微生物检验质量控制

微生物检验的质量控制

温州医学院检验医学院

温州医学院附属第一医院周铁丽微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol）

是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。室内质量控制

室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。室间质量控制评价

室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。

检验前的质量保证

检验前程序：又叫分析前期。

指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤。包括

检验申请标本的采集、运送与接收微生物检验中的质量保证人员的组织与管理规范的操作规程试剂培养基设备检验过程试剂、培养基的质量控制

有效期外观性能测试保存各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌

硝酸盐还原试剂大肠埃希菌醋酸钙不动杆菌每批，以后每次靛基质试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每天甲基红试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每周V-P试剂产气肠杆菌大肠埃希菌每批，以后每周常用试验、染液的推荐菌株

试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验金黄色葡萄球菌肺炎链球菌氧化酶试验铜绿假单胞菌大肠埃希菌杆菌肽试验A群链球菌B群链球菌奥普托欣试验肺炎链球菌草绿色链球菌革兰染液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌抗酸染液结核分枝杆菌混合非抗酸菌测定各种培养基性能的菌种

培养基质控菌株判定标准羊血琼脂平板

金黄色葡萄球菌ATCC25923生长

生长试验

大肠埃希菌ATCC25922生长溶血反应

肺炎链球菌ATCC19615生长，α溶血化脓性链球菌ATCC6305生长，β溶血

杆菌肽敏感（纸片法）化脓性链球菌ATCC6305>10mm，敏感B群链球菌<10mm，耐药Optochin敏感（纸片法）

肺炎链球菌15∽18mm，敏感涎链球菌<15mm，耐药测定各种培养基性能的菌种巧克平板生长试验淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌肺炎链球菌生长SS平板鼠伤寒沙门菌伤寒沙门菌福志贺菌大肠埃希菌

肠球菌生长，黑色菌落中心生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落部分抑制生长，红色混浊菌落部分抑制生长测定各各种培培养基基性能能的菌菌种麦康凯凯平板板大肠埃埃希菌菌生长长，红色混混浊菌菌落伤寒沙沙门菌菌生长长，无色透透明菌菌落中国蓝蓝琼脂脂大肠埃埃希菌菌生长，，蓝色色菌落落伤寒沙沙门菌菌生长，，无色色菌落落营养琼琼脂金黄色色葡萄萄球菌菌大量生生长福志贺贺菌大量生长厌氧血平板板脆弱拟杆菌菌生长产气荚膜梭梭菌生长，β溶溶血碱性蛋白胨胨水霍乱弧菌大量生长大肠埃希菌菌抑制生长测定各种培培养基性能能的菌种弯曲菌琼脂脂空肠弯曲菌菌生长大肠埃希菌菌部分抑制TCBS平平板霍乱弧菌生长，黄色色菌落副溶血性弧弧菌生长，蓝绿绿色菌落沙保弱琼脂脂白色念珠菌菌生长大肠埃希菌菌部分或完全全抑制需氧血液增增菌液肺炎链球菌菌生长化脓性链球球菌铜绿假单胞胞菌白色念珠菌菌厌氧血液增增菌液脆弱拟杆菌菌生长各种鉴别培培养基的测测试菌种培养基阳阳性对对照菌阴阴性对照照菌赖氨酸脱羧羧酶迟缓爱德华华菌费枸橼酸杆杆菌鸟氨酸脱羧羧酶产气肠杆菌菌费枸橼酸杆杆菌精氨酸双水水解酶阴沟肠杆菌菌普通变形杆杆菌蛋白胨水（（靛基质））大肠埃希菌菌阴沟肠杆菌菌各种鉴别培培养基的测测试菌种培养基阳阳性对对照菌阴阴性对照照菌MR大肠埃希菌菌阴沟肠杆菌菌V-P阴沟肠杆菌菌大肠埃希菌菌枸橼酸盐（（西蒙氏））产气肠杆菌菌迟缓爱德华华菌苯丙氨酸脱脱氨酶雷极变形杆杆菌费枸橼酸杆杆菌O-F试验验管铜绿假单胞胞菌（氧化化型）洛菲不动杆杆菌（不利利用）大肠埃希菌菌（发酵型型）硝酸盐还原原大肠埃希菌菌洛菲不动杆杆菌各种鉴别培培养基的测测试菌种培养基阳阳性对照照菌阴阴性对照菌菌胆汁-七叶叶苷粪肠球菌化脓性链球球菌脱氧核糖核核酸琼脂粘质沙雷菌菌表皮葡萄球球菌氰化钾肉汤汤产气肠杆菌菌迟缓爱德华华菌丙二酸盐产气肠杆菌菌迟缓爱德华华菌尿素琼脂雷极变形杆杆菌（快））大肠埃希菌菌肺炎克雷白白菌（慢））半固体琼脂脂动力试验验大肠埃希菌菌肺炎克雷白白菌仪器设备的的质量控制制设备控控制范范围备备注高压灭菌器器121℃定期用嗜热热芽胞杆菌菌测试（每每月）孵育箱35±1℃定期加水水浴箱37±0.5℃定期加水、、清洁内壁壁冰箱4±2℃℃定期清洁内内部CO2箱5-10%淋病奈瑟氏氏菌检测效效果厌氧箱美兰或铜绿绿假单胞菌菌测试厌氧氧条件生物安全柜柜更换滤网，，紫外线消消毒性能检检测（每三三个月）血液培养仪仪培养瓶进行行少量生长长试验；瓶瓶位定期校校正微生物鉴定定仪探测部位定定期清洁；；鉴定卡、、条、板测测试标本检验过过程的质量量控制选择合理的的检验项目目选择适当的的标本正确书写检检验申清单单直接诊断直接发现病病原体---脓、、脑脊液、、胸腹水等等无菌部位位标本确定标本是是否合格，，并推测病病原体---痰液液标本发现病原体体并进行初初步计数---尿液液标本为培养基和和培养方法法的选择提提供信息病原菌的分分离培养呼吸道标本本接种血琼脂脂平板、巧巧克力平板板、麦康复复凯平板和和沙保弱琼琼脂，并将将巧克力血血平板置5%-10%CO235℃环境境中培养。。粪便标本接种SS平平板、麦康康凯平板或或中国蓝平平板血液培养在血液增菌菌培养期间间，应至少少在24h∽48h盲目翻种种一次，以以后有可疑疑细菌生长长即刻翻种种，尽早发发现病原菌菌。病原菌的鉴鉴定菌落形态观观察--涂涂片染色镜镜检--生生化鉴定--血清学学试验---氧化酶试验验不应在糖糖类发酵选选择性平板板上进行，，以免假阴阴性结果出出现。---在肠道选择择性平板上上应挑取菌菌落进行生生化反应，，生化反应应符合，血血清学凝集集阳性者可可确认报告告。不能从选择择性平板上上挑取菌落落进行血清清学凝集，，会因为交交叉抗原的的存在或抗抗原的丢失失而导致假假阳性或假假阴性。每次血清凝凝集试验时时，应用生生理盐水作作对照。防防止粗糙型型菌落造成成的假凝集集药敏试验的的质量控制制要点培养基纸片菌量操作孵育：时间、温度度、平板放放置结果判断质控菌株纸片扩散法法的质控菌菌株金黄色葡萄萄球菌ATCC25923大肠埃希菌菌ATCC25922大肠埃希菌菌ATCC35218（用于于β内酰胺胺酶抑制剂剂复合制剂剂）铜绿假单胞胞菌ATCC27853粪肠球菌ATCC29212流感嗜血杆杆菌（用于于HTM培培养基）ATCC49247、49766淋病奈瑟菌菌（用于GC琼脂））ATCC49226肺炎炎链链球球菌菌（（用用于于5%羊羊血血MH琼琼脂脂））ATCC49619失控控的的常常见见的的原原因因---质质控控结结果果记记录录错错误误---量量取取抑抑菌菌环环直直径径时时读读数数错错误误---标标准准菌菌株株被被污污染染或或其其它它改改变变---接接种种的的菌菌悬悬液液太太浓浓或或过过淡淡---0.5管管麦麦氏氏浊浊度度标标准准管管未未摇摇匀匀或或已已过过期期失失效效---孵孵育育温温度度或或气气体体环环境境不不正正确确---MH培培养养基基质质量量有有无无问问题题---含含药药纸纸片片失失效效检验验后后的的质质量量保保证证检验验后后程程序序：：也也称称分分析析后后期期。。指检检验验后后全全部部过过程程。。包括括检验验结结果果的的评评审审与与报报告告---报报告告时时间间、、分分级级报报告告、、危危急急值值报报告告及及记记录录标本本的的处处置置---感感染染性性废废弃弃物物菌种种保保存存方方法法培养养基基保保存存法法快速速冷冷冻冻法法冷冻冻干干燥燥法法菌种种保保管管定期期转转种种制备备记记录录卡卡专人人负负责责室内内全全面面质质量量控控制制全面面实实施施各各项项质质量量控控制制内内容容对人人员员要要及及时时进进行行培培训训和和考考核核严格格审审核核标标本本和和结结果果报报告告在日日常常标标本本中中掺掺入入模模拟拟标标本本，，进进行行盲盲点点试试验验发现现误误差差，，应应及及时时找找出出原原因因，，进进行行改改进进室间间质质量量控控制制的的实实施施组织织单单位位：：各级级临临床床检检验验中中心心和和参参考考实实验验室室工作作任任务务：：定期期或或不不定定期期地地进进行行熟熟练练程程度度考考核核和和盲盲点点试试验验检检查查。。定期期或或不不定定期期地地举举办办各各种种学学习习班班，，提提高高各各级级技技术术人人员员的的技技术术水水平平，，学学习习新新的的知知识识。。提供供或或督督促促有有关关部部门门提提供供合合格格的的标标准准化化的的试试剂剂、、抗抗血血清清、、培培养养基基等等实实验验必必需需品品。。