中浸泡之后才能再次使用。6）请我们工作人员每天上午10:00，下午3:00分别阶段性推出一次脏笼盒，以便于清洗，正常工作时间如果调休的话，请提前和相关工作人员做好协调。7）当天的整个换笼过程结束后，，请尽快把所更换的笼盒拖入缓冲间，之后再打扫房间卫生饲养员所管辖区域的观察：（印制的不同颜色的卡片首先发给每个楼层的饲养管理员，实验者实验进行到一定阶段需要提高紧急级别的话，请提前到饲养管理员处进行备案，并领取相应级别的卡片，放于卡牌上，原来卡片的外侧，同时保留两张卡片。）动物中心拟开始实施分级管理制度：紧急级别由高到低分为：一级紧急、二级紧急、三级紧急，分别用红色、黄色、蓝色卡片表示，要求1）红色卡片标记的笼位，每天早上下午各观察一次；2）黄色卡片标记的笼位，每天至少仔细观察一次3）绿（蓝）色卡片标记的笼位，每天观察一次。房间的清洁与消毒:

1）2%过氧乙酸浸泡抹布擦拭超净台、实验台、双层车台面，关掉电源（一定确保关掉电源）。2）使用所在房间的扫把，清扫整个房间地面，请保证不留死角，清扫后垃圾带走。3）装好拖布，拖地，，保证消毒整个房间地面，务必不留死角，请特别注意IVC笼架下面。4）动物饲养间、准备间、SPF房内走廊、操作间地面请每天，清扫、拖地消毒。5）动物饲养间、准备间、走廊、操作间等墙壁以及男更女更墙壁、水槽等，请每周用消毒水浸泡抹布擦洗一次消毒（此项工作时间暂定为周五下午，周五不上班的定于周日上午）。6）饲养间、清洁走廊等处的回风口过滤膜请每月在准备间冲洗一次，之后过氧0.2%乙酸浸泡二十分钟后重新装上使用。6.饲养日志填写:7.死亡记录:出动物房后，请于当天填写饲养日志，要求饲养日志准确填写，不留空白，当天未做的事情，请直接填“无”每天所配制的消毒液，请把所配制消毒液详细配方、配置的液体总量书写在当天饲养日志的背面（在饲养日志未作出修改之前，请按此办法书写）请做好各人所负责笼架的小鼠的死亡记录，发现小鼠死亡后，请不要做任何处理，然后对此小鼠请精确定位：例如5304-A-I-2-C，并及时通知小鼠所有人以及楼层管理员，若死亡小鼠在通知后的第